山东大学学报 (医学版)

2009, 47(9): 1-4.

摘要 ( 1021 )

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目的探讨糖尿病大鼠学习能力与大脑神经元凋亡状况及血糖的关系。方法采用电迷宫法测试26只糖尿病大鼠（糖尿病组）和30只正常大鼠（对照组）的学习能力，并应用原位末端标记法检测其额叶皮层和海马发生细胞凋亡的神经元数目，免疫组化法检测凋亡调节基因Bcl2、Bax的表达，并对糖尿病大鼠学习能力与额叶皮层和海马凋亡细胞数目及糖化血红蛋白进行相关分析。结果糖尿病组大鼠电迷宫测试成绩明显下降，达到学会标准前所需训练次数明显多于对照组（P＜0.001），额叶皮层和海马细胞凋亡数高于对照组，Bcl2表达减少，而Bax表达则增加（P均＜0.01）。糖尿病大鼠达到学会标准前所需训练次数与额叶皮层和海马细胞凋亡指数呈正相关（r=0.410，P＜0.05），且与糖化血红蛋白呈正相关。结论糖尿病高血糖状态下额叶皮层与海马凋亡调节基因表达改变引起的细胞凋亡增加可能与糖尿病认知功能障碍有关。

Graves病131治疗后1年内早发甲减影响因素分析

2009, 47(9): 5-6.

摘要 ( 994 )

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567例老年与非老年2型糖尿病患者的临床特点分析

2009, 47(9): 7-10.

摘要 ( 1186 )

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目的比较老年与非老年2型糖尿病（T2DM）临床特征的异同。方法收集同期住院治疗的285例老年糖尿病患者及282例非老年糖尿病患者的临床资料，比较病程、体质量指数、血压、空腹血糖、血脂、糖化血红蛋白及并发症情况。结果病程、舒张压、胆固醇等方面，两组差异有统计学意义(P＜0.05)，老年组病程长，非老年组舒张压、血总胆固醇较高；两组患者空腹血糖、糖化血红蛋白、血压、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白达标率均较低，非老年组更低；老年组患者心、脑血管疾病、视网膜病变等眼部并发症、感染性疾病等的患病率较非老年组高(P＜0.05)。结论老年和非老年糖尿病患者血糖、血脂、血压控制达标率均低，与糖尿病防治指南的控制目标有较大差距，需要进一步重视 T2DM治疗的全面达标；老年糖尿病患者心脑血管疾病、视网膜病变、感染并发症的患病率较高，应加强防治；非老年糖尿病患者应加强血脂、血压的控制。

2型糖尿病患者轻度认知功能障碍和血清AGEs水平的关系

2009, 47(9): 11-13.

摘要 ( 1280 )

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目的探讨2型糖尿病患者认知功能障碍与血清晚期糖基化终末产物（AGEs）水平的关系。方法将2型糖尿病患者62例分为糖尿病轻度认知障碍组30例，糖尿病非认知障碍组32例，设正常对照组30例。用ELISA法测定血清AGEs，并测定糖化血红蛋白、血脂、尿酸、纤维蛋白原、24?h尿微量白蛋白等指标。结果糖尿病认知障碍组血清AGEs水平明显高于糖尿病非认知障碍组（P＜0.05）及正常对照组（P＜0.01）；2型糖尿病患者MMSE评分与年龄、糖尿病病程、糖化血红蛋白、体质量指数及血清AGEs水平呈负相关（r＝-0.315，-0.276，-0.384，-0.384，-0.282）。结论血清AGEs升高是2型糖尿病患者认知功能下降的一个重要危险因素，参与了糖尿病脑病的发病。

2型糖尿病患者血清IL23、TNFα、IFNγ水平
与胰岛素抵抗的相关性

2009, 47(9): 14-16.

摘要 ( 1184 )

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目的探讨2型糖尿病患者血清白介素23（IL23）、肿瘤坏死因子α(TNFα)、干扰素γ(IFNγ)的水平与胰岛素抵抗相关性。方法将85例观察对象分为：正常对照组(NGT组)20例、新发2型糖尿病组（DM1组）33例、既往2型糖尿病组（DM2组）32例，均监测体质量、身高、腰围、臀围、空腹血糖（FPG）、胰岛素（FINS）、胆固醇（CH）、甘油三酯（TG）、糖化血红蛋白（HbA1c），并测定IL23、TNFα、IFNγ浓度，简易稳态模型评估胰岛素抵抗指数（HOMAIR）。结果DM1、DM2组的IL23 水平较NGT组明显升高（P＜0.05），而DM1组又较DM2组明显升高（P＜0.01）；DM1、DM2组的TNFα水平较NGT组明显升高（P＜0.05），DM1、DM2组组间比较无统计学差异；三组间IFNγ水平比较无统计学差异（P＞0.01）。血清IL23与HOMAIR（r=0.412,P=0.001）、TNFα（r=0.458，P=0.000）显著相关，与IFNγ无关（P＞0.05）；TNFα、IFNγ与HOMAIR显著相关（r=0.410,P=0.001；r=0.739, P=0.001）。结论IL23、 TNFα是2型糖尿病胰岛素抵抗的重要细胞因子，IL23不能通过参与调节IFNγ发挥作用。

CB1介导Δ9THC抑制CA1区LTD的作用

2009, 47(9): 17-20.

