目的 基于蜗牛粘液的分离提取、酶解和序列测定,筛选并人工合成活性肽序列,评价其对成纤维细胞增殖、迁移能力的影响。 方法 提取蜗牛粘液蛋白并用胰蛋白酶消化4 h,液相色谱-质谱结合生物信息学分析,筛选具有促进增殖的肽段序列,通过固相合成法制备。经培养人外膜成纤维细胞(human adventitial fibroblasts, HAFs)并用不同浓度的活性肽处理,评估其对细胞增殖、迁移能力的影响。 结果 合成的肽序列为SK-14(N端序列:SSTIFPPTSGGAAK),分子量为1 268 Da。 SK-14能显著促进成纤维细胞增殖(P<0.001)。细胞增殖能力随SK-14质量浓度增加而呈现浓度依赖性增强,增殖能力随SK-14质量浓度升高而显著提高,并在500 μg/mL达平台期。SK-14同样可显著促进HAFs的迁移能力(P<0.001),其作用效果随着SK-14质量浓度递增上升,以1 000 μg/mL的作用最明显。 结论 蜗牛粘液来源的活性肽序列SK-14可促进人成纤维细胞的增殖、迁移能力,可能是蜗牛粘液参与促进伤口愈合的活性成分之一。

目的 探讨神经前体细胞表达发育性下调蛋白4(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated 4 like, NEDD4L)介导胶质母细胞瘤(glioblastoma, GBM)铁死亡的作用,揭示NEDD4L介导醛缩酶(aldolase A, ALDOA,又名果糖二磷酸 A)的泛素化修饰在铁死亡信号通路中的调控机制。 方法 对TCGA-GBM数据库中NEDD4L基因表达水平进行分析,利用shRNA/CRISPR-Cas9技术在GBM LN229细胞中敲低/除NEDD4L,通过细胞死亡和脂质过氧化实验观察敲低NEDD4L表达对GBM铁死亡敏感性的影响,并利用蛋白质免疫共沉淀(co-immunoprecipitation, CO-IP)、免疫印记等实验鉴定ALDOA是NEDD4L的潜在修饰底物,通过siRNA方法敲低NEDD4L或ALDOA后检测其对GBM细胞铁死亡及铁死亡通路的影响。所有数据均使用 GraphPad Prism 9.0 软件进行统计分析。 结果 敲除NEDD4L明显抑制IKE诱导的铁死亡发生,同时显著降低GBM细胞内的脂质过氧化水平(P<0.001),鉴定NEDD4L是ALDOA新的E3泛素化连接酶,并与ALDOA相互作用介导其单泛素化修饰,调控GBM细胞铁死亡易感性。敲低NEDD4L和ALDOA的表达均增强4EBP1和ACC的磷酸化水平以及上调GPX4蛋白的表达。 结论 NEDD4L介导ALDOA的单泛素化修饰并可能通过影响mTORC1-4EBP1信号通路和脂质代谢促进GBM细胞的铁死亡敏感性。

目的 构建一种用上转换纳米颗粒(upconversion nanoparticles, UCNPs)与硫酸软骨素(chondroitin sulfate, CS)连接的探针,开发肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)早期诊断的方法。 方法 以己二酸二酰肼(adipic acid hydrazide, ADH)为桥梁,构建UCNPs-CS探针。首先,CS在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐［1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride, EDC］和 N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide, NHS)的催化下合成CS-ADH,CS具有肿瘤靶向性,可作为探针的靶向基团。然后,由溶剂热法制备NaYF4:Yb,Tm@NaYF4核壳结构的UCNPs,制备的UCNPs的荧光发射带在800 nm左右,可作为荧光报告基团用于体内成像。UCNPs通过聚丙烯酸(polyacrylic acid, PAA)衍生转水后由羧基氨基偶联反应制备UCNPs-CS纳米荧光探针。UCNPs经光谱、核磁、透射电镜等对形貌和光学性质进行表征,并通过MTT实验对探针的细胞毒性进行考察。通过构建肝癌小鼠模型,评价探针体内成像和肿瘤靶向能力,并利用体内成像评估不同抗肿瘤药物的活性。 结果 制备的核壳结构UCNPs形貌均匀,大小均一,尺寸约35 nm,壳层厚度约3~4 nm,在水中分散性好。构建的UCNPs-CS探针具有良好的发光性能(激发波长980 nm,荧光发射波长800 nm)和细胞相容性(在质量浓度高达500 μg/mL时,24 h后的细胞存活率大于60%),具有较强的组织穿透力,可实现动物水平的活体成像。肝癌小鼠体内成像结果表明,构建的UCNPs-CS探针具有较好的肿瘤靶向性,且成像光辐射强度与肿瘤体积呈正相关。 结论 构建的UCNPs-CS探针为HCC早期可视化诊断提供一种新工具,同时也为抗肿瘤药物的活性筛选提供一种新思路。

