山东大学学报 (医学版)

对内皮细胞MCP1表达的影响及二甲双胍的干预研究

张栩1，于文2，管庆波1，赵家军1

2009, 47(11): 1-5.

摘要 ( 1349 )

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目的观察髓过氧化物酶（MPO）对内皮细胞单核细胞趋化蛋白1（MCP1）表达的影响及二甲双胍的干预作用。方法应用westernblot检测内皮细胞内MCP1、腺苷酸活化蛋白激酶α亚基（AMPKα）蛋白表达，酶联免疫吸附法检测细胞培养液中单核细胞趋化蛋白1的含量变化。同时应用RNA干扰技术，进一步观察AMPKα的作用。结果MPO显著增加MCP1的蛋白表达和培养液中MCP1的浓度（P＜0.01），随作用浓度和时间增加而显著增强。二甲双胍显著减少内皮细胞MCP1的蛋白表达和培养液中MCP1的浓度（P＜0.01），而AMPKαSiRNA干预后，二甲双胍对内皮细胞MCP1的影响作用显著减弱（P＜0.01）。结论MPO可刺激内皮细胞MCP1的蛋白表达和分泌，二甲双胍通过促使AMPKα磷酸化，激活AMPKα，抑制MPO对内皮细胞的促炎性反应，从而发挥其有益作用。

内脂素基因在不同糖耐量个体脂肪组织的表达差异

姜秀云1，郑冬梅1，庄霞2，张海清1，孔磊1，管庆波1，赵家军1

2009, 47(11): 6-8.

摘要 ( 1484 )

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目的探讨2型糖尿病、糖耐量减低者内脏和皮下脂肪组织的内脂素基因表达及与相关代谢指标的关系。方法研究对象均为汉族人群，对照组23例,无糖尿病家族史；糖耐量减低组（IGT组）18例；2型糖尿病组(T2DM组)22例。同时测量血压，计算体质量指数（BMI）及腰臀比(WHR)，测定空腹血糖（FBG）、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白（HDLC）、低密度脂蛋白（LDLC）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹胰岛素（Fins）等指标，并计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMAIR）。半定量RTPCR法检测脂肪组织内脂素基因的表达水平。结果T2DM组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量高于IGT组和对照组(P均＜0.01)。IGT组与对照组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量差异无统计学意义(P＞0.05)。对照组、IGT组及T2DM组皮下脂肪组织的内脂素基因表达量无统计学差异(P＞0.05)。肥胖/超重组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量高于体质量正常组(P＜0.01)。各组网膜脂肪组织的内脂素基因表达量均高于对应的皮下脂肪组织的表达(P均＜0.01)。相关分析中,网膜脂肪组织内脂素基因表达与WHR相关(P＜0.05 )；与年龄、BMI、SBP、DBP、FINS、FBG、HbA1C、HOMAIR均无相关性(P＞0.05)，而皮下脂肪组织内脂素基因表达则与TC相关(P＜0.05)。结论内脂素在汉族人群T2DM、肥胖者中表达增加，且主要在内脏脂肪组织中表达，在维持葡萄糖稳态平衡中发挥作用。

葡萄糖耐量减低人群血小板相关功能研究

刘燕1，王红梅2,亓文波1

2009, 47(11): 9-13.

摘要 ( 1230 )

PDF (295KB) ( 230 )

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目的探讨糖耐量减低（IGT）人群血小板活化状态及影响因素。方法选择IGT组33例、糖尿病组和正常对照组各30例为研究对象。采用流式细胞术(FCM)检测血小板膜蛋白CD62P、血小板激活复合物(PAC1)阳性率和平均荧光强度(MFI)；电阻抗法测定血小板数目(count)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)及大血小板比率(PLCR)等参数及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDLC)、空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FIns)。结果IGT组、糖尿病组CD62P%(P＜0.01)、CD62PMFI(P＜0.05)、PAC1%(P＜0.01)、MPV(P＜0.05)、PDW(P＜0.05)及PLCR%(P＜0.05)均较正常对照组升高；IGT组与糖尿病组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。多元回归分析显示，IGT组与CD62P密切相关的因素依次为PLCR、LDLC、TC和体质量指数（BMI）；与PAC1相关的因素依次为PLCR、MPV及DBP。结论IGT人群存在与糖尿病同等程度的血小板活化；LDLC、TC、DBP及BMI是影响血小板活化的因素。

慢性阻塞性肺疾病与胰岛素抵抗的临床研究

黄芬，蒋钰，朱厚珍，李春明

2009, 47(11): 14-16.

摘要 ( 1191 )

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目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）与胰岛素抵抗（IR）的相关性。方法选择330例COPD患者，根据《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》（2007年修订版）分为：轻度COPD组95例，中度COPD组95例，重度COPD组75例，极重度COPD组65例，并设正常对照组40例。取新鲜标本以全自动生化分析仪测定所有对象的空腹血糖、胰岛素、血脂，免疫比浊法测定尿白蛋白排泄率，电发光测定法测定胰岛素敏感指数（ISI）等指标。结果与正常对照组相比,各COPD组空腹血糖、血脂、尿白蛋白排泄率均显著升高,ISI显著降低(P均＜0.05)。与轻、中度COPD组相比，重度、极重度COPD组空腹血糖、血脂、尿白蛋白排泄率显著升高,ISI显著降低(P均＜0.05)。结论慢性阻塞性肺疾病的患者存在胰岛素抵抗，并随疾病程度的加重，胰岛素敏感性降低。

胰岛素抵抗大鼠脑组织APP代谢及其相关酶的表达及吡格列酮的干预效果

袁树华1，高顺宗1，刘雪平1，郝跃伟1，赵婷婷2，侯亮1

2009, 47(11): 17-20.

