山东大学学报 (医学版)

Graves病患者外周血FOXP3、GITR及CD25基因的表达

王宏伟张莹陈福琴

2009, 47(12): 1-5.

摘要 ( 1248 )

PDF (310KB) ( 329 )

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目的研究Graves病（GD）不同阶段患者外周血叉状头/翅膀状螺旋转录因子（FOXP3）、糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体（GITR）及IL2受体α链（CD25）基因的表达变化，探讨其在GD发病机制中的作用。方法收集GD患者90例，按病情分为GD初诊组30例(男13例，女17例)；GD缓解组30例(男10例，女20例)；GD复发组30例(男11例，女19例)。健康查体者30例（男14例，女16例）作为健康对照组。应用实时荧光定量PCR法检测各组外周血单个核细胞中FOXP3、GITR及CD25 mRNA含量，同时利用电化学发光的方法测定各组血清甲状腺激素水平及甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）的水平。结果GD各组患者外周血FOXP3 mRNA表达均较健康对照组显著降低（P＜0.05），GD缓解组FOXP3 mRNA水平较GD初诊组显著升高（P＜0.05），复发组FOXP3 mRNA水平虽低于缓解组（P＜0.05），但明显高于GD初诊组（P＜0.05）； GD各组女性患者FOXP3 mRNA表达水平显著高于男性患者（P＜0.05）；Graves初诊及复发组GITR mRNA、CD25mRNA表达水平显著高于对照组（P＜0.05）。结论FOXP3、GITR及CD35可能参与了Graves的发生、发展及复发过程。

2型糖尿病合并冠心病患者血清内脂素水平的测定及影响因素

唱丽荣周桂霞毕锡娟

2009, 47(12): 6-8.

摘要 ( 1189 )

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目的探讨血清内脂素(visfatin)在2型糖尿病（T2DM）及其合并冠心病（CHD）患者中的表达情况及其影响因素。方法用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测单纯T2DM组(n=30)、T2DM合并CHD组(n=34)及正常对照组(n=30)的血清内脂素水平和胰岛素(FINS)含量，用日立全自动生化分析仪测定空腹血糖（FPG）、血脂,计算所有观察对象的体质量指数（BMI）、腰臀比(WHR)。结果单纯T2DM组、T2DM合并CHD组内脂素水平均高于正常对照组(P<0.01)，T2DM合并CHD组显著高于单纯T2DM组(P<0.01)；内脂素水平与胰岛素抵抗指数（HomaIR）、WHR具有显著相关性(P<0.01)。冠脉病变支数与内脂素表达呈显著正相关(P<0.01)。结论T2DM合并CHD患者血清内脂素表达与HomaIR、WHR及冠脉病变支数存在密切的相关性,在T2 DM及合并CHD的发生发展中起着重要作用。

糖尿病与冠心病患者心率恢复异常及其对冠心病的诊断价值

张玉红李贵双李海德

2009, 47(12): 9-12.

摘要 ( 1229 )

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目的探讨冠心病、糖尿病患者对平板运动试验后心率恢复的影响以及心率恢复异常对无症状的糖尿病患者合并冠心病的诊断价值。方法对88例拟诊冠心病患者行平板运动试验，以糖尿病史及血糖水平分为非糖尿病组（n=45）、糖尿病组(n=43)。根据冠脉造影结果，非糖尿病组分为非冠心病组（A组,n=22）和冠心病组（B组,n=23），糖尿病组分为非冠心病组（C组,n=22）和冠心病组（D组,n=21）。计算运动后1、2、3、4和5?min心率恢复值并进行比较。研究心率恢复异常对非糖尿病和糖尿病患者合并冠心病的诊断价值。结果平板运动后1、2、3、4和5?min心率恢复值由大到小依次为A、C、B和D组。与非糖尿病组相比，心率恢复异常诊断糖尿病所合并冠心病的灵敏性高，特异性和准确性无差别。结论冠心病对心率恢复的影响大于糖尿病，心率恢复异常可以作为筛选糖尿病患者是否合并冠心病的指标之一。

中老年糖尿病患者无创心脏血流动力学的临床研究

于飞李保应石珊珊王茜张志勉高海青

2009, 47(12): 13-16.