目的 探讨内皮活化和应激指数预测值(pre-endothelial activation and stress index, pre-EASIX)与心力衰竭(heart failure, HF)患者死亡风险之间的关联,为临床评估HF预后提供新的参考指标。 方法 从开放数据库MIMIC-IV v3.1中提取7 146例HF患者的数据,计算每个患者的内皮活化和应激指数(endothelial activation and stress index, EASIX),将其转换为log₂值(pre-EASIX),并根据pre-EASIX的三分位数进行分组。采用限制性立方样条(restricted cubic spline, RCS)分析、Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型评估pre-EASIX与HF患者死亡风险的相关性。 结果 RCS分析结果显示,pre-EASIX与HF患者死亡风险呈“J”型曲线趋势,对HF患者死亡风险的预测能力有统计学意义(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线显示,随着pre-EASIX的升高,HF患者的生存率呈下降趋势,其对HF患者生存率的预测能力有统计学意义(P<0.001);多因素Cox回归分析显示,高pre-EASIX水平是HF患者30、90、180及365 d死亡的独立危险因素,具有统计学意义(P<0.01);根据左室射血分数对HF亚组患者进行Cox回归分析后,pre-EASIX是HF亚组患者死亡的独立危险因素,具有统计学意义(P<0.001)。 结论 pre-EASIX与HF患者的死亡风险密切相关,有助于早期识别高风险患者,可作为评估HF患者及不同亚组预后的重要指标之一。

目的 探究支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)病原微生物靶向测序(targeted next generation sequencing, tNGS)技术与传统培养在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)合并侵袭性肺真菌病(invasive pulmonary fungal disease, IPFD)中的诊断价值。 方法 回顾性分析2022年9月1日至2025年4月1日40例于山东省第二人民医院临床诊断为NSCLC合并IPFD患者的临床资料,收集BALF样本行tNGS检测与传统培养,对比分析病原检出率及诊断效能。 结果 40例IPFD患者样本中,tNGS和传统培养对真菌的阳性检出率分别为85.0%、52.5%(校正χ2 = 6.86,P=0.01),对细菌的阳性检出率分别为70.0%、50.0%(校正χ2=4.08,P=0.04)。tNGS和传统培养对细菌的检测灵敏度分别为95.5%、86.4%(校正χ2=0.25,P=0.62)。所有患者经抗真菌、细菌及抗肿瘤治疗后均好转出院。 结论 tNGS技术在NSCLC合并IPFD的病原检测中,对真菌和细菌的检测效能均显著优于BALF传统培养。临床上可将tNGS作为早期筛查工具,结合BALF培养、临床特征综合判读,以优化诊疗并避免过度治疗。

目的 探讨激素替代方案(hormone replacement therapy, HRT)准备子宫内膜的冻融胚胎移植(frozen embryo transfer, FET)周期中,胚胎移植前较为理想的雌激素用药时间。 方法 回顾性分析2012年2月至2020年2月期间以激素替代方案准备子宫内膜、行单囊胚FET并获得单胎活产的患者,共有4 577个周期被纳入分析。根据冻融胚胎移植前雌激素治疗天数分为3组:12~16 d 组(n=1 078)、17~20 d 组(n=2 924)、21~31 d 组(n=575)。主要分析指标为新生儿体质量,次要分析指标包括早产、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、子痫前期、剖宫产、胎膜早破、胎盘早剥、胎盘前置、产后出血、新生儿性别。 结果 经回归校正混杂因素后,三组间新生儿体质量、小于胎龄儿、大于胎龄儿、巨大儿发生率差异无统计学意义。胚胎移植前雌激素治疗时间21~31 d 与12~16 d 组相比低出生体质量儿发生率显著升高(aOR=1.780,95%CI: 1.055~3.003,P=0.031)。其他妊娠并发症及新生儿结局如早产、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、子痫前期、剖宫产、胎盘早剥、前置胎盘、产后出血、新生儿性别的差异也无统计学意义(P>0.05)。 结论 在单囊胚冻融胚胎移植周期中,三组间新生儿体质量差异无统计学意义, 但与雌激素使用时间12~16 d 组相比,21~31 d 组的雌激素治疗会增加低出生体质量儿的发生率,差异有统计学意义。雌激素使用时间在21 d 内不会对新生儿体质量以及母婴并发症产生负面影响,在临床上需结合患者实际情况合理安排时间。