摘要 ( 1247 )

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目的探讨大麻素受体1(CB1)在四氢大麻酚(Δ9THC)抑制CA1区长时程抑制(LTD)中的作用。方法在小鼠腹腔注射Δ9THC(10?mg/kg)或CB1受体的选择性抑制剂SR141716(SR，5?mg/kg)24?h后切片，在海马CA1区记录场电位EPSP。结果①给予低频电刺激(1?Hz 15?min)诱导CA1区LTD，Δ9THC可显著降低LTD(P<0.01)；②Δ9THC显著降低LTD的效应可被CB1的选择性抑制剂SR所翻转；③在CB1基因敲除的小鼠，Δ9THC对LTD的效应与溶剂对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论CB1受体介导Δ9THC抑制离体海马CA1区LTD的作用。

氨茶碱/壳聚糖/β环糊精肺部缓释微球对呼吸道粘膜的影响

2009, 47(9): 21-24.

摘要 ( 1218 )

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目的探讨氨茶碱/壳聚糖/β环糊精微球肺部缓释微球的呼吸道粘膜毒性。方法通过测定氨茶碱/壳聚糖/β环糊精微球肺部给药后肺泡灌洗液乳酸脱氢酶活性和总蛋白及纤毛毒性实验,对其安全性进行评价。结果氨茶碱/壳聚糖/β环糊精微球的纤毛持续运动时间为512.33?min,纤毛运动频率为96.0%,表明其有良好的生理适应性;氨茶碱/壳聚糖/β环糊精微球气管给药后总蛋白含量增加,乳酸脱氢酶（LDH）活性与正常组和阴性对照组差异不明显。结论氨茶碱/壳聚糖/β环糊精微球对呼吸道粘膜无明显毒性,可作为肺部给药载体。

联合用药减少铜绿假单胞菌
耐药突变体的体外研究

2009, 47(9): 25-27.

摘要 ( 1176 )

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目的在体外探讨环丙沙星(CIP)、阿米卡星(AMK)、头孢他啶(CAZ)两两联合是否有利于减少铜绿假单胞菌耐药突变体的产生。方法分别应用琼脂平板稀释法和棋盘格法测定单独以及联合之后的最低抑菌浓度（MIC），采用琼脂平板稀释法测定单独及联合时对铜绿假单胞菌的防耐药突变浓度（MPC），并计算选择指数（SI）即MPC/MIC，根据SI下降的程度来判断防耐药突变能力。结果CIP、AMK、CAZ单药对铜绿假单胞菌的SI分别为16、16、＞32。两两联合后各自单药的SI分别为:CIP+AMK (CIP8，AMK4); CIP+CAZ (CIP4，CAZ8)；AMK+CAZ(AMK8，CAZ4)。结论以上3种药物任意两两联合均可以降低单独用药时对铜绿假单胞菌的SI，有利于防止铜绿假单胞菌耐药突变体的产生。

周围神经吻合后NGFFG胶膜包埋的实验研究

2009, 47(9): 28-31.

摘要 ( 1188 )

PDF (546KB) ( 207 )

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目的观察小鼠坐骨神经离断后，神经生长因子-纤维蛋白胶(NGFFG)混合胶膜吻合口包埋对坐骨神经再生的促进作用。方法随机将昆明小白鼠40只分为吻合包埋组(实验组)和单纯吻合组(对照组)，实验组外膜吻合后加用NGFFG胶膜包埋，对照组单纯外膜缝合。分别于术后4、8、12周，检测坐骨神经功能指数（SFI）、动作电位的振幅（NAP）及神经传导速度(NCV)；光镜观察再生神经纤维数量、通过率和纤维组织侵入情况；电镜观察神经纤维及轴突的直径、结构和髓鞘厚度。结果术后4、8、12周不同时间点实验组的NAP及NCV均大于对照组（P＜0.05）,术后4周两组动物SFI均开始恢复，随时间的推移恢复率逐渐提高，实验组恢复情况优于对照组（P＜0.05）。光镜下单位面积吻合口内再生神经纤维数量实验组明显多于对照组，电镜下两组再生神经纤维、轴突直径及髓鞘厚度差异不明显，均低于正常神经纤维，实验组再生神经纤维的微观结构较对照组清晰，成熟度好于对照组。结论纤维蛋白胶可以作为外源性神经生长因子的有效载体，用含有神经生长因子的纤维蛋白胶包埋离断周围神经的吻合口，能促进神经纤维的再生并有效防止吻合口与周围组织的粘连，减少纤维组织的侵入、神经纤维瘤的形成。

酪酸菌对腹泻小鼠的治疗效果及其安全性

2009, 47(9): 32-35.

摘要 ( 1213 )

PDF (924KB) ( 162 )

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目的研究分离自‘米雅’的酪酸菌（丁酸梭菌）治疗感染性腹泻小鼠的疗效及其安全性，并与链霉素、三黄汤的治疗效果进行比较。方法经大肠杆菌O157:H7感染制备小鼠的腹泻模型，采用灌胃方式进行给药治疗。测定各组小鼠的死亡率，观察小肠和肾脏组织的病理变化。结果① 从实验小鼠的死亡率看，酪酸菌组最高；② 从实验小鼠小肠组织病理结果看，酪酸菌治疗对降低小肠组织的炎症率有明显疗效；③ 从肾脏组织的病理结果看，酪酸菌治疗使肾脏组织的炎症率增加，病变程度加重。结论酪酸菌对腹泻小鼠的治疗，对改善小肠上皮组织的病变有明显疗效，但加重了肾脏组织的病变程度，其安全性值得进一步关注。
关键词：酪酸菌；腹泻；小鼠；安全性

牙槽骨牵张快速移动正畸牙齿对牙髓中TNFα含量影响的实验研究

2009, 47(9): 36-39.