摘要 ( 1539 )

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目的研究中老年糖尿病患者心脏血流动力学的特点，探讨利用无创血流动力学监护系统早期发现糖尿病心脏病变的敏感指标。方法将218例研究对象分为正常对照组（n=130）、糖尿病前期组(n=23)和糖尿病组(n=65)，测定体质量指数（BMI）、腰臀比（WHR）、空腹血糖（FPG）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、脉压（PP）、平均动脉压（MAP）等指标。应用LIFEGARD II型无创血流动力学监护系统测定心输出量（CO）、心脏指数（CI）、体循环血管阻力（SVR）、体循环血管阻力指数（SVRI）、每搏输出量（SV）、每搏指数（SI）、胸腔液体量（TFC）、加速度指数（ACI）、左心做功指数（LCWI）、射血前期（PEP）、左室射血时间(LVET)、速度指数（VI）、收缩时间比率（STR）、心率（HR）。结果①与正常对照组相比，糖尿病组WHR、FPG、TC、SBP、PP、PEP和STR升高（P＜0.05或P＜0.01）；ACI、VI降低（P＜0.01）；②与正常对照组相比，糖尿病前期组FPG升高（P＜0.01）；ACI、 VI降低（P＜0.05）；③相关分析：ACI与BMI、WHR、FPG、SBP、DBP、MAP和HR呈负相关（P＜0.01）；PEP与BMI呈正相关（P＜0.01）；VI与BMI、WHR、FPG、SBP、DBP、MAP和HR呈负相关（P＜0.01）；STR与BMI和WHR呈正相关（P＜0.05或P＜0.01）。结论中老年糖尿病患者、糖尿病前期患者存在不同程度的心脏血流动力学异常，BMI是引起上述指标改变的共同危险因素；ACI和VI可作为评价糖尿病心脏血流动力学异常的无创性敏感性指标。

HPV58 E2 DNA疫苗的构建及免疫原性研究

张晓丽李潇王鑫郑琳赵蔚明齐眉

2009, 47(12): 17-20.

摘要 ( 1183 )

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目的探讨人乳头瘤病毒58型（HPV58）早期基因E2作为DNA疫苗候选抗原的可行性。方法构建HPV58 E2真核重组表达载体pcDNA3/58E2，转染SiHa细胞，利用RTPCR检测HPV58E2 mRNA的转录。pcDNA3/58E2 DNA肌肉注射免疫BALB/C小鼠，ELISA检测小鼠血清中特异性antiHPV58E2 IgG水平。结果RTPCR结果表明，pcDNA3/58E2能够在真核细胞中有效转录HPV58E2mRNA。动物实验表明，质粒pcDNA3/58E2肌肉接种可诱导免疫小鼠产生抗E2特异性抗体。结论本研究成功构建了重组真核表达载体pcDNA3/58E2，并初步证明HPV58 E2 DNA 疫苗有良好的免疫原性。

GM1对人胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞的作用

高选1，2，颜军昊2，宦晴2，黄色新2，徐凯2，陈子江2，王磊1

2009, 47(12): 21-24.

