目的 探讨消癥抑癌方对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和迁移的影响及潜在作用机制。 方法 利用网络药理学分析消癥抑癌方抗卵巢癌的关键活性成分和核心靶点,并通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析筛选其相关生物学过程和通路。制备消癥抑癌方含药血清,用含药血清处理卵巢癌SKOV3细胞。采用CCK-8法和EdU染色法检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞增殖的影响;采用划痕实验和Transwell迁移实验检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞迁移的影响;采用Western blotting法检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞自噬蛋白(P62)、自噬相关蛋白3(ATG3)、微管相关蛋白1轻链3 B(LC3B)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白的影响。 结果 网络药理学研究显示,消癥抑癌方抗卵巢癌的关键活性成分是槲皮素、山柰酚、木犀草素、汉黄芩素、柚皮素等,核心靶点是MAPK3、AKT1、SRC、MAPK1、TP53等。KEGG富集分析共得到171条通路(P<0.01),其中Degree值排名较靠前且与卵巢癌相关的通路主要涉及癌症通路、PI3K-AKT通路、MAPK通路、AMPK通路、自噬、mTOR通路等。体外实验结果表明,与对照组相比,10%和20%含药血清组SKOV3细胞存活率和EdU阳性细胞率均降低(P<0.001),细胞迁移率下降(P<0.001),迁移细胞数也减少(P<0.01或P<0.001)。Western blotting结果表明,10%和20%含药血清干预后,P62、ATG3、LC3B-Ⅱ蛋白表达水平均上调(P<0.05或P<0.01或P<0.001),p-AMPK/AMPK的表达水平上调(P<0.001),p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR的表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。 结论 消癥抑癌方抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与调控AMPK/AKT/mTOR通路,进而阻断自噬流有关。

目的 探讨干扰素-γ(IFN-γ)调控程序性死亡受体-配体1(PD-L1)的表达对非霍奇金淋巴瘤(NHL)增殖的影响及其机制。 方法 应用流式细胞术检测多种NHL细胞株中PD-L1的表达;利用IFN-γ处理NHL细胞株U937及Jeko-1后,通过流式细胞术及实时定量PCR(qRT-PCR)法检测PD-L1的表达水平;通过INF-γ及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路抑制剂共培养NHL细胞后,应用蛋白免疫印迹法及流式细胞术法检测NHL细胞PD-L1的表达水平;通过细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)和羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色掺入检测细胞增殖,应用Edu标记法检测细胞增殖率,并用流式细胞术检测细胞周期。 结果 qRT-PCR法显示,多种NHL细胞株表面均表达PD-L1; IFN-γ处理后,U937及Jeko-1细胞PD-L1的mRNA及蛋白表达水平均升高; IFN-γ及信号通路抑制剂处理U937和Jeko-1细胞后, PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂抑制IFN-γ上调PD-L1的表达。IFN-γ及信号通路抑制剂共处理U937及Jeko-1细胞后,IFN-γ促进的细胞增殖被抑制。 结论 IFN-γ可以通过PI3K/Akt/mTOR信号通路上调NHL细胞PD-L1的表达;IFN-γ通过上调NHL细胞PD-L1的表达促进NHL细胞增殖。

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者发生肌肉痉挛的频率及危险因素。 方法 选取2021年7月至9月于山东大学齐鲁医院内分泌科住院的136例T2DM患者为研究对象,根据肌肉痉挛量表评估的结果,分为肌肉痉挛组(n=65)、无肌肉痉挛组(n=71)。收集两组患者年龄、性别、吸烟饮酒史、体质量指数(BMI)、平均动脉压(MAP)、糖尿病病程、血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹C肽,以及血清肌酐(Scr)、白蛋白(ALB)、总钙(Ca)、镁(Mg)、维生素D(VIT-D)水平等一般情况和临床资料。应用多因素二分类Logistic回归分析影响T2DM患者合并肌肉痉挛的危险因素。 结果 47.8%(65/136)患者存在不同程度的肌肉痉挛,其血白蛋白水平显著低于无肌肉痉挛患者(P=0.023),糖尿病病程亦明显延长(P=0.045);两组年龄、性别、吸烟率、饮酒率、BMI、MAP及血糖、HbA1c、空腹C肽、Scr、Ca、Mg、VIT-D水平差异无统计学意义(P均>0.05)。多因素Logistic回归分析显示,糖尿病病程长(OR=1.068,95%CI:1.008~1.131)和低血白蛋白水平(OR=1.159,95%CI:1.015~1.323)为T2DM肌肉痉挛的独立危险因素。 结论 长糖尿病病程和低血白蛋白水平可能是T2DM患者发生肌肉痉挛的独立危险因素。