摘要 ( 1029 )

PDF (413KB) ( 128 )

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目的探讨牙槽骨牵张快速移动牙齿时牙髓组织中TNFα含量的变化情况。方法利用酶联免疫吸附试验检测牙槽骨牵张快速移动牙齿后不同时间的牙髓组织中TNFα含量的动态变化。结果TNFα含量在牵张加力4周后明显升高，停止牵张加力后的第1周内TNFα含量出现明显的降低，而第2周内其变化趋势与第1周的相似，14～28?d时TNFα含量稳定在一定水平上，但其含量低于对照组。结论TNFα的含量可在2周内基本恢复正常，而第7～14天则为其炎症恢复为正常的时期，牙槽骨牵张快速移动牙齿对牙髓活性的影响是轻微的。

脑钠肽在急性心肌梗死早期诊断中的实验研究

2009, 47(9): 40-43.

摘要 ( 1296 )

PDF (430KB) ( 345 )

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目的探讨脑钠肽（BNP）在实验性大鼠急性心肌梗死（AMI）早期4?h内的变化。方法25只Wistar大鼠制作AMI模型，20只大鼠行假手术作为对照组，两组实验前后作心肌电镜观察。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测实验前后1～4?h大鼠血清BNP和心肌肌钙蛋白I（cTnI）浓度。结果成功建立AMI模型后1～4?h，大鼠血清BNP浓度较实验前和对照组显著升高(P均＜0.01)，以实验后2h大鼠血清BNP浓度最高（520.66±16.85）ng/L；AMI组大鼠1～4?h血清cTnI浓度较实验前及对照组差异无统计学意义(P均＞0.05)。自建立AMI模型后1～4?h，大鼠血清BNP浓度与AMI范围呈显著正相关，以2?h大鼠血清BNP浓度与AMI范围相关性最高(r=0.69, P＜0.05)。对照组实验前后血清BNP和cTnI浓度差异无统计学意义(P均＞0.05)。结论BNP可以作为提示早期AMI并可以同时预测梗死区大小的生化标志物。

电针对窒息脑瘫幼鼠海马、纹状体和运动皮质GAP43表达的影响

2009, 47(9): 44-48.

摘要 ( 1145 )

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目的观察电针对窒息性脑性瘫痪（CP）新生大鼠海马、纹状体和运动皮质内神经生长相关蛋白(GAP43)表达的影响，探讨电针治疗脑瘫的意义及机制。方法7日龄新生SpragueDawley (SD) 大鼠72只，随机分为假手术组、CP造模组、CP+电针组3组，每组24只。结扎大鼠左侧颈总动脉后，置于氧气浓度为8％、氮气浓度为92％的密闭氮氧仓中缺氧2?h，建立CP模型。电针组于造模后24?h开始治疗。3组均于造模后第3，7，14，21?d随机处死6只大鼠取脑，行HE染色和免疫组织化学染色(SABC法)，应用ImagePro Plus图像分析软件测定左脑海马、纹状体和运动皮质GAP43在以上各组中表达的平均光密度和阳性面积率，观察GAP43表达的变化。结果假手术组大鼠在各时间点各部位GAP43均有表达。造模组和电针组大鼠左脑海马、纹状体和运动皮质GAP43的表达明显高于假手术组（P＜0.01）；电针组在大多数时间点GAP43的表达均高于造模组(P＜0.05或P＜0.01)。结论电针早期介入对脑瘫的治疗有积极作用；增强GAP43长时程表达，促进神经细胞再生和突触重建，可能是针刺治疗窒息性脑瘫的重要机制。

GFP转基因鼠胚胎神经上皮
干细胞的体外培养

2009, 47(9): 49-52.

摘要 ( 1222 )

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目的观察绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）转基因鼠来源的胚胎神经上皮干细胞体外增殖和分化的情况。方法将来源于孕11dGFP转基因鼠的胚胎神经上皮干细胞与普通大鼠神经上皮干细胞进行体外培养，比较二者克隆增殖、分化的状况。结果GFP转基因鼠胚胎神经上皮干细胞可在体外进行克隆增殖，并能分化为神经元和神经胶质细胞，与普通鼠神经上皮干细胞比较没有差异。结论GFP转基因鼠的胚胎神经上皮干细胞可在体外克隆及分化，并能稳定地表达绿色荧光蛋白。

靶向沉默Notch1基因对膀胱癌细胞系T24增殖的影响

2009, 47(9): 53-57.

摘要 ( 1442 )

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目的探讨Notch1基因沉默对人膀胱癌细胞增殖的影响。方法用pGenesil质粒构建靶向Notch1的siRNA真核表达载体psiRNA1，并将其转染到膀胱癌细胞系T24中，四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)、流式细胞术(FCM)检测Notch1沉默后膀胱癌细胞生长变化、细胞周期和凋亡情况。逆转录聚合酶链反应（RTPCR）和蛋白印记法（Western Blot）检测Notch1基因的mRNA和蛋白在转染前后表达变化。结果转染psiRNA1质粒后T24细胞的生长受到显著抑制，呈一定的时间依赖性（60?h内），凋亡率增加，G0/G1期细胞明显增多（未转染组、空载体组、阴性对照组），与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），且Notch1基因在mRNA和蛋白水平表达相对于对照组明显下调（P＜0.05）。结论沉默Notch1基因能够抑制膀胱癌细胞的增殖，Notch1在膀胱癌中可能具有癌基因的作用。

谷胱甘肽对KLE与HEC1b子宫内膜癌细胞生长的影响

2009, 47(9): 58-61.