摘要 ( 1421 )

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目的方法将人胚胎干细胞（SDUhESm1)悬浮培养形成拟胚体（EB），EB再贴壁培养诱导分化神经细胞，分别于悬浮培养EB阶段和EB贴壁培养阶段的神经分化培养基中加入浓度为0、0.5、 5、50?μg/mL 的GM1,观察EB的形成,计数神经标记性抗原Nestin和βTubulin阳性细胞百分率。结果含GM1的神经分化培养基诱导生成"透亮EB"，分化出Nestin和βTubulin阳性细胞明显多于不含GM1培养基诱导出的神经细胞数量，不含GM1形成的EB发黑；在悬浮培养形成EB开始加GM1比EB贴壁培养开始加GM1产生Nestin和βTubulin阳性细胞数目更多，但2个加GM1阶段产生的神经细胞百分率均随GM1浓度增加而增大。结论首次发现GM1可以诱导hESC定向分化神经细胞，定向产生神经前体细胞（Nestin阳性），在hESC定向分化神经细胞的过程中，悬浮培养EB阶段加入GM1更有利于hESC的定向分化。

卡托普利和氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞Bcl2和Fas基因表达的抑制作用

李劲迈，朱清，岳欣，贺红

2009, 47(12): 25-28.

摘要 ( 1277 )

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目的研究卡托普利（CP）和氯沙坦（LT）及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对Wistar大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡相关基因表达的影响。方法采用流式细胞技术检测CP、LT及CP与LT联合应用对在AngⅡ不同浓度、不同作用时间下体外培养的大鼠主动脉VSMC凋亡相关基因Bcl2及Fas的表达量。结果随着AngⅡ作用浓度的增加和作用时间的延长， Bcl2基因表达量增加且呈浓度和作用时间依赖(P<0.01)；AngⅡ可使Fas 的表达量增加(P<0.05)，但无明显时间和浓度依赖性；一定浓度的CP（5×10-6mol/L）和LT（5×10-6mol/L）可抑制AngⅡ对2个基因表达的影响。(P均<0.05或P均<0.01)。结论CP和LT可以通过拮抗VSMC凋亡基因Bcl2和Fas的表达促进异常增殖的VSMC凋亡，且这一作用与作用浓度和作用时间相关。

梗阻性肾病肾纤维化与血清中Ⅲ型胶原变化的相关性研究

张亮1，刘玉强1，李远2，殷钢1，孟凡伟3，柳豪4，王传运5

2009, 47(12): 29-32.

摘要 ( 1210 )

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目的探讨梗阻性肾病时血清中Ⅲ型前胶原（PCⅢ）及Ⅲ型前胶原氨基末端肽（PⅢNP）浓度的变化与肾组织纤维化的相关性。方法将健康雄性新西兰大白兔40只通过手术分为单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组、假手术组、正常对照组，每组10只。术前及术后1～8周抽取大白兔静脉血，放射免疫法测定血清中PCⅢ及PⅢNP含量。术后第8周提取动物肾脏组织，免疫组化SP法染色测定Ⅲ型胶原含量，HE染色测定肾小管肾间质纤维化程度。结果①术后1～8周PCⅢ及PⅢNP值较术前升高（P＜0.05）。单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组PCⅢ及PⅢNP值较同期对照组、假手术组值升高（P＜0.05）;②单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组肾小管肾间质病变比率较对照组差异有统计学意义（P＜0.05）;③血清PCⅢ及PⅢNP浓度与病变肾小管肾间质比率呈正相关（P＜0.05）。结论血清PCⅢ及PⅢNP与肾积水时肾脏间质纤维化密切相关。在排除其他脏器纤维化的前提下，血清PCⅢ及PⅢNP可以作为早期判断肾积水肾脏纤维化的无创性检查指标。

他罗利姆对癫痫持续状态大鼠海马的影响及脑保护作用

刘金之1，李丽莉2，王爱华1，郝爱军2，黄燕飞1，薛萍1

2009, 47(12): 33-37.