目的 探讨获得性凝血因子缺乏症的病因、临床表现、治疗、转归。 方法 回顾性分析山东大学齐鲁医院2011年7月至2021年10月确诊为获得性凝血因子缺乏症患者31例的临床资料。获得性血友病A(AHA)患者根据FⅧ抑制物水平分组并进行组间相关性分析。 结果 31例获得性凝血因子缺乏症患者中,29例为AHA,2例为获得性凝血因子V缺乏症(AFVD)。AHA最常见临床表现为皮肤瘀斑(62.07%)和肌肉软组织血肿(34.48%),AFVD则分别表现为血尿和皮肤出血点。凝血因子Ⅷ(FⅧ)抑制物滴度高的患者活化的部分凝血活酶时间(APTT)更长,凝血因子Ⅷ活性(FⅧ: C )水平更低,差异有统计学意义(P<0.05),但FⅧ抑制物滴度高低与患者的出血严重程度无相关性。 结论 筛查患者病因,结合患者的病因、年龄、基础病及凝血因子水平等实验室检查评估后制定个性化治疗方案,对于获得性凝血因子缺乏症的管理具有重要意义。

目的 分析术前不同终末期肝病模型(MELD)评分对急性Stanford A型主动脉夹层患者行手术治疗后早期死亡及术后并发症发生的影响,探究术后早期死亡的危险因素。 方法 回顾性分析2018年1月至2021年12月在山东大学齐鲁医院心血管外科接受手术治疗的急性Stanford A型主动脉夹层患者304例的临床资料。根据术前MELD评分评价肝功能,将患者分为低MELD组(n=204例,MELD<10)、中MELD组(n=72例,10≤MELD<15)和高MELD组(n=28例,MELD≥15)。比较各组间一般资料和围术期临床资料。采用Cox回归分析术前MELD及其他因素对患者生存结局的影响。 结果 共纳入304例患者,63例(20.7%)患者在术后早期死亡。术前MELD水平较高的患者术后早期死亡率(P<0.001)和主要不良临床事件(MACE)的发生率(P=0.007)明显较高。多因素Cox回归显示,术前MELD≥15与住院死亡率独立相关。 结论 术前MELD增高即肝功能下降显著增加了急性StanfordA型主动脉夹层患者的术后早期死亡率和不良并发症的发生率。术前MELD评分有助于对患者进行风险分层,进而对高危患者进行早期预防和干预,以改善患者预后。

目的 分析47例单个脊髓炎性脱髓鞘病灶患者疾病转化的影响因素。 方法 采用回顾性研究方法,搜集92例首发影像表现为单个脊髓炎性脱髓鞘病灶的患者,根据随访是否出现向视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)、多发性硬化(MS)或抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白免疫球蛋白G抗体相关疾病(MOG-AD)转化分为转化组(n=47)与非转化组(n=45):采用独立样本t检验、χ2检验、Fisher确切概率法或Mann-Whitney U检验比较两组临床资料,二分类Logistic回归分析疾病转化的独立危险因素。 结果 在47例转化组和45例非转化组中,疾病转化与年龄、随访过程中出现视力障碍、脊髓MRI累及节段≥3个、风湿系列异常、中枢神经系统(CNS)脱髓鞘抗体阳性及复发存在统计学意义(P<0.05)。二分类Logistic回归分析显示复发(OR=6.850,95%CI:2.206~21.270,P=0.001)、MRI累及节段≥3个(OR=3.968,95%CI:1.230~12.805,P=0.021)、CNS脱髓鞘抗体阳性(OR=19.983,95%CI:2.258~176.816,P=0.007)是转化的独立危险因素。 结论 单个脊髓炎性脱髓鞘病灶的转化与年龄、随访过程中出现视力障碍、MRI长度、CNS脱髓鞘抗体、风湿系列抗体、复发多种因素相关。