摘要 ( 1145 )

PDF (259KB) ( 221 )

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目的比较还原型谷胱甘肽（GSH）对KLE和HEC1b子宫内膜癌细胞生长的影响，并探讨其机制。方法①用GSH处理KLE和HEC1b子宫内膜癌细胞，噻唑蓝（MTT）法检测两型细胞的增殖水平；②用5 mmol/L GSH处理KLE和HEC1b子宫内膜癌细胞，流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平，酶标仪检测细胞内GSH和氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平，分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）活性。结果在不进行处理的情况下，KLE子宫内膜癌细胞较HEC1b子宫内膜癌细胞的ROS水平及CAT活性较低，GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GSHPx活性较高（P＜0.01）。用GSH处理后，KLE子宫内膜癌细胞生长加快，细胞内ROS和GSH水平及GSH/GSSG比值下降，SOD、CAT和GSHPx活性降低（P＜0.01）；HEC1b子宫内膜癌细胞生长被抑制，细胞内ROS、GSH及GSSG水平下降，GSH/GSSG比值明显升高，CAT和GSHPx活性降低（P＜0.01）。结论GSH对两种子宫内膜癌细胞生长有明显不同的影响，与两种细胞内ROS水平和抗氧化系统活性有密切的关系。

前列腺癌细胞LNCaP中雄激素依赖性和雄激素非依赖性蛋白差异性表达研究

2009, 47(9): 62-65.

摘要 ( 1571 )

PDF (472KB) ( 329 )

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目的评估LNCaP细胞中雄激素依赖性和雄激素非依赖性蛋白质组学特征，探讨前列腺癌的雄激素非依赖性生长的分子机制。方法雄激素敏感性LNCaP细胞在常规细胞培养基中持续培养。在雄激素递减环境中培养雄激素敏感的LNCaP细胞，且培养出了稳定传代的细胞，命名为LNCaPs细胞。检测两种不同的LNCaP细胞生长特性和对雄激素的反应，观察饥饿细胞的形态学变化。通过双相凝胶电泳（2DE）和基质辅助激光解析电离/飞行时间质谱测量法(MALDITOF MS)分析前列腺癌 LNCaP细胞的蛋白表达。结果在2DE LNCaP蛋白谱中，成功鉴定出了222种蛋白质。与LNCaP细胞相比，在LNCaPs细胞中发现150种蛋白表达差异有统计学意义，成功鉴定出75种蛋白质。LNCaP 蛋白谱中发现在LNCaPs 细胞中有26种蛋白表达上调或下调，且其蛋白受生长激素抑素（sms）以及其类似物（smsdx）的影响。鉴定出的蛋白参与多种生理过程，包括应激反应、细胞内信号转导和凋亡。在LNCaPs 细胞中，150种蛋白中7种蛋白表达上调，其余表达下调。蛋白质表达的定性分析显示，LNCaP细胞中有6种蛋白在LNCaPs细胞中无表达。与LNCaP细胞相比，LNCaPs细胞系中未发现新蛋白。结论LNCaP细胞中雄激素依赖性和雄激素非依赖性蛋弊质表达不同，且受sms及smsdx影响，可提供潜在的诊断和预后判断的标记物及药物治疗靶点并充实前列腺癌蛋白库，对基础和临床研究有重要意义。

益肾活血汤通过p38MAPK信号途径调控系膜细胞纤连蛋白及Ⅳ型胶原的研究

2009, 47(9): 66-69.

摘要 ( 1014 )

PDF (484KB) ( 396 )

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目的探讨中药方剂益肾活血汤通过p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号转导途径对肾小球系膜细胞纤连蛋白（FN）、Ⅳ型胶原（COL Ⅳ）表达的影响。方法采用血清药理学方法制备中药血清，体外培养肾小球系膜细胞分组为：对照组（正常鼠血清）、IL1β组（正常鼠血清+10%IL1β）、中药血清组（中药血清+10%IL1β）。采用双抗体夹心ELISA法检测大鼠系膜细胞FN、COL Ⅳ表达，蛋白印记法（Western blot）检测磷酸化p38MAPK（pp38MAPK）及α平滑肌肌动蛋白（αSMA）水平。结果与IL1β组相比，中药血清组FN、pp38MAPK蛋白的表达量降低（P＜0.01）。αSMA、COLⅣ的表达亦降低（P＜0.05）。结论中药益肾活血汤可降低肾小球系膜细胞αSMA的表达，从而抑制肾小球系膜细胞的表型转化，减少细胞外基质FN、COL Ⅳ的表达，该作用可能是通过抑制pp38MAPK信号通路而实现的。

犬心房组织血管紧张素转化酶和C反应蛋白水平与心房颤动关系的研究

2009, 47(9): 70-72.