摘要 ( 1200 )

PDF (508KB) ( 172 )

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目的观察胰岛素抵抗（IR）大鼠脑组织β淀粉样蛋白（Aβ）、淀粉样前体蛋白（APP）及其代谢相关酶的表达及吡格列酮(PIO)的干预效果。方法从45只Wistar大鼠中随机选取10只作为对照组（NC组），35只给予10%果糖水诱发胰岛素抵抗，4周后根据胰岛素抵抗指数（IRI），将制作成功的胰岛素抵抗模型26只大鼠随机分为IR组、PIO组。PIO组灌服吡格列酮（10?mg·kg-1·d-1）12周，IR组和NC组给予相同体积的生理盐水。免疫组化法观察大鼠海马Aβ42的表达；免疫印迹法检测大鼠脑APP、β分泌酶( BACE1)、γ分泌酶（PS1）的变化。结果IR组和PIO组大鼠海马Aβ42的表达明显高于NC组，与IR组相比，PIO组表达明显减低（P<0.01）；与NC组相比，IR组和PIO组大鼠脑组织APP、BACE1及PS1的表达增高，PIO组表达较IR组减少(P<0.05)。结论胰岛素抵抗大鼠脑组织通过上调BACE1、PS1活性，使Aβ42生成增加；吡格列酮能抑制BACE1、PS1的表达，减少Aβ42生成。

人βcatenin启动子的克隆及活性分析

张菊1，关恒云1，张鹏举1，陈蔚文1，刘帅2，尚进2，唐传刚2，姜安丽1

2009, 47(11): 21-24.

摘要 ( 1101 )

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目的克隆βcatenin基因5′上游1.8?kb启动子，构建启动子荧光素酶报告基因载体pGL31.8?kb，测定其启动子活性，为进一步研究βcatenin基因表达调控机制奠定基础。方法采用PCR方法从人基因组DNA中扩增βcatenin基因5′上游1.8?kb片段并构建到荧光素酶报道基因pGL3basic载体中，与内参照质粒pRLTk共转染前列腺癌PC3细胞，通过双荧光素酶活性检验测定其启动子活性。结果PCR扩增的1.8?kb片段经测序正确无误；pGL31.8?kb转染PC3细胞48?h后，双荧光素酶活性测定启动子活性（M1／M2）为11.71，是pGL3control活性的2.43倍，为pGL3basic活性的206.31倍,为pGL3promoter活性的21.38倍。结论克隆的βcatenin基因5′上游1.8?kb片段具有较强的启动子活性。

p38丝裂原活化蛋白激酶特异性抑制剂对小鼠早胚发育及植入的影响

于清梅1, 武玉玲2

2009, 47(11): 25-28.

摘要 ( 1381 )

PDF (393KB) ( 324 )

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目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）特异性抑制剂SB203580对小鼠早胚发育及植入的影响。方法①采用体外胚胎培养技术，将孕2?d小鼠早胚随机分组，接种到添加不同浓度抑制剂的培养液内进行培养，以观察p38MAPK特异性抑制剂对早胚发育的影响；②体内宫腔注射：取孕4?d小鼠，由子宫角注射不同浓度的SB203580，于孕8?d检查胚胎植入数，同时取子宫，观察内膜的组织学变化。结果①添加抑制剂组的早胚不能发育为胚泡，停滞在8～16细胞阶段。但去除抑制剂后继续培养，幼胚仍能发育到胚泡阶段；②注射SB203580组的小鼠，胚胎植入数明显少于对照组（P＜0.01）。镜下可见，其胚胎组织呈退化坏死状态，胚胎周围蜕膜细胞呈明显的空泡样变性,蜕膜及胚胎中均见大量血细胞浸润。结论①p38MAPK在小鼠植入前胚胎发育过程中起作用；②p38MAPK特异性抑制剂SB203580可抑制在体小鼠胚泡植入及植入后胚胎和蜕膜细胞的发育。

Dishevelled2和Vangle2蛋白在过量维甲酸致昆明小鼠腭裂发生中的表达变化及意义

尹海燕1，卓煜娅1，邹维艳1，孙美群1，耿慧慧3，刘凯2

2009, 47(11): 29-33.

摘要 ( 1417 )

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目的探讨Dishevelled2和Vangl2蛋白在过量维甲酸致昆明小鼠腭裂发生中的作用。方法采用免疫组织化学及图像分析方法,检测维甲酸致畸小鼠（实验组）和相应对照组小鼠腭板中Dishevelled2和Vangl2蛋白的表达状况。结果Dishevelled2在实验组间充质的表达量明显高于相应对照组，在腭板上皮表达量先明显高于而后又明显低于相应对照组；Vangl2在实验组腭板间充质中的表达量先明显高于而后又明显低于相应对照组。结论Dishevelled2在间充质细胞中表达的上调以及在上皮细胞中先上调又明显下调和Vangl2在腭板间充质细胞中表达的先上调后下调可能与维甲酸致昆明小鼠腭裂发生相关。

依达拉奉对大鼠弥漫性脑创伤后认知功能及ERK1/2活化、Cytc释放的影响

赵雅宁1，2，张文丽1，高俊玲1，饶颖臻3，田艳霞1，尹立国4，崔建忠4

2009, 47(11): 34-37.