摘要 ( 1094 )

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目的研究免疫抑制剂他罗利姆（FK506）对癫痫持续状态（SE）大鼠海马组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的影响及其脑保护作用。方法随机将162只Wistar大鼠分为癫痫组、FK506干预组、对照组各54只。采用匹鲁卡品腹腔注射制作SE模型，FK506干预组在注射匹鲁卡品之前24、1?h 2次腹腔注射FK506，对照组注射等体积生理盐水；采用比色法和羟胺法分别检测海马组织中NO、MDA含量、NOS、SOD活性；采用免疫组化法检测海马组织神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的表达；采用HE染色观察神经元形态变化。结果与癫痫组相比，FK506干预组NO、MDA含量、NOS活性明显降低（P均＜0.01），SOD活性在癫痫发作后12?h以内降低（P＜0.05）,在3?d之后升高（P＜0.01）；海马nNOS的表达降低（P＜0.01），存活神经元增加。结论FK506可能通过抑制NOS/NO途径发挥抗癫痫和脑保护作用。

尿毒清对阿霉素肾病大鼠致纤维化因子表达的影响

王娜，亓敏，梁素忍，冯进波，彭涛，裴斐，胡昭

2009, 47(12): 38-41.

摘要 ( 1237 )

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目的观察尿毒清对阿霉素（ADR）肾病大鼠肾脏转化生长因子β1（TGFβ1）、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP1)、纤溶酶原激活物抑制物1 (PAI1)和骨调素(OPN)mRNA 表达的影响,探讨尿毒清治疗慢性肾脏疾病的机制。方法成年雄性SD大鼠24只，采用单侧肾切除加重复尾静脉注射ADR的方法制作ADR肾病模型，随机分为正常组（N组）、模型组（M组）、尿毒清组（Ni组）、贝那普利组（B组）4组，每组6只。用药第4、8周后观察各组大鼠24?h尿蛋白定量、血脂、血浆总蛋白（TP）、血浆白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）的水平，实时荧光定量PCR测定第8周肾组织中TGFβ1、TIMP1、PAI1及OPN mRNA的表达。结果尿毒清和贝那普利均能减少ADR肾病大鼠尿蛋白，降低BUN、Scr，升高血浆蛋白，纠正脂代谢紊乱，减少TGFβ1、TIMP1、PAI1及OPN mRNA的表达，与M组相比有显著差异（P＜0.01）；而Ni组PAI1 mRNA水平较B组显著降低（P＜0.01）。结论尿毒清可下调ADR肾病大鼠肾脏组织TGFβ1、TIMP1 、PAI1及OPN mRNA的合成，可能是其治疗慢性肾脏疾病的重要机制之一。

SIRT1在NAD保护神经轴突作用中的表达变化

綦晓霞，李振华，张静，房?，卢静，杨淑华，孙晋浩

2009, 47(12): 42-45.

摘要 ( 1222 )

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目的探讨沉默信号调控因子（SIRT1)在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）保护神经轴突中的作用。方法应用长春新碱毁损法制备背根神经节轴突变性细胞模型，应用透射电镜、RTPCR、Western blot方法，观察正常背根神经节培养组、长春新碱毁损组、NAD保护组神经轴突的生长变化、超微结构变化和SIRT1 mRNA及SIRT1蛋白的表达变化。结果NAD保护组毁损8?h后轴突远端始发生轻微肿胀，断离。透射电镜结果显示，长春新碱毁损组轴突肿胀，大量髓样小体出现，微丝微管排列紊乱，聚集，溶解，被絮状沉淀物和膜性结构所代替。NAD保护组可见较多平行排列的微丝微管，轴突肿胀较轻。RTPCR结果显示，NAD保护组的SIRT1基因表达较毁损组上调。Western blot结果显示，损伤组可见其蛋白表达量明显降低，NAD保护组中SIRT1蛋白表达较毁损组上调。结论SIRT1参与NAD对轴突变性的保护作用。

JNK1/2通路蛋白及凋亡基因Caspase3在高温致神经管畸形作用中的表达

刘雯1,马金龙1,高彦丽1,林万润1,郭成浩2

2009, 47(12): 46-49.