摘要 ( 1111 )

PDF (403KB) ( 205 )

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目的探讨血管紧张素转化酶（ACE）和C反应蛋白（CRP）在慢性房颤犬心房组织中的表达及意义。方法随机将健康杂种犬16条分为正常对照组、单纯房颤起搏组各8只。房颤组植入埋藏式高频率心脏起搏器［（500±20）次/min］，起搏24周后处死动物，分别于左、右心房取材，采用免疫组织化学法，检测心房组织中血管紧张素转化酶（ACE）、C反应蛋白（CRP）以及血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）的表达变化。正常对照组未植入起搏器，与房颤组同步行相应检查。结果与对照组比较，房颤组心房组织中ACE和CRP表达水平显著增强，而ACEI的表达水平明显下降，各组间比较差异显著（P<0.01）。结论肾素血管紧张素（RAS）系统、炎症与房颤之间可能存在着一定的联系，阻断RAS系统有可能抑制房颤的发生、发展。

SPK/S1P信号途径对人肝癌细胞VEGFmRNA表达的作用

2009, 47(9): 73-75.

摘要 ( 1046 )

PDF (320KB) ( 181 )

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目的探讨鞘氨醇激酶/1磷酸鞘氨醇信号途径(SPK/S1P)在基因水平对人肝癌细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的调节作用。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,利用荧光定量PCR法检测鞘氨醇激酶的特异性抑制剂N,N′二甲基鞘氨醇(DMS）作用后肝癌细胞VEGFmRNA的表达。结果不同浓度DMS处理后的HepG2细胞中VEGF基因表达较对照组明显降低，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论DMS可通过阻断SPK/S1P信号途径在基因水平抑制肝癌细胞VEGFmRNA，说明人肝癌细胞VEGFmRNA表达受SPK/S1P信号途径调控。

靶向rPTTG的shRNA慢病毒载体构建及沉默效率评价

2009, 47(9): 76-80.

摘要 ( 1383 )

PDF (1246KB) ( 202 )

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目的构建并筛选能高效沉默大鼠垂体瘤转化基因（rPTTG）的shRNA慢病毒重组载体。方法设计并合成4组特异性针对大鼠PTTG基因的shRNA序列将其构建到慢病毒载体pGCLGFP中；评估慢病毒重组载体在大鼠肾细胞中的转染效率并运用real time PCR技术检测各组重组载体对目的基因的沉默效果。结果PCR及测序结果显示，目的片段插入正确，重组载体构建成功，慢病毒重组载体转染效率达70%以上；4组shRNA序列均有基因敲减效果，并且第4组shRNA(4# shRNA)序列效果最为明显（＞80%）。结论成功构建了高效沉默rPTTG基因的慢病毒载体；验证了慢病毒载体作为RNAi载体工具转染效率的可靠性；实验显示4# shRNA能高效抑制内源性rPTTG基因表达。

重组共表达载体pSNAV2.0 HSV1tkIREShIL1Ra的构建及其在滑膜细胞中的表达

2009, 47(9): 81-85.

摘要 ( 1210 )

PDF (895KB) ( 193 )

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目的引入内部核糖体进入位点（IRES），构建HSV1tk与hIL1Ra双基因共表达AAV重组载体并检测其在滑膜细胞中的表达。方法PCR扩增HSV1tk、IRES及hIL1Ra基因片段，分别与pMD18T simple载体连接，测序后，hIL1Ra与HSV1tk先后插入pMDIRES，构建重组质粒pMDHSV1tkIREShIL1Ra，酶切出HSV1tkIREShIL1Ra片段，克隆至AAV载体质粒pSNAV2.0上，构建成重组共表达质粒pSNAV2.0HSV1tkIREShIL1Ra，酶切鉴定后，用脂质体转染上述质粒至原代骨关节炎（OA）滑膜细胞，RTPCR法鉴定共表达质粒在滑膜细胞中的表达。结果酶切鉴定证实重组共表达质粒构建正确；RTPCR检测到转染后的OA滑膜细胞中表达HSV1tk与hIL1Ra。结论成功构建了重组共表达质粒pSNAV2.0HSV1tkIREShIL1Ra；重组质粒转染OA滑膜细胞后，能表达HSV1tk与hIL1Ra。这为OA的基因治疗研究提供了理论依据。

利用麻醉气体监护仪床旁测定吸入麻醉药血药浓度

2009, 47(9): 86-88.

摘要 ( 1160 )

PDF (283KB) ( 200 )

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目的利用麻醉气体监护仪代替气相色谱仪，结合二次平衡顶空法，建立一种床旁测定吸入麻醉药血药浓度的方法。方法首先制备安氟醚、异氟醚、七氟醚各六个浓度的标准气样，在麻醉气体分析仪的GAS SERVICE工作模式下，利用其输出端口，测量各个样本的电压峰值，得到气体浓度-电压回归方程；然后，利用与标准气样平衡的方法配置三种麻醉药的标准血样和麻醉气体监护仪，结合二次平衡法，测定血样品中吸入麻醉药回收率，每个浓度的样品均重复6次，观察此方法的精确度，即回收率的RSD。结果异氟醚、七氟醚的浓度-电压回归方程相关系数均达到0.999?9，只有安氟醚稍低，为0.999?8。分别配制与4%、2%、1%、0.5%、0.25%、0.125%气态安氟醚、异氟醚、七氟醚平衡的血液，计算其平均回收率（n=6）分别为96.53%、97.27%、97.74%。各样品六次之间回收率的RSD分别为1.63%、1.82%、1.24%。结论麻醉气体监护仪结合二次顶空法可以准确的测定血样中吸入麻醉药浓度，且不增加对血样中吸入麻醉药回收率测定的误差。

ABCD2评分法预测短暂性脑缺血发作患者脑梗死的风险

2009, 47(9): 89-92.