摘要 ( 1214 )

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目的探讨依达拉奉(Edaravone)对弥漫性脑创伤后认知功能障碍的治疗作用及其机制。方法随机将SD大鼠分为对照组(40只)、创伤组(68只)、Edaravone干预组(68只)。Marmarou′s法建立SD大鼠弥漫性脑创伤模型。在电镜下观察伤后1、6、24、48、72?h线粒体形态结构变化；采用免疫组化和Western blot法检测上述时间点磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（pERK1/2）和Cytc的表达；伤后第3天水迷宫法测试动物学习记忆功能，连测7?d。结果伤后海马区部分神经细胞线粒体肿胀、内脊断裂、消失；免疫组化显示 pERK1/2和细胞色素C（Cytc）阳性产物主要定位于细胞浆，Western blot定量显示，伤后pERK1/2和Cytc表达水平增高，分别于24、48?h达高峰；水迷宫实验显示，创伤组大鼠搜索安全岛潜伏期（230.9±20.9）s明显高于对照组（50.7±4.9）s；Edaravone治疗组线粒体受损程度、pERK1/2和Cytc表达水平以及搜索安全岛潜伏期（70.6±8.7）s均低于创伤组。结论Edaravone对弥漫性脑创伤有治疗作用，其机制与抑制伤后ERK12活化、减轻线粒体形态结构损伤、减少Cytc释放有关。

ADM对大鼠早期肾脏机械损伤的影响

韩晓鹏1，孙少华2，刘宏斌1

2009, 47(11): 38-41.

摘要 ( 1090 )

PDF (393KB) ( 141 )

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目的探讨外源性肾上腺髓质素（ADM）对肾脏机械性损伤早期肾小管评分的影响。方法选健康成年普通级Wistar大鼠104只，随机分为4组：正常对照组8只，创伤组32只，创伤前注射ADM组32只，创伤后注射ADM组32只。后3组动物分别于创伤后1、6、12和24?h各处死8只，采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾机械性损伤模型。两给药组分别于创伤前、后10?min腹腔注射ADM（0.1?nmol/kg）。3组肾损伤大鼠平均分为4批，分别于创伤后1、6、12和24?h迅速解剖动物提取下肾脏标本，10%甲醛固定。HE染色观察创伤后肾组织的基本病理改变。结果单纯创伤组于创伤早期（1、6?h）肾小管评分明显升高（P＜0.05），急性创伤后期（12、24?h）上述指标逐渐降低，接近正常对照组（P＞0.05）。外源性ADM可降低肾小管评分。结论肾脏损伤期间给予外源性ADM对肾组织均有明显的保护作用，其作用强弱与给药时间关系密切。

黄芪对小鼠哮喘模型肺组织αSMA及FN的抑制作用

王莉1，王芬2，刘毅1，马卫霞1，李怀臣1

2009, 47(11): 42-45.

摘要 ( 1241 )

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目的探讨黄芪对哮喘平滑肌肌动蛋白α及纤维连接蛋白的影响。方法随机将BALB/C小鼠60只分为对照组（A组）、哮喘组（B组）、黄芪治疗组（C组）各20只。以腹腔注射0.02%鸡卵清蛋白（OVA）和1%OVA雾化吸入建立慢性哮喘模型。治疗组在每次激发前给予黄芪干预。将右肺分离固定，用石蜡包埋切片，并用免疫组化染色技术染色，用LEICA QWIN V3分析系统，计算表达阳性结果，把左肺置于液氮中保存，采用逆转录聚合酶链反应（RTPCR）测定肺组织中平滑肌肌动蛋白α(αSMA)及纤维连接蛋白(FN)中信使核糖核酸（mRNA）含量，用AlphaImager 2?200半定量分析系统分析。结果哮喘组αSMA及FN阳性表达结果显著高于对照组（P＜0.01），αSMA mRNA及FN mRNA的表达上调(P＜0.01)；黄芪治疗组的αSMA及FN的阳性表达、αSMA mRNA及FN mRNA的表达均显著低于哮喘组(P＜0.01)。结论FN及αSMA为气道重构的重要标志物，黄芪可抑制慢性哮喘模型小鼠肺组织中αSMA及FN表达，推测抑制αSMA及FN的表达可能是黄芪抑制哮喘气道重构的重要机制之一。

应用噬菌体随机十二肽库筛选hFGF7相关模拟肽

宗宪磊1,2，蔡景龙2，姜笃银1，付小兵3，盛志勇3，单菲1

2009, 47(11): 46-49.

摘要 ( 1208 )

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目的应用噬菌体随机十二肽库生物淘选具有刺激表皮细胞增殖作用的人成纤维细胞生长因子7(hFGF7)噬菌体模拟肽。方法以hFGF7单克隆抗体为靶，进行4轮生物淘选噬菌体随机十二肽库；随机挑取单克隆噬菌体,应用ELISA方法检测单克隆噬菌体的结合力，对结合力较好的单克隆噬菌体提取噬菌体DNA，进行测序，并行序列分析。结果经过4轮生物淘选，特异性噬菌体模拟肽获得了富集，ELISA检测结果显示获得的一些噬菌体模拟肽具有较好的结合力，测序获得11个与促进细胞分裂、增殖或抑制细胞增殖有关的碱基序列。结论从噬菌体随机十二肽库中可淘选到与hFGF7相关的噬菌体模拟肽，其中部分噬菌体模拟肽可能会促进表皮细胞增殖，期望将来可应用于促进创面愈合。

吡非尼酮对实验性大鼠肝纤维化的作用

杜磊，王昌源，张立华，谭炳芹

2009, 47(11): 50-54.