目的 观察耳穴电针联合高频重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation, rTMS)对卒中后抑郁患者的效果,为临床治疗提供新方案。 方法 选取2023年2月至2024年12月就诊于大连医科大学附属第二医院的卒中后抑郁患者140例,随机分成对照组(34例)、耳穴电针组(36例)、rTMS组(33例)和耳穴联合rTMS组(37例);比较各组患者汉密尔顿抑郁量表-17(Hamiltons Depression Scale-17, HAMD-17)、抑郁自评量表(Self-Rating Depression Scale, SDS)、蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment, MoCA)、改良Barthel指数(Modified Barthel Index, MBI)量表、临床神经功能缺损量表(Clinical Neurological Deficit Scale, CNDS)得分以及5-羟色胺(5-hydroxytryptmine, 5-HT)和血清脑源性神经营养因子(brain-derived neuro-trophic factor, BDNF)水平。 结果 与治疗前相比,各组患者治疗后HAMD-17、SDS评分和CSS评分均减少,差异有统计学意义(P<0.05);MoCA、MBI评分增加,差异有统计学意义(P<0.05),5-HT和BDNF水平增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,耳穴联合rTMS组、耳穴电针组、rTMS组HAMD-17、SDS评分和CSS评分减少,差异有统计学意义(P<0.05);MBI评分增加,差异有统计学意义(P<0.05);5-HT和BDNF水平增加,差异有统计学意义(P<0.05)。耳穴联合rTMS组患者的上述评分和指标优于其他2个观察组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 耳穴电针联合高频rTMS可显著改善卒中后抑郁患者的各项指标。

目的 通过临床试验观察膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)患者的膝关节屈伸肌力下降情况,并运用全基因组关联性分析(genome-wide association studies, GWAS)膝骨关节炎与大腿肌肉体积之间的因果关系,分析膝骨关节炎患者大腿肌力下降的特征及潜在影响因素。 方法 选取2023年1月至2024年12月上海中冶医院骨科确诊膝骨关节炎女性患者52例,50~80岁,分为双膝关节疼痛组(n=19)和单膝关节疼痛组(n=33),并招募健康成年人作为健康对照组(n=65)。采用方差分析比较各组间膝关节屈伸肌的最大峰值力矩。采用逆方差加权法、MR-Egger法和加权中位数法进行双向双样本孟德尔随机化分析膝骨关节炎、疼痛与大腿前后侧肌肉体积之间的相关性。 结果 双膝关节疼痛组的伸膝和屈膝峰力矩与健康对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);单膝关节疼痛组的健侧和患侧峰力矩与健康对照组相比差异有统计学意义(P<0.001);单膝关节疼痛组的健侧与患侧之间差异无统计学意义(P>0.05)。膝骨关节炎和疼痛与大腿前侧肌肉体积间无相关性(膝骨关节炎:P=0.16; 疼痛: P=0.08),而与大腿后侧肌肉体积呈负相关性(膝骨关节炎: P=0.01; 疼痛: P<0.05),大腿前侧肌肉体积和大腿后侧肌肉体积与膝骨关节炎和疼痛均无负相关性。 结论 有疼痛症状的膝骨关节炎患者屈伸肌群最大峰值力矩显著下降,大腿后侧肌肉体积减少可能是屈肌群肌力下降的原因之一,而伸肌群的肌力下降与大腿前侧肌肉体积无关,表明有疼痛症状的膝骨关节炎患者屈伸肌力下降的影响因素不同。