摘要 ( 1733 )

PDF (242KB) ( 171 )

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目的探讨采用ABCD2评分法预测短暂性脑缺血发作(TIA)进展为脑梗死的价值。方法按照Johnston等对TIA的ABCD2评分标准,测定148例TIA患者的评分，并观察其2、7、90?d内脑梗死的发生率。结果评分≤3分的TIA 患者有69例，2、7、90?d发生脑梗死的例数分别为3例（4.3%）、5例（7.2%）、6例（8.7%）；评分为4或5分的患者51例，2、7、90?d进展为脑梗死的例数分别为5例（9.8%）、8例（15.6%）和10例（17.6%）；评分≥6分的患者28例，2、7、90?d进展为脑梗死的例数分别为8例（28.6%）、10例（35.7%）、13例（46.5%）。不同ABCD2评分值的TIA患者，其脑梗死发生率差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论ABCD2评分值不同的TIA患者,脑梗死的发生率不同,分值越高,发生率越高。ABCD2评分标准是临床预测TIA短期进展为脑梗死的一种简便、有效的方法。

肿瘤坏死因子α在脊柱韧带细胞体外培养中的作用

2009, 47(9): 93-97.

摘要 ( 1234 )

PDF (446KB) ( 152 )

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目的检测肿瘤坏死因子α(TNFα)在后纵韧带骨化中的表达及对体外培养后纵韧带细胞生物学性状的影响。方法切取手术后纵韧带骨化患者和非后纵韧带骨化患者非骨化部位的脊柱韧带，进行体外培养建立8个后纵韧带骨化细胞系(OL1～OL8)和7个非后纵韧带骨化细胞系(NL1～NL7)。检测体外培养条件下各细胞系的形态学特征及成骨特性。采用免疫组织化学法检测TNFα在正常及退变后纵韧带组织中的表达；分析不同浓度的重组人TNFα（rhTNFα）对两类细胞系分化方向的作用。结果①只有4个OL细胞系表达成骨细胞表型，其余细胞系均表达成纤维细胞表型；②免疫组织化学染色显示，TNFα在退变及成熟的骨化区均有表达，在正常及软骨化后纵韧带组织中无表达；③rhTNFα对各细胞系的作用不同，它可增强各细胞系的碱性磷酸酶（ALP）活性、DNA及胶原合成，能诱导所有OL细胞系分泌骨钙素（OC），只有2个NL细胞系分泌较低水平OC。结论后纵韧带骨化患者脊柱韧带细胞体外培养可表达成骨细胞表型，TNFα在后纵韧带骨化发生中起着重要作用。

髓内针尾端滑囊滑膜软骨瘤的成因及防治措施

2009, 47(9): 98-100.

摘要 ( 1361 )

PDF (296KB) ( 209 )

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目的分析髓内针尾端滑囊滑膜软骨瘤的成因,探讨防治措施。方法对23例髓内针尾端滑囊滑膜软骨瘤进行病史回顾及病理和临床分析。结果23例中有15例发生于股骨干骨折非绞锁髓内钉尾端，5例发生于掌骨骨折克氏针尾端、2例发生跖骨骨折、1例发生于尺骨骨折克氏针尾端。23例均经病理证实为典型的滑膜软骨瘤，经手术切除全部治愈。结论髓内针尾端过长造成反复的机械刺激、髓内针留置时间过长、重金属毒性作用等是髓内针尾端滑膜软骨瘤的主要成因。预防措施是避免髓内针留置过久、针尾长度适当和尽量避免使用老式髓内钉。

氟化物拮抗软饮料对乳牙釉质侵蚀作用的研究

2009, 47(9): 101-104.

摘要 ( 1174 )

PDF (522KB) ( 203 )

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目的观察氟化物应用于乳牙釉质表面后保护牙釉质抵抗软饮料腐蚀的能力。方法采用拔除的滞留乳前牙，分为对照组(n=30)、饮料浸泡组(n=34)、NaF溶液组(n=30)、氟保护漆组(n=30)和双氟脱敏剂组(n=30)，经软饮料间断性浸泡后，应用显微硬度仪、X射线荧光光谱分析仪及扫描电镜，观测乳牙釉质表面显微硬度(surface microhardness, SMH)、Ca2+含量及表面形态的变化。结果软饮料浸泡可致乳牙釉质SMH、Ca2+含量明显降低；用NaF溶液、氟保护漆和双氟脱敏剂处理后的釉质SMH、Ca2+含量降低的程度低于饮料浸泡组(P<0.001)；氟保护漆和双氟脱敏剂的作用无统计学差异(P>0.05)，但优于NaF溶液(0.01＜P＜0.05)；扫描电镜下可见釉质表面有不同程度的溶解。结论软饮料对乳牙釉质表面有较强的酸蚀脱矿作用；釉质表面应用氟化物可增强乳牙釉质抵抗软饮料腐蚀的能力。

半导体激光联合中频治疗慢性肥厚性咽炎50例疗效观察

2009, 47(9): 105-106.

摘要 ( 1144 )

PDF (233KB) ( 141 )

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目的探讨半导体激光联合中频治疗慢性肥厚性咽炎的疗效。方法150例慢性肥厚性咽炎患者随机分为激光+中频组、激光组、对照组，每组50例，观察疗效。结果激光+中频组患者治疗前、后各项症状评分比较，差异有统计学意义（P均<0.01），起效时间为2周，4～8周疗效最佳。激光组与对照组患者治疗前、后各项症状评分比较，差异无统计学意义（P均>0.05），激光+中频组疗效明显高于激光组和对照组。结论半导体激光联合中频治疗慢性肥厚性咽炎疗效显著。

正常T细胞表达和分泌的活性调节蛋白在口腔扁平苔藓中的表达

2009, 47(9): 107-110.