摘要 ( 1608 )

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目的探讨高温致畸 MAPKs中JNK1/2通路蛋白及凋亡基因Caspase3的表达作用及其机理。方法孕鼠于受精第8天置42?℃水浴,持续20?min后，分别于2、8、16、24、48、72?h经麻醉处死剖腹取胎，并分为高温组（2～72?h，42?℃）和对照组（2～72?h，37?℃）。采用Western blot技术检测JNK1/2、PJNK1/2及Caspase3的表达量。结果高温组JNK1/2的表达量与对照组无明显差异，各组内不同时间的表达量无明显变化；PJNK1/2在对照组中不表达，高温组8～48?h时的表达量均高于相应的对照组(P＜0.05)，于16?h时表达增加最为显著；Caspase3在对照组中无表达，在高温组8～48?h时表达增加(P＜0.05)，于8?h时增加最为显著。结论高温刺激能促使JNK1/2发生磷酸化和凋亡基因Caspase3的活化，这可能是高温致胚胎先天性畸形的原因之一。

低频超声辅助尿激酶溶栓对大鼠脑梗死基质金属蛋白酶9的影响

宋玉强1，2，毕建忠1

2009, 47(12): 50-53.

摘要 ( 1151 )

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目的观察低频超声辅助尿激酶静脉溶栓治疗大鼠急性脑梗塞后基质金属蛋白酶9(MMP9)的变化，探讨其在低频超声助溶脑缺血再灌注损伤及出血性转化中的作用。方法应用血栓栓塞法制备Wistar大鼠脑梗塞模型，分别给予尿激酶、低频超声照射，采用NSS评价治疗前后神经功能，采用红四氮唑染色法测定脑梗塞体积，采用免疫组化法监测MMP9 的表达。结果梗塞组用药前后NSS评分差异不明显（t=0.85,P>0.05）；尿激酶组、低频超声加尿激酶组给药后24?h NSS评分明显低于溶栓前（t=12.59, t=15.31,　P均<0.01）。3组梗塞灶体积有显著性差异（F=125.99, P<0.01），尿激酶组、低频超声加尿激酶组梗塞灶体积显著小于梗塞组（q=18.02,P<0.01；q=20.62,P<0.01），两组之间差异不显著（q=2.59，P>0.05）。尿激酶组和低频超声加尿激酶组MMP9表达阳性率及光密度值均显著高于梗塞组（F=78.92, F=209.14,P<0.01），两组之间差异不明显（q=2.86,2.47,P>0.05）。结论尿激酶在脑梗死超早期有显著溶栓作用，低频超声波具有显著的协助尿激酶溶栓作用，可以减少尿激酶用量，MMP9可能在脑梗塞后溶栓的出血转化中起着重要作用。

外源性激活素A对高胆红素血症新生大鼠脑细胞凋亡的保护作用

李瑞英1，安丽1，赵东1，王平2

2009, 47(12): 54-57.

摘要 ( 1349 )

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目的探讨外源性激活素A（ACT A）对高胆红素血症（简称高胆）新生大鼠脑细胞凋亡的保护作用。方法将96只新生7日龄Wistar大鼠随机分为正常对照组、高胆对照组、ACT A治疗Ⅰ、Ⅱ组，每组24只。采用腹腔注射胆红素溶液的方法建立高胆标准动物模型，ACT A治疗Ⅰ、Ⅱ组于造模后分别给予高（0.025?mg/L）、低（0.001?mg/L）剂量ACT A灌胃。采用重氮反应法检测各组血清和脑组织中胆红素含量，电镜下观察脑组织超微结构，采用流式细胞仪进行脑组织细胞凋亡分析。结果治疗Ⅰ、Ⅱ组神经行为异常较高胆对照组明显减轻；高胆对照组、治疗Ⅰ、Ⅱ组血清、脑组织胆红素含量均高于正常对照组（P均＜0. 01）；治疗Ⅰ、Ⅱ组血清、脑组织胆红素含量均低于高胆对照组（P均＜0.05）；治疗I组血清、脑组织胆红素含量均低于治疗Ⅱ组（P均＜0.01）。镜下观察可见，高胆对照组神经元损伤明显，各治疗组均有不同程度的修复；流式细胞术结果表明，在造模后12?h,高胆对照组、治疗Ⅰ、Ⅱ组脑组织凋亡细胞数均值高于正常对照组（P均＜0.001），治疗Ⅰ、Ⅱ组脑组织凋亡细胞数均值低于高胆对照组（P均＜0.05），治疗Ⅰ组脑组织凋亡细胞数低于治疗Ⅱ组（P＜0.001）。结论外源性ACT A可明显减少高胆模型鼠体内胆红素的蓄积，有效抑制高胆模型鼠脑细胞凋亡，对高胆所致脑损伤具有保护作用。