目的 探讨基于Vision-LSTM的人工智能(artificial intelligence, AI)技术对甲状腺影像报告与数据系统 4b(Thyroid Imaging Reporting and Data System Category 4b, TI-RADS 4b)类甲状腺结节的超声诊断准确性,评估其辅助临床决策的可行性。 方法 收集我院401例TI-RADS 4b类甲状腺结节的超声影像数据,并利用这些数据对Vision-LSTM模型进行训练和验证。将AI模型的诊断结果与初级医生及高级医生的诊断结果进行对比,评估其在诊断准确性、稳定性等方面的表现;采用曲线下面积(area under the curve, AUC)、精确率-召回率(precision-recall, PR)曲线等指标对模型性能进行量化分析。 结果 在独立验证中,Vision-LSTM模型的AUC(0.88)与准确率(89.4%)均显著高于初级医生(AUC: 0.624),并达到与高级医生(AUC: 0.787)相当的水平,证明了其辅助诊断的应用潜力。AI模型能够准确识别超声影像中的复杂特征,稳定输出一致的诊断结果,展现出较高的准确性和可靠性。 结论 基于Vision-LSTM模型的AI技术可显著提升TI-RADS 4b类甲状腺结节的诊断效率与准确性,为医生提供有效辅助,减轻工作负担。

目的 探讨脊髓损伤致截瘫患者康复的研究现状、国际合作情况、热点主题以及发展趋势。 方法 检索Web of Science核心数据库收录的脊髓损伤致截瘫患者康复研究相关文献,检索时限为2005年1月1日至2024年12月31日,采用CiteSpace、VOSviewer和R-bibliometrix进行文献计量学与可视化分析,提取发文量、国家与机构合作网络、高被引文献、关键词共现与演变趋势等指标进行系统性分析。 结果 共检索到584篇符合纳入标准的文献,美国、瑞士等国家及其机构和作者在脊髓损伤致截瘫患者康复领域发文量和被引频次均处于领先水平,国际间已经形成较为稳定的国家和地区的合作关系网络。研究热点正由病理机制的基础研究转向技术驱动的干预手段和神经康复方向,呈现出多学科融合与精准康复的发展趋势。 结论 该领域正处于由传统康复模式向技术驱动与健康管理一体化转型的关键阶段。未来研究需进一步加强跨学科协作,促进低成本技术普及,完善心理、社区康复体系,推动建立普惠化、智能化的康复健康管理体系。

目的 采用两样本孟德尔随机化(Mendelian randomization, MR)方法探索MMP1/MMP8/MMP9基因与慢性牙周炎是否存在因果关系。 方法 使用FinnGen R10(于2023年12月公开发布)慢性牙周炎(K11_PERIODON_CHRON)全基因组关联研究(genome-wide association study, GWAS)汇总数据,选择与暴露基因(MMP1/MMP8/MMP9)显著相关且符合标准的单核苷酸多态性作为工具变量,以MMP1/MMP8/MMP9基因作为暴露变量,慢性牙周炎作为结局变量。采用MR-Egger回归、加权中位数、逆方差加权、简单模式、加权模式进行MR分析。用Cochrans Q检验和MR-Egger回归进行异质性检测。用MR-Egger截距和MR-PRESSO分析方法评估水平多效性。并用leave-one-out分析方法评估MR分析结果的整体稳定性。使用比值比(odds ratio, OR)和95%置信区间(confidence interval, CI)来量化MMP1/MMP8/MMP9基因对慢性牙周炎的因果关系。 结果 在数据集ebi-a-GCST90012033(P=0.005, OR=0.955, 95%CI=0.924~0.986)和数据集eqtl-a-ENSG00000196611(P=0.048, OR=0.912, 95%CI=0.832~0.999)中,基于逆方差加权分析的结果提示MMP1基因预测的表达水平与慢性牙周炎风险之间存在显著的因果关系。在数据集prot-a-1920(P=0.087, OR=0.993, 95%CI=0.985~1.001)和数据集eqtl-a-ENSG00000118113(P=0.883, OR=0.992, 95%CI=0.887~1.109)中,基于逆方差加权分析的结果提示MMP8基因预测的表达水平与慢性牙周炎风险之间不存在显著的因果关系。在数据集prot-a-1921(P=0.450, OR=0.985, 95%CI=0.948~1.024)中,基于逆方差加权分析的结果提示MMP9基因预测的表达水平与慢性牙周炎风险之间不存在显著的因果关系。但在数据集eqtl-a-ENSG00000100985(P=2.405×10^-5, OR=1.123, 95%CI=1.064~1.184)中,基于逆方差加权分析的结果提示MMP9基因预测的表达水平与慢性牙周炎风险之间存在显著的因果关系。 结论 从遗传学层面,MR分析结果支持MMP1、MMP9基因在慢性牙周炎发病机制中可能发挥致病作用。从病因学层面,MMP1、MMP9基因只是慢性牙周炎的致病因素之一。