摘要 ( 1155 )

PDF (532KB) ( 91 )

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目的检测正常T细胞表达和分泌的活性调节蛋白(RANTES)和其受体CCR3以及RANTES mRNA在口腔扁平苔藓病损中的表达情况，探讨其在口腔扁平苔藓发生发展过程中的作用及意义。方法应用免疫组织化学、原位杂交及计算机图像处理技术检测30例口腔扁平苔藓粘膜组织和10例正常口腔粘膜组织中RANTES、CCR3及RANTES mRNA的表达。结果口腔扁平苔藓粘膜组RANTES、CCR3及RANTES mRNA的表达均高于正常口腔粘膜组织，且差异有统计学意义(P＜0.05)。结论与正常口腔粘膜组织相比，口腔扁平苔藓组中RANTES、CCR3及RANTES mRNA的表达增多且分布存在差异，提示在口腔扁平苔藓的发生发展过程中RANTES发挥一定作用。

CT脑池造影术在小儿蛛网膜囊肿的分型诊断及治疗中的应用

2009, 47(9): 111-113.

摘要 ( 1249 )

PDF (362KB) ( 153 )

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目的探讨CT脑池造影术（CT cisternography，CTC)在小儿蛛网膜囊肿（intracranial arachnoid cyst， IAC)的分型诊断及治疗中的应用价值。方法对19例小儿蛛网膜囊肿患者行CT脑池造影术以确定其是否为交通性。将有明显临床症状和虽无明显症状但CT显示囊肿周围脑叶严重发育不全的非交通性蛛网膜囊肿作为手术指征。术后再次进行CT脑池造影术以评价手术后的治疗效果。结果19例患儿中有6例为交通性蛛网膜囊肿、13例为非交通性蛛网膜囊肿。手术后全部患儿的囊肿均与周围脑池沟通良好，临床症状均有不同程度的改善。结论CTC是小儿蛛网膜囊肿的简单、可靠的诊断方法，可用于判断囊肿的类型，其检查结果可协助筛选适合手术治疗的患者，术后CTC可提供囊肿的动力学变化信息并用于手术效果的初步评价，缺点是它的有创性。

TRAIL基因启动子区单核苷酸多态性与脂肪肝的相关性

2009, 47(9): 114-118.

摘要 ( 1078 )

PDF (948KB) ( 106 )

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目的探讨中国山东汉族人群肿瘤坏死因子凋亡相关诱导配体（Tumor necrosis factor(TNF)related apoptosis inducing ligand， TRAIL）基因启动子区单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)与脂肪肝（FLD）的相关性。方法采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCRRFLP）分析和四引物法聚合酶链反应（Tetraprimer ARMSPCR）的方法检测了42例非酒精性脂肪肝、67例酒精性脂肪肝和132例健康对照者的TRAIL基因启动子区单核苷酸多态性位点-707C/T、-665T/C、-621C/T和-597A/G的基因型，计算相应的基因型频率及等位基因频率，进行χ2检验。结果-707C/T、-665T/C和-597A/G位点在中国山东汉族人群中未检测到单核苷酸多态性；-621C/T位点在中国山东汉族人群中存在单核苷酸多态性，且该位点CC/CT/TT基因型频率在非酒精性脂肪肝、酒精性脂肪肝以及正常对照组中分别为0.238/0.500/0.262、0.269/0.448/0.284和0.280/0.394/0.326。但该位点的基因型频率和等位基因频率在三组之间均没有统计学差异。结论在中国山东汉族人群中，仅检测到TRAIL基因启动子区-621C/T位点的单核苷酸多态性，该多态性与脂肪肝的易感性没有统计学差异(P＞0.05)。

内镜模拟训练在结肠镜教学中的作用

2009, 47(9): 119-121.

摘要 ( 1213 )

PDF (264KB) ( 202 )

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目的探讨内镜模拟训练在结肠镜教学中的作用。方法2006年1月～2008年1月首都医科大学附属北京友谊医院、北京市消化疾病中心内镜中心轮转的无结肠镜操作经验的进修医师、研究生、住院医师37名，随机分为两组，非内镜模拟训练组于内镜中心观摩学习1个月后开始操作内镜，内镜模拟训练组于观摩学习的同时接受10?h的内镜模拟训练；由专人对所有受训者最初20例结肠镜操作进行评价、记录，包括插镜至回盲部成功率、总的操作时间，两组间分别进行比较。结果内镜模拟训练组插镜至回盲部成功率（214/380）与非内镜模拟训练组（141/360）之间差异有统计学意义；内镜模拟训练组总操作时间（8.51±2.82）min与非内镜模拟训练组（10.15±3.22）min差异存在统计学意义(P<0.05)。结论内镜模拟训练在结肠镜教学中有重要作用，有助于受训者迅速掌握结肠镜操作方法，缩短教学时间。

微创血肿清除术对脑出血患者血清胶质纤维酸性蛋白的影响

2009, 47(9): 122-124.