摘要 ( 1248 )

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目的研究吡非尼酮（PFD）对实验性大鼠的抗肝纤维化作用。方法45只雄性Wistar大鼠随机均分为3组。模型组腹腔注射1%二甲基亚硝胺（DMN）10?mg/(kg·d)，每周连续3d，共4周，制作肝纤维化模型；干预组除应用DMN外，同时给予PFD 500?mg/(kg·d)灌胃，1次/d，共4周；模型组及正常组以等体积生理盐水灌胃作对照。4周试验结束时进行组织学检查、电镜观察、血清肝纤维化指标、肝功能及转化生长因子β1（TGFβ1）检测。结果与模型组相比，干预组大鼠体质量下降较少(P＜0.05)、肝脾肿大较轻（P＜0.05），血清透明质酸、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原浓度均明显低于模型组（P＜0.05）；干预组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素及TGFβ1含量与模型组相比明显降低（P＜0.001）；MASSON染色显示，干预组肝脏纤维化及炎症反应明显减轻，无明显假小叶；透射电镜观察证实干预组大鼠肝细胞损伤明显减轻，肝窦及Disse腔内胶原纤维沉积明显减少。结论PFD对实验性大鼠肝纤维化模型具有明显的抗肝纤维化作用，其机制可能与抑制TGFβ1的产生有关，PFD有可能用于肝脏疾病的抗纤维化治疗。

核因子κB抑制剂PDTC在肺动脉高压中的作用

陈晓英，王玉林，王伟

2009, 47(11): 55-58.

摘要 ( 1540 )

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目的探讨核因子κB (NFκB)及其抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）在野百合碱（MCT）所致肺动脉高压中的作用及其机制。方法大鼠腹腔注射MCT建立肺动脉高压模型，将58只Wistar大鼠随机分为MCT0组、MCT1W组、MCT2W组、MCT3W 组、对照/盐水组、MCT/盐水组和MCT/PDTC组。采用右心导管法测定血流动力学指标，用免疫组化法检测细胞间粘附分子1(ICAM1)表达及巨噬细胞浸润情况，用电泳迁移率变动分析法（EMSA法）检测NFκB 活化情况。结果MCT注射后1周开始，大鼠肺组织ICAM1的表达和巨噬细胞浸润明显增加（P＜0.01)，2周开始，平均右心室压力升高，右心肥厚指数增加（P＜0.01)。与对照/盐水组相比，MCT/盐水组平均右心室压力、右心肥厚指数明显增加，NFκB活化、ICAM1表达及巨噬细胞浸润明显增多（P均＜0.01)。与MCT/盐水组相比，MCT/PDTC组平均右心室压力、右心肥厚指数明显降低，NFκB活化、ICAM1表达及巨噬细胞浸润明显减少（P均＜0.01)。结论NFκB/ICAM1介导的炎症级联反应参与了MCT诱导的肺动脉高压的发展，PDTC可抑制这一炎症反应，减轻肺动脉高压。

胎肝细胞移植治疗粘多糖贮积症的实验研究

刘晓莉，万江波，梁辉

2009, 47(11): 59-63.

摘要 ( 1238 )

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（上海交通大学医学院附属新华医院血液科，上海 200092）摘要：目的探讨用胎肝细胞移植治疗小鼠αL艾杜糖苷酶（IDUA）缺陷引起的粘多糖贮积症（MPS），筛选免疫抑制方案。方法将人胎肝细胞移植给经不同免疫抑制剂方案处理的IDUA缺陷小鼠，流式细胞仪检测移植前、后受体小鼠T细胞亚群（CD3、CD4/CD8比例）；酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M（IgM）、白介素2（IL2）、肿瘤坏死因子α（TNFα）、干扰素γ（IFNγ）水平；荧光分光光度计法检测血清IDUA活性。结果受体移植后血清中反映免疫状态的指标（T细胞亚群、IL2、TNFα、IFNγ）均显著升高（P＜0.05）；血清IDUA活性在移植后第5天显著提高（P＜0.01），后随时间延长，活性随之衰减；经CTX＋CsA＋FTY720＋强的松联合免疫抑制预处理组在移植后IDUA活性维持最持久。结论胎肝细胞移植能提高IDUA活性。由于免疫排斥反应，移植前应进行免疫抑制预处理，以CTX＋CsA＋FTY720＋强的松联合方案免疫抑制效果最佳。

特异性siRNA抑制HPV16 E7基因表达的实验研究

张晓,王传新,李伟,郑桂喜,张建,阚士锋,王立水

2009, 47(11): 64-67.

摘要 ( 1045 )

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目的筛选针对HPV16 E7基因有效的siRNA，探讨其对HaCaTE7 细胞中HPV16 E7 mRNA及细胞表面HLAⅠ类分子表达的影响。方法采用化学法合成3条HPV16 E7特异性siRNA，应用转染试剂Lipofectamine2000将其转染入HaCaTE7细胞，采用实时荧光定量PCR（RTPCR）检测HPV16 E7 mRNA的表达，采用流式细胞术（FCM）检测细胞表面HLAⅠ类分子的表达。结果3条siRNA均能有效抑制HaCaTE7细胞中HPV16 E7的转录表达，以siRNA2作用效果最明显，抑制率达75%，细胞膜表面HLAⅠ类分子的表达明显上调，平均荧光强度(MFI)为130.18±1.07，高于空转染对照组（100.32±3.01）和非特异性siRNA对照组（100.82±2.87）。结论化学合成的HPV16 E7特异性siRNA能有效抑制HaCaTE7细胞中E7 mRNA的表达，同时使细胞表面HLAⅠ类分子表达上调。

新鲜全血在不同血细胞分析仪比对试验中的评价

王谦1，展凤霞2，郑桂喜1，王传新1，胡志敏1，王洪春1

2009, 47(11): 68-73.