他莫昔芬对人肝癌HepG2细胞增殖和Smad7表达的影响

范宜锋1,王文奇2，白文坤2,时昌文3

2009, 47(12): 58-60.

摘要 ( 1054 )

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目的研究他莫昔芬（TAM）对人肝癌HepG2细胞增殖的影响，探讨其作用机制。方法将他莫昔芬配制为0、7.5、l5、30?μmol／L，与人肝癌HepG2细胞培养24、48、72?h，用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定人肝癌HepG2细胞的抑制率；免疫组化染色观察人肝癌HepG2细胞Smad7蛋白的阳性表达。结果人肝癌HepG2细胞增殖随他莫昔芬浓度增加和处理时间的延长，细胞抑制率明显增加,细胞浆内Smad7蛋白阳性表达率明显降低，与时间和浓度呈负相关。结论他莫昔芬可抑制肝癌细胞增殖，可能与下调Smad7蛋白的表达有关。

人HMGB1真核表达载体的构建及其在单核细胞的表达

徐洁1，崔彬2，焦玉莲2，游力2，张捷2，刘晓雯2，曲芸芸2，朱敏2，孙新平2，赵跃然1,2

2009, 47(12): 61-65.

摘要 ( 1418 )

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目的构建人高迁移率族蛋白1（HMGB1）表达载体，并探讨其免疫调节作用。方法从HMGB1克隆载体酶切分离HMGB1基因片段，插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITEEGFP，菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体。重组表达质粒转染人单核细胞系（U937），梯度G418筛选，荧光和Western blot检测HMGB1的表达。结果菌落PCR和酶谱分析显示目的基因被正确插入真核表达载体，获得重组质粒pCITEEGFPHMGB1，转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强，转染细胞中目的蛋白HMGB1表达量明显升高。结论成功构建重组载体pCITEEGFPHMGB1，并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系，为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础。

S腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因沉默抑制乳腺癌MCF7细胞生长的研究

辛佳璇1，陈世敏1,2，王伟1，阎云飞1，徐春晓1，刘斌1，刘贤锡1

2009, 47(12): 66-69.

摘要 ( 1488 )

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目的探讨S腺苷甲硫氨酸脱羧酶（SAMDC）基因沉默对乳腺癌MCF7细胞增殖及侵袭能力的抑制作用。方法用特异性沉默SAMDC基因表达的RNA干扰真核表达载体SAMDC shRNA表达载体(pGPU6SAMDC)转染乳腺癌MCF7细胞，采用RTPCR和Westernblot技术分别检测SAMDC mRNA和蛋白质表达水平；细胞增殖实验（CCK8法）和细胞周期分析评价SAMDC基因沉默对乳腺癌MCF7细胞增殖的影响，肿瘤侵袭实验观察SAMDC基因沉默对乳腺癌细胞MCF7侵袭活性的影响。结果SAMDC shRNA表达载体转染后，MCF7细胞SAMDC mRNA水平下调43.8％，蛋白表达水平下降66.5％；MCF7细胞的增殖活性和侵袭能力均受到明显抑制，细胞增殖活性下降37%，细胞周期分析G1期细胞增加。结论SAMDC基因沉默可通过延长细胞周期的G1期而抑制乳腺癌MCF7细胞的增殖,并能降低癌细胞侵袭活性，提示SAMDC可作为乳腺癌基因治疗的靶分子。

改良Hemistraw与Cryoleaf法对人卵和胚胎玻璃化保存效果的比较

王利红，连方，张宁

2009, 47(12): 70-73.