目的 探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)日孕酮升高对辅助生殖技术(ART)新鲜周期妊娠结局的影响及与获卵数的关系。 方法 回顾性分析2019年1月至2020年12月于河北医科大学第二医院生殖医学科接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵细胞质内单精子注射(ICSI)新鲜周期移植D3胚胎的不孕患者,共纳入2 437例患者。通过单因素分析、多元Logistic回归分析、平滑曲线拟合及阈值效应分析hCG日孕酮升高对ART新鲜周期妊娠结局的影响,并通过分层分析评估其影响是否与获卵数有关。 结果 所有患者调整混杂因素后,阈值效应分析结果显示,hCG日孕酮≥1.5 ng/mL时,孕酮每增加1 ng/mL,临床妊娠率下降60%(95%CI:0.2~0.7,P=0.004),宫内妊娠率下降70%(95%CI:0.2~0.7,P=0.003),活产率下降70%(95%CI:0.1~0.7,P=0.004)。按获卵数分组后结果显示,获卵数5~10时,hCG日孕酮≥1.8 ng/mL时,孕酮每增加1 ng/mL,临床妊娠率下降100%(95%CI:0.0~0.1,P=0.002);宫内妊娠率下降100%(95%CI:0.0~0.0,P<0.001);hCG日孕酮≥1.6 ng/mL时,孕酮每增加1 ng/mL,活产率下降90%(95%CI:0.0~1.0,P=0.049)。获卵数10~15时,孕酮≥1.1 ng/mL时,孕酮每增加1 ng/mL,临床妊娠率下降70%(95%CI:0.1~0.7,P=0.006),宫内妊娠率下降70%(95%CI:0.1~0.6,P=0.003),活产率下降70%(95%CI:0.1~0.6,P=0.003)。 结论 在接受IVF/ICSI新鲜周期移植的不孕患者中,hCG日孕酮≥1.5 ng/mL是影响临床妊娠率、宫内妊娠率和活产率的独立危险因素。分组后孕酮升高对获卵数5~15的患者影响更为明显,因此,若hCG日孕酮升高且获卵数在5~15之间的患者可行全胚冷冻,以期改善妊娠结局。

目的 探究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源的外泌体miR-100对多囊卵巢综合征(PCOS)患者颗粒细胞炎症的影响。 方法 选取2021年3月至2021年12月于石家庄市第四医院生殖医学中心就诊的70例PCOS患者为研究对象(PCOS组),同期70例因输卵管因素助孕治疗的非PCOS患者为对照(对照组),比较两组患者的临床基线资料及IVF妊娠结局相关参数。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测患者颗粒细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达。采用二元Logistic回归分析影响PCOS的危险因素。RT-qPCR验证hUC-MSCs外泌体中miR-100的表达水平。合成miR-100模拟物及其对照转染至人卵巢颗粒细胞KGN中,RT-qPCR检测miR-100的表达水平。在脂多糖(LPS)诱导的KGN炎症细胞模型中转染miR-100模拟物及其对照,RT-qPCR检测TNF-α、IFN-γ的mRNA表达水平。采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-100对靶基因的调控作用。miR-100过表达后,Western blotting检测KGN炎症模型中Toll样受体4(TLR4)、 p-IκBa、IκBa、p-p65、 p65蛋白水平。 结果 与对照组比较,PCOS组患者体质量指数(BMI)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、睾酮(T)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、窦卵泡数(AFC)、获卵数升高(P值分别为<0.001、<0.001、0.020、<0.001、<0.001、<0.001、<0.001);但MII卵率和2PN受精率降低,差异有统计学意义(P均<0.001)。与对照组患者比较,PCOS组患者TNF-α、IFN-γ的mRNA水平升高,差异有统计学意义(P均<0.001)。二元Logistic回归分析结果显示,LH、HOMA-IR、TNF-α、IFN-γ是影响PCOS的危险因素(P值分别为0.031、0.001、0.030、0.005)。RT-qPCR结果显示,miR-100在hUC-MSCs-exos中富集,miR-100过表达可抑制LPS诱导的颗粒细胞炎症因子TNF-α、IFN-γ的mRNA表达水平(P值分别为0.041、<0.001)。双荧光素酶报告基因结果显示,miR-100能结合TLR4 mRNA 3’UTR并有效抑制其表达(P<0.001)。Western blotting结果显示,与miR-NC组比较,过表达miR-100后KGN炎症模型中TLR4、 p-IκBa和p-p65蛋白表达降低(P值分别为<0.001、<0.001、0.049),IκBa蛋白水平升高(P<0.001)。 结论 PCOS患者颗粒细胞TNF-α、IFN-γ表达升高,是影响PCOS的危险因素。hUC-MSCs来源的外泌体miR-100可通过靶向TLR4/NF-κB信号通路抑制PCOS颗粒细胞的炎症反应。