摘要 ( 1147 )

PDF (270KB) ( 232 )

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目的探讨微创血肿清除术对脑出血患者血清胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的影响。方法采用酶联免疫吸附法测定脑出血微创术患者74例、脑出血非手术患者80例发病后1（手术组术前）、3、7、14?d血清胶质纤维酸性蛋白含量,取60名健康查体者作为正常对照组，分析微创术对脑出血患者GFAP水平动态变化的影响。结果脑出血患者发病后各时间点血浆GFAP水平显著高于正常对照组(P均＜0.001), 手术组在第7、14天显著低于非手术组但仍明显高于对照组(P均＜0.001)；两组脑出血患者第1、3、7、14天血清GFAP含量均与当天神经功能缺损评分（NDS）成正相关。结论微创术后血清GFAP 含量显著降低,可作为评价高血压性脑出血微创术治疗效果的生物学指标。

肺炎支原体下呼吸道感染的临床特征分析

2009, 47(9): 125-128.

摘要 ( 1259 )

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目的分析住院儿童社区获得性下呼吸道感染肺炎支原体(MP) 的流行特点，提高对小儿MP肺炎的诊疗水平。方法回顾性分析2007年1 月至2008 年12 月876 例社区获得性下呼吸道感染(CALRTI )住院儿童的临床资料。采用被动颗粒凝集法检测患者急性期血清MPIgM, 滴度≥1:80为血清学诊断标准。结果876例患儿,急性MP感染177例 (20.2%), 6个月～14岁，平均5.1岁。3岁以上儿童占79.7%，有88/119例MPIgM滴度≥1:320；3岁以下有25/58例，差异显著（χ2=16.1, P<0.005）。持续性咳嗽、发热是支原体下呼吸道感染的主要特征，但婴幼儿多见中度发热、喘憋多、肺部体征明显；胸部X线以支气管肺炎或间质性肺炎改变为主，大叶性肺炎改变很少；肺外并发症少。儿童期多见高热、干咳为主,咳嗽顽固剧烈,肺部体征少,胸片以大叶性改变为主,合并胸腔积液多，肺外并发症多。结论肺炎支原体是CALRTI住院儿童重要的致病原, 多见于3岁以上儿童。MP感染率随年龄增高而升高，春、秋、冬季为感染发病高峰季节。婴幼儿与儿童MP感染的临床表现差异较大。

肝细胞癌微血管和成熟血管的特征及其相互关系

2009, 47(9): 129-133.

摘要 ( 1012 )

PDF (450KB) ( 100 )

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目的探讨肝细胞癌(HCC)微血管和成熟血管的特征及其关系。方法选取行手术切除并经病理证实的HCC 31例，检测VEGF、Flk1、PCNA的表达情况，同时对微血管和成熟血管的数目、平均面积、总面积、周长、直径、异型指数、血管间距、表达部位，以及动脉数、静脉数、动脉比、静脉比、血管成熟指数和平均灌注分数等进行统计。HE染色计算细胞外间隙及细胞外血管外间隙。分析微血管和成熟血管特征差异及其相互关系。结果HCC微血管的数目、总面积、异型指数均大于成熟血管，而平均面积、直径和血管间距则相反(P＜0.05)。在VEGF阴、阳性表达组之间，微血管的数目、周长及细胞外间隙均存在统计学差异(P＜0.05)，但各成熟血管参数未见统计学差异(P＞0.05)。在Flk1阳性和阴性表达组，微血管的数目、异型指数、周长以及动脉数也存在统计学差异(P＜0.05)。另外，PCNA与微血管异型指数呈正相关(P=0.045, r=0.563)，与微血管间距负相关(P=0.022, r=-0.627)。其余测量参数之间差异未见统计学意义(P＞0.05)。结论HCC微血管和成熟血管特征存在较大差别，VEGF及Flk1主要参与微血管生成的调控，对成熟血管作用不大。

系统的产前教育和适度产前检查对妊娠结局的影响

2009, 47(9): 134-136.

摘要 ( 1039 )

PDF (286KB) ( 119 )

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目的了解孕妇系统的孕前产前教育和适度产前检查对孕产妇知识结构及妊娠结局的影响。方法226例行系统产前教育和适度产前检查的孕妇作为干预组,无系统产前教育及不定期产前检查的208例作为对照组,对比分析两组孕妇对孕期保健知识、分娩知识、新生儿护理等内容的认知情况及其妊娠结局。结果干预组与对照组在孕期营养、剖宫产的利弊、经阴道分娩正确配合、新生儿护理及产褥期保健认知水平方面差异有统计学意义(P＜0.05)；对照组剖宫产率及母婴患病率高于干预组(P＜0.05)。结论系统的产前宣教和适度的产前检查可提高孕妇保健知识水平、改善妊娠结局，降低母婴患病率。

济南铁路工人高血压前期的发生率及影响因素研究

2009, 47(9): 137-140.

摘要 ( 1088 )

PDF (238KB) ( 167 )

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目的分析济南铁路工人高血压前期发生率及其影响因素。方法整群抽取济南铁路局在职铁路工人的体检数据12?094份，采用单因素和多元Logistic回归进行统计分析。结果济南铁路工人的高血压前期发生率为47.2%，不同年龄、不同性别的高血压前期发生率差异均具有统计学意义；单因素分析显示，吸烟、饮酒、空腹血糖（FPG）、高甘油三脂（TG）和高体重指数（BMI）是高血压前期的危险因素；多元Logistic回归分析显示，性别、年龄、吸烟、饮酒、FPG异常、高TG和高BMI是高血压前期的危险因素。结论铁路工人高血压前期发生率处于较高水平，需重视铁路工人的高血压防治工作。

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