摘要 ( 1167 )

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目的验证不同血细胞分析仪检测结果之间的可靠性和可比性，规范操作血细胞分析仪的比对试验。方法参照国际血液学标准化委员会(ICSH)及美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件，在仪器正常运行的情况下，评价各比对仪器的携带污染率、精密度和总精密度、差异百分率；分析比较20份抗凝新鲜全血中各项指标在不同血细胞分析仪之间的差异；每日取高、中、低3份新鲜血，在各仪器上平行检测，连续比对7日，观察各项指标与参考样机之间的相关性；分析比较仪器分类与手工分类的相关性；通过直线回归方程计算相对偏差，估计每台仪器各检测指标的试验误差。结果除白细胞分类外，各比对仪器携带污染率正常；各检测指标的变异系数以及在不同血细胞分析仪上的总体变异系数均＜5%；各检测项目的差异百分率符合ICSH制定的标准；20份样品在不同血细胞分析仪上检测的各项指标经两两比较的q检验(NewmanKeuls法)，各配伍组总体均数无统计学差异（P＞0.05）；连续7日测得的各项指标与参考样机之间的相关系数均大于0.97，其相对偏差在实验允许误差范围内。白细胞分类中，中性粒细胞和淋巴细胞在各比对仪器之间以及仪器与手工分类之间的相关性较好，而嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞和单核细胞，不论在各仪器还是仪器与手工分类之间，都存在较大的试验误差（P＜0.05，P＜0.01）。结论不同血细胞分析仪检测结果之间的比对试验急需规范化，同一科室的多台血细胞分析仪应定期进行比对，以保证检验结果的准确性。

罗格列酮对肝星状细胞MMP2、TIMP1mRNA表达的影响

李森林，赵景润，任晓燕，马青竹，谢佳平，李振方，郎翠翠

2009, 47(11): 74-75.

摘要 ( 1109 )

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目的探讨罗格列酮对体外培养肝星状细胞MMP2及TIMP1基因表达的影响。方法采用HSCT6肝星状细胞系，经不同浓度的罗格列酮干预，采用RTPCRA法检测各组MMP2及TIMP1基因的表达情况。结果在10、20?μmol/L罗格列酮组，TIMP1的表达较空白对照组明显降低(P＜0.05)，而MMP2的表达与空白对照组相比差异无统计学意义。结论罗格列酮的抗肝纤维化作用与抑制HSC表达TIMP1有关。

SPK/S1P信号途径对人肝癌细胞增殖、凋亡的作用

姜大磊1，高艳景2，刘慧亚2

2009, 47(11): 76-79.

摘要 ( 1089 )

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目的探讨鞘氨醇激酶/1磷酸鞘氨醇信号途径（SPK/S1P）对人肝癌细胞增殖、凋亡的影响。方法体外培养人肝癌细胞株HepG2，观察5～20?μmoL/L浓度范围鞘氨醇激酶的特异性抑制剂N,N′二甲基鞘氨鞍醇（DMS）对HepG2细胞增殖、凋亡的影响。结果MTT实验结果显示,5～20?μmoL/L浓度范围的DMS对细胞增殖均有抑制作用，透射电镜观察对照组细胞可见细胞凋亡的变化，TUNEL标记法检测处理组阳性细胞表达百分数较对照组明显增多（P＜0.01）。结论DMS对HepG2细胞的生长增殖具有抑制作用，并促其发生凋亡。

酒精性肝纤维化与DDR2关系及复方甘草酸苷治疗对其影响的实验研究

张玉泉1，阎明1，张喜红2，刘慧敏3

2009, 47(11): 80-84.

摘要 ( 1407 )

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目的观察酒精性肝纤维化与盘状结构域受体2（DDR2）的关系以及复方甘草酸苷（GGT）治疗对二者的影响。方法48只大鼠随机分为正常对照组、模型组、停酒组、未停酒组、停酒治疗组及未停酒治疗组（n=8）。模型组酒精灌胃16周后，与正常对照组一起处死。其余4组于酒精灌胃16周后分别予以停酒、不停酒、停酒+GGT治疗、不停酒+GGT治疗4周,至20周末全部处死。检测各组血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原(CⅣ)含量，取肝组织进行HE染色及Masson染色观察其组织病理学变化，实时荧光定量PCR和Western blot蛋白印迹法分别检测肝组织DDR2 mRNA和蛋白表达。结果酒精灌胃16周后，大鼠肝组织呈明显肝纤维化病理表现，血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平和肝组织胶原面密度及DDR2表达均较正常对照组升高(P＜0.01)。停酒治疗组与停酒未治疗组、未停酒治疗组与未停酒未治疗组比较，上述各指标均降低(P＜0.05)。结论CGT对酒精性肝纤维化具有一定的治疗作用，其作用可能与下调DDR2的表达相关。

单核细胞被诱导表达淋巴管内皮标志物

王长明1,田铧1,梁艳红1,于伟2,肖琼1,张肇林1

2009, 47(11): 85-88.