目的 探讨基于首次平扫CT的影像组学列线图模型对幕上自发性脑出血患者90 d功能状态的预测价值。 方法 回顾性分析幕上自发性脑出血(sICH)患者376例,根据90 d改良Rankin量表(mRS)评分结果将患者分为预后不良组121例(mRS评分为4~6分)和预后良好组255例(mRS评分为0~3分)。从首次平扫CT提取影像组学特征,计算影像组学评分(Rad-score)并构建影像组学模型。分析筛选临床因素用于构建临床模型,并结合Rad-score构建列线图模型。分析比较上述3种模型的预测效能。 结果 最终筛选出20个特征用于构建影像组学模型,临床模型由年龄(OR=1.045,95%CI: 1.023~1.066)、格拉斯哥昏迷评分GCS≤8(OR=4.128,95%CI: 2.161~7.887)、血肿破入脑室(OR=3.071,95%CI: 1.744~5.408)和血肿体积>30 mL(OR=5.802,95%CI: 3.327~10.117)构成。在训练集,列线图模型的曲线下面积(0.892)高于临床模型(0.814)及影像组学模型(0.862),差异有统计学意义(Z值分别为3.356、2.231,P值分别为0.001、0.026)。 结论 列线图模型可有效预测幕上sICH患者的90 d预后,有助于临床决策。

目的 探讨痔手术后难治性出血经介入治疗的即刻疗效及长期预后。 方法 回顾性分析3例行介入治疗的痔手术后反复多次出血患者的临床资料,随访时间分别为114个月、110个月、78个月,3例患者均经造影后明确出血部位,分别为左侧直肠上动脉分支末端造影剂外溢、直肠上动脉分支末端造影剂外溢和左侧髂内动脉末端血管造影剂外溢;2例一次栓塞成功,1例栓塞后再次出血行第二次介入治疗后成功止血。3例患者经介入治疗后均未再出血。 结果 3例患者均止血确切,无肠坏死、死亡等严重并发症,均有肛门下坠、疼痛症状;1例出现阴囊水肿、勃起障碍,长期随访后又恢复。 结论 介入栓塞治疗难治性痔术后持续性出血,即刻疗效显著,但安全性需要多中心及大样本的长期随访与观察。

目的 探究寡而大肾发育不良合并配对盒基因2(PAX2)基因突变病例临床特点。 方法 回顾分析1例肾活检病理为寡而大肾发育不良,基因示PAX2错义突变患儿的临床资料,并复习相关文献。 结果 患儿,男,9岁8个月,表现为非肾病水平蛋白尿,肾功能不全,肾活检病理提示:(1)寡而大肾发育不良;(2)局灶节段性肾小球硬化。二代测序发现PAX2基因c.94C>T(p.P32S)杂合变异,Sanger测序验证示变异来自患儿父亲。 结论 考虑可能是来源于患儿父亲的PAX2基因杂合突变致病,导致患儿肾发育不良。寡而大肾发育不良起病隐匿,临床中孤立性蛋白尿伴有肾功能不全需警惕此病,及时行肾活检。

目的 评价临终患者病情评估单预测临终患者生存期的效果。 方法 回顾性分析2020年4月至2022年2月山东电力中心医院老年病区死亡的26例临终患者的临床资料。计算预期生存时间与实际生存时间的符合率、预测生存时间少于30 d的评分界值的合理性。绘制生存曲线并探讨各评估因素对生存时间的影响。采用临终病情评估单对生命体征等指标进行评分,各项指标综合得出综合性得分,分析与生存期的关联。 结果 入院时评估的符合率65.38%。部分评估项目设有警示指标,多个警示指标预测生存期不足3 d的符合率100%。最常见的警示指标:意识状态的改变(76.92%),收缩压<80 mmHg(38.46%),呼吸>30次/min(26.92%)。50分作为预测生存时间少于30 d界限值的灵敏度为77.78%,特异度为83.33%,阳性预测值93.33%,阴性预测值55.55%,约登指数为0.61。评分在50分及以下组、评分在50分以上组生存时间存在着统计学差异(P=0.021)。Cox分析显示:临终病情评估单评分呼吸(HR=0.609,95%CI:0.381~0.973)、脉搏(HR=0.615,95%CI:0.426~0.889)、脏器状况(HR=0.362,95%CI:0.170~0.773)对生存时间的影响具有统计学意义(P<0.05)。 结论 临终患者病情评估单能够比较准确地评估晚期癌症、慢性器官衰竭、失智等临终患者的生存期。