目的 探讨山东省德州市冷季低温暴露与急救呼叫频次的关联,评估细颗粒物(fine particulate matter, PM_2.5)及其组分对该关联的修饰效应,为应对不良大气环境的健康风险提供依据。 方法 收集德州市2020—2023年急救呼叫数据和同期气象数据,采用嵌套分布滞后非线性模型(distributed lag non-linear models, DLNM)的广义加性模型(generalized additive model, GAM)分析冷季(11月至次年2月)低温暴露与急救呼叫频次的关联程度,通过将PM_2.5及组分与气温建立乘积项探究其修饰效应。 结果 2020—2023年冷季德州市总急救呼叫频次共150 408次。研究期间日平均温度(1.52±6.23)℃,PM_2.5日平均质量浓度57.60±53.65 μg/m³。累积低温暴露与急救呼叫频次的关联曲线近似“U”型(滞后0~30 d),极端低温暴露(-6.03 ℃)和中度低温暴露(-1.02 ℃)对应的急救呼叫相对风险(relative risk, RR)及95%CI分别为1.61(1.36~1.91)和1.40(1.27~1.54)。在极端低温暴露时,黑碳和有机物可增加低温相关急救呼叫风险(P<0.05);在中度低温暴露时,PM_2.5及组分可增加低温相关急救呼叫风险(P<0.01)。 结论 山东省德州市冷季低温暴露与急救呼叫频次增加显著相关,高浓度PM_2.5及其组分可增强低温暴露-急救呼叫频次的关联强度。

导管消融已经成为心房颤动(房颤)的一线治疗方式,对比抗心律失常药物,导管消融在降低房颤复发率和心血管住院率、延缓房颤进展、改善生活质量等方面有显著的优势。传统消融能量包括冷冻球囊消融(冷)和射频消融(热),目前冷冻球囊已发展至第四代,射频消融在压力感应技术和多孔灌注技术基础上,发展出了超高功率短时程消融模式(very high-power short-duration,vHPSD),这些技术革新进一步提高了导管消融手术的效率和安全性。新兴消融能量包括激光球囊消融(光)和脉冲场消融(电),新能量在房颤治疗尤其是肺静脉隔离(pulmonary vein isolation, PVI)上取得了良好的效果。近年来,脉冲场消融(pulsed field ablation,PFA)以其高效性和可靠的安全性成为导管消融领域最受关注的热点技术,利用电穿孔效应,在控制电场强度的情况下,PFA可以选择性地损伤心肌细胞,避免对膈神经、食管等周围组织的损伤。本文总结了这四种能量消融技术的最新临床进展,对四种能量在房颤消融中的安全性和有效性进行了比较分析。结果显示,四种不同能量均适用于PVI,PFA技术显著缩短了手术时间和术者学习曲线,降低了膈神经损伤、食管损伤等传统并发症发生率,但新能量的长期有效性、安全性以及在肺静脉外结构中的应用需要更长时间、更大规模的临床研究来确认。

自身免疫性郎飞结病(autoimmune nodopathies, AN)是一种自身抗体,尤其是结旁蛋白IgG4亚型自身抗体作用于郎飞结引起的脱髓鞘病理改变,从而产生一系列临床表现的周围神经病,又统称为结病或结旁病。目前对于结病/结旁病的研究多聚焦于其临床、病理及免疫学等特征,其诊断也多依赖于抗体检测及脑脊液检查等有创检查。周围神经磁共振成像作为无创检查已越来越多地被用于评估周围神经疾病,通过不断了解不同周围神经疾病的形态学及定量变化,可以更好地理解疾病潜在的病理生理过程,为疾病的诊断及治疗评估提供理论支持。因此,本文就磁共振腰骶丛神经成像在结病/结旁病中的应用做一综述,为临床早期诊断及鉴别诊断提供佐证,为制定精准治疗方案提供依据。