摘要 ( 1484 )

PDF (509KB) ( 292 )

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目的淋巴管生成存在于肿瘤、炎症等许多疾病的病理生理过程中。本研究旨在探讨单核-巨噬细胞在炎症环境中转分化成淋巴管内皮细胞的可能性。方法取成人新鲜外周血，分离单核细胞，用ECM培养，分别在FN铺板或VEGFC、TNFα、LPS刺激下诱导培养24?h，用RTPCR和免疫荧光细胞化学方法检测单核-巨噬细胞对淋巴管内皮特异性标志物LYVE1、Podoplanin、Prox1及内皮细胞共同标志物vWF、eNOS的基因和蛋白表达。结果在未诱导组，单核-巨噬细胞LYVE1呈阳性表达，Podoplanin、Prox1、vWF、eNOS表达呈阴性；在FN铺板或VEGFC、TNFα、LPS诱导组，单核-巨噬细胞Podoplanin、Prox1表达阳性，vWF和eNOS表达仍呈阴性。结论FN、VEGFC、TNFα、LPS均能有效刺激单核-巨噬细胞表达淋巴管内皮标志物。

双向电泳中人血清蛋白样品不同处理方法的比较

王班琴1，秦兆宇2，柏淑美1，刘芙军3，李芸1，刘师莲1

2009, 47(11): 89-94.

摘要 ( 1929 )

PDF (1597KB) ( 296 )

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目的针对人血清双向电泳流程中样品制备的不同方法，本研究进行了系统的比较和分析。方法采用丙酮沉淀法，三氯醋酸沉淀法，三氯醋酸/丙酮沉淀法，蛋白纯化试剂盒，去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理血清样品；双向电泳分离；硝酸银染色；软件分析所得蛋白质斑点。结果对丙酮沉淀法，三氯醋酸沉淀法，三氯醋酸/丙酮沉淀法，蛋白纯化试剂盒处理血清所得到的2DE图谱统计分析，得到平均蛋白质点数分别为1?802±12，1?648±10，1?727±13，1?670±14；对去除白蛋白及免疫球蛋白血清所得到的双向电泳（2DE）图谱与丙酮沉淀血清所得到的图谱进行统计，得到平均蛋白质点数分别为1?212±16，1?258±12，并对其中差异蛋白进行了质谱鉴定。结论结果表明不同血清沉淀方法对血清的双向电泳各有优劣；血清去除白蛋白及免疫球蛋白之后，可以提高一些低丰度蛋白的检出，但会导致部分蛋白的丢失。

脐血CD34+细胞向巨核细胞的分化扩增及基因的表达变化

王海莲1，鞠秀丽2，葛伟2，李栋2，沈柏均2

2009, 47(11): 95-99.

摘要 ( 1324 )

PDF (1695KB) ( 317 )

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目的研究脐血CD34+细胞向巨核细胞的诱导分化及体外扩增，并观察此过程中巨核细胞特异性基因表达的变化。方法免疫磁珠法分离获得CD34+细胞培养在无血清无基质培养基中，采用TPO+SCF+IL3+IL6、 TPO+SCF+IL3、 TPO+SCF三种不同因子组合对其诱导分化及扩增。收集3、7、10、14?d的扩增产物，运用荧光显微镜检测巨核细胞的表面标志；流式细胞术（FCM）检测巨核细胞的凋亡；对巨核细胞进行DNA含量检测以及荧光定量PCR检测特异性基因表达的变化。结果分离获得的CD34+细胞在体外可以有效扩增，随培养时间的延长，CD34+/CD41+细胞数第7天达最高值，之后逐渐下降；而CD41+、CD42b+、CD61+细胞随培养时间的延长表达量逐渐增高。DNA含量检测发现，随着培养天数的增加，多倍体细胞所占的百分比增加。三种因子组合中TPO+SCF+IL3+IL6组扩增效率最高。荧光定量PCR显示转录因子GATA1、NFE2、TXS、GPIIb和HPRT在第7天表达量最高，之后下降。凋亡转录因子APAF1随培养天数的延长表达量增加。结论脐血CD34+细胞在体外可向巨核细胞诱导分化及扩增，其基因表达的变化也支持这一结论。

内毒素脂多糖诱导人牙髓细胞凋亡的机制

张彦聪，张志芹

2009, 47(11): 100-102.

摘要 ( 1200 )

PDF (889KB) ( 289 )

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目的观察内毒素脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)对体外培养的人牙髓细胞的致凋亡作用及其对凋亡相关的半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)、B细胞淋巴瘤2（Bcl2）、B细胞淋巴瘤相关蛋白X（Bax）活性的影响。方法用不同浓度(0、0.01、0.10、1.00、10.00、100.00?mg/L)的LPS作用于细胞,采用MTT染色法检测LPS对细胞增殖的影响；采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡；采用免疫组织化学染色技术检测细胞的caspase3、Bcl2、Bax表达变化。结果不同浓度LPS组细胞的生长与对照组相比均受到显著的抑制(P＜0.05),细胞增殖抑制率呈剂量依赖关系；流式细胞术检测结果显示,不同浓度的LPS作用细胞72?h,细胞的凋亡率分别为3.1%、3.5%、12.1%、14.4%、24.3%、59.7%；免疫组织化学染色显示Bax表达增强，Bcl2、caspase3表达减弱。结论LPS可显著地抑制人牙髓细胞增殖，诱导细胞凋亡，降低Bcl2、caspase3活性，升高Bax活性,并呈明显的量效关系。

轻度认知功能障碍与ApoE基因多态性及血脂水平的研究

徐明明1，易咏红1，张萌2

2009, 47(11): 103-107.