摘要 ( 1199 )

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目的比较改良的Hemistraw与Cryoleaf法对人卵子和胚胎的玻璃化保存效果。方法将接受体外受精-胚胎移植周期中剩余的98枚未受精卵和76枚废弃胚胎，分别采用Cryoleaf(A组)与改良的Hemistraw（B组）为载体进行玻璃化冷冻，复苏后观察并计算两种玻璃化载体的卵子存活率，24?h继续存活率与卵裂率；胚胎存活率，24?h继续存活率及囊胚形成率。结果Cryoleaf与改良的Hemistraw法保存人未受精卵分别为43、55枚，复苏存活分别为29（67.4%）、31（56.4%）枚，24?h继续存活分别为23（53.5%）、25（45.5%）枚，卵裂分别为3（7.0%）、1（1.8%）枚，两种载体差异不明显（P＞0.05）。Cryoleaf与改良的Hemistraw法保存废弃胚胎分别为39、37枚，复苏存活分别为29（74.4%）、33（89.2%）枚，24?h继续存活分别为28（71.8%）、33（89.2%）枚，形成囊胚分别为5（12.8%）、1（2.7%）枚，两种载体差异不明显（P＞0.05）。结

肾移植术后新生HLA抗体和MICA抗体对移植肾功能的损伤作用

彭志国1，田军1，扈煜2，张鲁伟1，崔先泉1,毕正3,鲜万华1，孙怀斌1，李恩刚1

2009, 47(12): 74-77.

摘要 ( 1655 )

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目的研究肾移植术后新生人类白细胞抗原(HLA) 抗体及主要组织相容性I类相关链A抗原（MICA）抗体的产生对移植肾功能的损伤作用。方法采用免疫磁珠流式细胞仪液相芯片技术检测96例肾移植患者HLA及MICA抗体。根据检测结果，将患者分为HLA抗体阳性组（HLA+）、MICA抗体阳性组（MICA+）、以及HLA、MICA抗体阴性组（HLA/MICA），观察并比较各组不良免疫事件的发生率。再根据有无急性排斥（AR），将患者分为排斥组（AR+）和非排斥（AR）组，观察HLA抗体、MICA抗体对移植肾功能的影响。结果HLA+组急性排斥反应发生率高于HLA/MICA组(43．5％ vs 11.7％，P＜0.05)；MICA+组急性排斥反应发生率与HLA/MICA组比较差异无统计学意义(15．3％ vs 11．7％，P＞0．05)；AR+组中，HLA+患者术后1、3、6和12个月时血清肌酐水平高于HLA/MICA患者, MICA+患者在术后1、3月时血肌酐水平高于抗体阴性患者；AR组中，HLA+患者术后6、12个月血肌酐水平高于HLA/MICA患者；MICA+组在术后6个月及12个月的尿蛋白定量均值高于150?mg，并随时间逐渐升高。结论HLA抗体对移植肾功能的损伤作用表现为血清肌酐的升高以及与急性排斥反应的发生有关；MICA抗体对移植肾功能的损伤主要表现为尿蛋白定量的升高。

腹膜透析患者盐摄入量与口腔盐敏感度相关关系的探讨

刘茂静1，范晓红1,2，鲁新红2，阿拉塔2，汪涛2，胡昭1

2009, 47(12): 78-80.