目的 分析1990—2019年中国人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)疾病流行现状、负担及危险因素变化趋势,预测2020—2030年HIV/AIDS发病和死亡情况。 方法 探讨1990—2019年中国HIV/AIDS疾病的流行现状,通过Joinpoint回归拟合其发病率和疾病负担变化趋势。采用集成嵌套拉普拉斯近似(INLA)的贝叶斯年龄-时期-队列分析(BAPC)方法预测2020—2030年HIV/AIDS发病和死亡趋势。 结果 1990—2019年中国男性HIV/AIDS标化发病率、标化死亡率高于女性,15~19岁、20~24岁标化发病率总体呈增长趋势,75~79岁标化发病率变化幅度最大。1990—2019年中国HIV/AIDS标化发病率、标化伤残调整寿命年(DALYs)率均呈上升趋势,差异具有统计学意义(P均<0.001);归因于危险性行为的标化DALYs率最高。BAPC预测结果显示,2020—2030年中国男性HIV/AIDS标化死亡率呈上升趋势。 结论 中国青少年HIV/AIDS发病风险持续增加,老年群体死亡风险也不容忽视;HIV/AIDS疾病负担呈上升趋势,危险性行为是首要危险因素。未来应针对重点人群采取预防和控制措施。

目的 了解济宁市2021年柯萨奇病毒A16 型(CV-A16)流行特点和全基因组特征。 方法 2021年1月至12月采集济宁市疑似手足口病患者粪便标本513份,进行CV-A16型病毒核酸检测和病毒分离,对分离的4株CV-A16进行全基因组测序和生物信息学分析。 结果 共检出CV-A16型36例,阳性率为7.02%(36/513),其中7~9月阳性率最高。4株毒株VP1基因位于B1a和B1b两个进化分支。与原型株G-10(CAU05876)相比,4株毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为77.5%~78.0%和94.7%~94.9%。4株毒株编码蛋白均发生多处氨基酸变异。 结论 CV-A16是2021年引起济宁市手足口病的主要病原体之一,在济宁市流行的主要是B1a和B1b两个亚型,需要加强手足口病监测力度。

目的 分析在新型冠状病毒肺炎流行背景下,2016年4月—2022年3月国内深圳市和济南市流感流行特点,了解我国南北方地区流感流行差异。 方法 使用深圳市和济南市国家级哨点医院2016—2022监测年度流感样病例(ILI)和流感病原学监测资料,分析流感流行特征和趋势。 结果 2016—2022监测年度深圳市和济南市国家级哨点医院的门急诊病例中流感样病例百分比(ILI%)分别为2.25%、3.45%。两地区ILI%最高的年份均为2021—2022监测年度。ILl年龄构成均以0~4岁为主(分别占40%、46%)。按月分析两地区流感病毒分离阳性率与ILI%变化的相关性,两者趋势均存在正相关(r=0.238,P<0.05;r=0.425,P<0.001)。两地区不同监测年度流感优势毒株型别均不相同,呈交替变化,但每年流行的型别及高峰期的优势毒株型别基本一致。 结论 2020—2021监测年度即新型冠状病毒肺炎流行初期,深圳市和济南市流感活跃程度明显低于往年平均水平且流行毒株型别单一,其余监测年度基本符合我国南、北方地区流感流行特征。

目的 探讨氨基酸与2型糖尿病(T2D)的双向因果关联。 方法 利用氨基酸和T2D全基因组关联研究汇总数据,通过逆方差加权法、加权中位数法、MR-Egger回归法、MR稳健调整轮廓得分法、MR多效性残差及异质性检测法(MR-PRESSO)进行两样本双向孟德尔随机化(MR)分析,并采用Cochrans Q检验、MR-Egger回归截距项检验、MR-PRESSO全局检验评估结果的异质性和水平多效性。 结果 逆方差加权法结果显示,亮氨酸(OR=1.239,95%CI: 1.078~1.424,P=0.002 5)、缬氨酸(OR=1.222,95%CI: 1.071~1.394,P=0.002 9)会增加T2D发病风险,甘氨酸(OR=0.885,95%CI: 0.831~0.942,P=0.000 1)则降低T2D发病风险。反向MR分析结果显示,T2D分别与亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸的增加和甘氨酸的降低有因果关联。多种MR方法的结果基本一致,且敏感性分析未发现潜在的多效性。 结论 较高水平的亮氨酸、缬氨酸及较低水平的甘氨酸与T2D发病风险具有双向因果关联,T2D对异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸有正向因果效应。