摘要 ( 1174 )

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目的分析轻度认知功能障碍（MCI）患者载脂蛋白E（ApoE）基因型及等位基因频率的分布及血脂水平，为MCI的防治提供理论依据。方法对120例MCI患者（MCI组）和120 例健康者（对照组），进行简易精神状态检查表(MMSE)、日常生活行为量表(ADL)、总体衰退量表(GDS)、Hachinski 缺血积分量表、汉密顿抑郁量表（HAMD）评测，采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析方法（PCRRFLP），测定ApoE各基因型和等位基因频率并测定各例总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）水平。结果MCI组在时空定向、即刻记忆、延时记忆、注意计算力、理解力均较对照组差；ε3/4基因型频率及ε4等位基因频率均高于对照组(P＜0.05)；TC和LDLC明显高于对照组（P＜0.05），MCI组和对照组ε4组血脂均较ε3、ε2高（P＜0.05）。结论ApoE基因型频率和等位基因频率在MCI组和对照组间的分布不同，ApoE基因可能是MCI的风险基因，MCI患者存在血脂紊乱，ApoEε4与MCI患者血脂紊乱有关。

腮腺癌在多形性腺瘤中p16基因的表达及甲基化改变

李海燕1，郭小玲2，王建华2，曲伟栋2，赵华强2

2009, 47(11): 108-110.

摘要 ( 1290 )

PDF (408KB) ( 277 )

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：目的研究腮腺癌在多形性腺瘤中（carcinoma ex pleomorphic adenoma，CXPA）p16基因的蛋白表达和甲基化改变，并评价其在该肿瘤癌变中的意义。方法收集40例腮腺CXPA标本及10例正常腮腺标本，应用免疫组织化学技术和甲基化特异性PCR技术，检测p16基因的蛋白表达和甲基化改变。结果正常腺体p16蛋白表达均为阳性，21例 (21/40，52.5%)CXPA标本表现为表达降低或表达缺失，二者存在统计学差异(P＜0.05)。正常腺体p16基因启动子未见高甲基化，16例(16/40, 40%)CXPA出现启动子高甲基化，二者存在统计学差异(P＜0.05)。结论p16基因表达降低或表达缺失、启动子高甲基化对于腮腺CXPA的癌变具有重要意义，后者可能是p16基因在CXPA中的重要失活机制。

黄连水煎剂漱口对固定正畸患者牙龈炎症的影响

田李静1，2，梅银生1，2，张文娟3，张君1，王智1

2009, 47(11): 111-113.

摘要 ( 1289 )

PDF (264KB) ( 281 )

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目的观察黄连水煎剂漱口对固定正畸患者牙龈炎发生率的影响。方法选取11～19岁固定正畸患者100名，随机分为治疗组50例(常规卫生保健措施和黄连水煎剂漱口)和对照组50例(常规卫生保健措施和生理盐水漱口)，在放置固定矫治器前及放置后4、8、12周分别测定上下颌第二前磨牙和第一磨牙处的牙龈指数(GI)和菌斑指数(PLI)，并进行统计学分析。结果放置固定矫治器后4周复查，两组患者牙龈指数和菌斑指数均上升，对照组明显，但二者之间无统计学差异。8、12周后复查，治疗组与对照组牙龈和菌斑指数均升高且二者有统计学差异（P＜0.05）。结论黄连水煎剂漱口可有效降低固定正畸患者牙龈炎的发生率。

心肌肌钙蛋白T对心肌梗死危险因素的分层定量研究

巩祖顺1，邢启崇2

2009, 47(11): 114-117.

摘要 ( 1120 )

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（山东大学 1. 医学院，济南 250012； 2. 附属千佛山医院心内科，济南 250014）摘要：目的探讨急性心肌梗死（AMI）发病前伴有糖尿病、高血压对心肌梗死范围影响的程度。方法选取2006年6月～2008年6月收住院的AMI患者62例，根据AMI发病前是否伴有合并症分为3组，其中伴有糖尿病18例为A组；伴有高血压21例为B组；不伴有糖尿病和高血压23例为C组。测定AMI患者血清肌钙蛋白T（cTnT）、肌酸激酶MBmass（CKMBmass）、肌酸激酶MB活性（CKMBact）的动态变化情况。结果①血清cTnT、CKMBmass、CKMBact出现异常值的时间，A组患者分别平均为3.9、2.9和3.0?h；B组患者分别平均为3.5、1.6和2.3?h；C组患者分别平均为2.8、1.3和1.7?h；②上升至峰值的时间，A组患者分别平均为38.9、28.5和32.4?h；B组患者分别平均为35.4、26.7和29.5?h；C组患者分别平均为30.5、18.2和20.7?h；③自峰值下降至正常的时间，A组患者分别平均为78.5、72.6和63.2?h；B组患者分别平均为58.7、52.4和41.7?h；C组患者分别平均为62.5、58.6和52.5?h；④根据动态变化计算心肌梗死量，A组患者分别平均为45.2 cTnTg、42.5 CKMBmassg、45.7 CKMBactg；B组患者分别平均为40.8 cTnTg、37.4 CKMBmassg、39.2 CKMBactg；C组患者分别平均为31.4 cTnTg、28.7 CKMBmassg、31.6 CKMBactg。结论AMI发病前伴有糖尿病、高血压的患者病情重，并发症发生率高，心肌梗死范围明显增大。

31PMRS在肝脏良、恶性占位性病变中的诊断价值

于德新1，刘成2，李传福1，张晓明1，马祥兴1

2009, 47(11): 118-120.

摘要 ( 1192 )

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目的探讨31P磁共振波谱成像(MRS）在肝脏良、恶性占位性病变诊断中的价值。方法分别对35个（其中肝脓肿13个）肝脏良性病灶及62个恶性病灶进行单体素31PMRS扫描，计算肝细胞内pH值(pHi)、磷酸单脂(PME)、磷酸双脂(PDE)、无机磷(Pi)、γ、β、及α 三磷酸腺苷(ATP)、PME/ATP、Pi/ATP、PME/PDE、PME/Pi、PDE/Pi、PDE/ATP和低能磷酸盐(LEP)等参数。分析以上代谢参数在良、恶性病变之间差异。结果在良、恶性病变之间，γATP分别为1?279.46±432.21和758.22±240.79，Pi/ATP分别为3.98±0.86和5.36±0.96，差异均有统计学意义(P＜0.05)；在良、恶性肿瘤及肝脓肿之间，pHi分别为7.03±0.43、7.09±0.35、7.45±0.51，γATP分别为1?260.71±407.72、758.22±240.79、1?268.62±444.10，差异均有统计学意义(P＜0.05)，其余代谢物参数在以上各种分组之间差异无统计学意义 (P＞0.05)。结论31PMRS代谢物γATP和Pi/ATP可作为鉴别肝脏良、恶性病变的参数，pHi值有助于肝脓肿与肝脏肿瘤的鉴别。

主-肺动脉间隔缺损的外科治疗

李金东，王安彪，张文龙，张海洲，王正军，訾捷，范全心

2009, 47(11): 121-123.

摘要 ( 1056 )

PDF (240KB) ( 201 )

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目的总结先天性主-肺动脉间隔缺损（APSD）的外科治疗经验。方法2000年10月到2009年3月共收治的主-肺动脉间隔缺损患者15例，年龄为2个月～5岁，平均1.8岁。按Richardson分形，Ⅰ型8例，Ⅱ型5例，Ⅲ型2例。其中Ⅰ型中2例经间隔缺损前壁径路涤纶补片修补，Ⅲ型中1例行人工血管右肺动脉-肺动脉干连接术，1例行直接切断右肺动脉与主肺动脉行端侧吻合。其余行经主动脉切口涤纶补片修补术，合并心脏畸形同期予以纠正。结果全组病例无死亡，8例随访5个月～3年，效果满意，复查超声心动图均无主-肺动脉残余分流，主动脉及肺动脉无狭窄，肺动脉压力较前明显下降。结论主-肺动脉间隔缺损（APSD）一经确诊应及早手术，手术年龄以婴儿早期为佳；术前诊断明确，充分认识病理生理及解剖类型，选择合适的手术方法是手术成功的关键。

HPLC法测定降糖宁胶囊中格列本脲含量的不确定度分析

凌霄1，解斐2，吴敬德3

2009, 47(11): 124-127.

摘要 ( 1235 )

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目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定掺入降糖宁中的格列苯脲含量的不确定度评定方法。方法建立数学模型,对含量测定过程中各影响因素进行分析评估。结果通过不确定度来源的识别及量化分析,计算各变量的不确定度和合成不确定度,得出测定结果的扩展不确定度。结论该评定方法适用于HPLC法测定中药中非法掺入的格列苯脲含量的不确定度评定。
关键词:高效液相色谱法;格列苯脲;不确定度

喜树碱Pluronic P105 /L61 混合胶束系统的制备

孙新堂，王金丽，李凌冰

2009, 47(11): 128-131.

摘要 ( 1382 )

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目的制备载有喜树碱的混合胶束系统，增加喜树碱的载药量。方法以Pluronic P105（P105）和Pluronic L61(L61)为材料,难溶性抗癌药物喜树碱为模型药物, 制备了载药混合胶束系统。对混合胶束系统的载药量、稳定性进行了研究。采用人胸腺癌细胞系(MCF7), 对载药混合胶束的细胞毒性进行了研究。结果所制备的混合胶束系统,长期存放和多倍稀释后仍然能够稳定存在；加入L61后喜树碱的载药量明显提高。细胞毒性实验结果表明,混合胶束对人胸腺癌细胞系(MCF7)的细胞毒性高于原料药。结论Pluronic P105 /L61 混合胶束系统是一种比较稳定的喜树碱给药系统。

中国大学生人格量表与心理适应量表对6913例新生的测试分析

王瑞1，吴少怡2，刘言训1

2009, 47(11): 132-134.

摘要 ( 1878 )

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目的探讨大学新生心理适应与其人格特质间的相关性。方法使用中国大学生心理适应量表（CCSAS）和中国大学生人格量表（CCSPS）对山东省某高校新生进行调查，用Pearson线性相关分析和典型相关分析探讨大学新生人格与适应间的相互关系。结果CCSAS与CCSPS间大部分因子呈正相关关系，其中CCSPS的活跃、坚韧、随和因子与CCSAS的各因子呈较强相关关系；第一典型相关系数为0.844?1，特征值贡献率为76.5%；来源于人际关系适应和自我适应等方面的心理适应情况与CCSPS所有人格因子均有相关关系。结论CCSAS量表与CCSPS量表间有较强相关关系。

经皮椎体成形术治疗骨质疏松性骨折的应用体会

信维伟，程光齐，朱颖华，李展春

2009, 47(11): 135-137.

摘要 ( 1099 )

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维持性血液透析患者透析间期体重增长与动脉硬化的关系

孔祥雷，唐利军，王尊松，李文斌，魏勇，贾晓妍，许冬梅

2009, 47(11): 138-140.

摘要 ( 975 )

PDF (223KB) ( 207 )

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