摘要 ( 1304 )

PDF (378KB) ( 408 )

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目的探讨腹膜透析患者盐摄入量与口腔盐敏感度的关系。方法收集2008年3～12月在北京大学第三医院腹膜透析中心和山东大学齐鲁医院肾内科定期随访的45例腹膜透析患者的24?h透出液及尿液做化验检查，收取患者的饮食记录，按盐排出量和血压将这些患者分为低盐摄入组（21例）和高盐摄入组（24例），检测每位患者口腔对氯化钠的敏感度，按味觉缺失分评价味觉缺失程度。结果两组患者年龄、性别比例等基本生理资料差异无统计学意义（P＞0.05），但两组患者的口腔盐敏感度差异有统计学意义（P＜0.05），钠盐摄入多的腹膜透析患者口腔盐敏感度较钠盐摄入少者差。结论腹膜透析患者盐摄入量与其口腔盐敏感度密切相关。

蜕膜组织杀伤细胞免疫球蛋白样受体与不明原因早期复发性流产的相关性

徐金娥1,2，王珊1，赵跃然1，陈子江1

2009, 47(12): 81-85.

摘要 ( 1285 )

PDF (301KB) ( 391 )

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目的探讨蜕膜组织杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）与不明原因早期复发性流产（URSA）易感性的关系。方法留取URSA妇女（病例组，36例）及正常早孕妇女（对照组，34例）的蜕膜组织，采用酚-氯仿法抽提基因组DNA，序列特异性引物聚合酶链反应检测蜕膜组织14种KIR基因的表达；Trizol一步法提取总RNA，逆转录聚合酶链反应分析KIR mRNA的表达率，荧光实时定量聚合酶链反应分析KIR2DL1、2DL3 mRNA的相对表达量。结果① 14种KIR基因均以不同频率表达；KIR2DS1基因的表达率在病例组与对照组中分别为60.27%、41.18%，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05)；② 6种抑制性KIR mRNA在蜕膜组织中均以不同频率表达，两组的表达率无统计学差异；抑制性KIR mRNA的表达率与KIR基因的表达率并不完全一致；③ KIR2DL1 mRNA及KIR2DL3 mRNA在病例组与对照组中的相对表达量分别为699.37±259.78、1?002.96±476.98和625.93±234.81，1?216.12±425.96，两组比较差异无统计学意义（P均＞0.05)。结论蜕膜组织活化性KIR2DS1基因的表达率增加，抑制性、活化性KIR基因失衡，可能与URSA的发生有关。

滤纸干血片法筛查孕中期唐氏综合征的可行性

刘霞1,2,周玉侠1,2，张莉3，范刚1，孙萍1,2，沈峰1,2

2009, 47(12): 86-90.

摘要 ( 1488 )

PDF (666KB) ( 455 )

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目的探讨滤纸干血片法应用于孕中期妇女唐氏(Down′s)综合征产前筛查的可行性。方法应用自动时间分辨荧光免疫分析(Auto DELFIA)法检测滤纸干血片洗脱液中血清甲胎蛋白(AFP)和游离β人绒毛膜促腺性激素（游离βhCG）的含量，并对干血片检测方法的精密度、回收率、检测限等进行评估。结果该方法检测AFP水平的变异度为2.5%～6.8%；回收率为95.1%；检测低限为0.5?u/mL；检测游离βhCG水平的变异度为4.1%～7.0%；回收率为97.6%；检测低限为1?μg/L；发病风险为1/128，本研究共测定孕妇1?320例，筛查出阳性病例85例，筛查阳性率为6.4%，经羊水染色体检查确诊1例Down′s综合征胎儿。与国际公认的金标准血清学筛查结果的符合率为98.4%。结论采用滤纸干血片法替代血清学方法测定孕中期女性血中AFP和游离β hCG的含量，用血量少，方便快捷可行，不增加筛查成本，筛查结果准确可靠。

慢性阻塞性肺病患者支气管黏膜PPARγ、MMP9和iNOS的表达

李巧荣，吴大玮，杨蕾，韩进

2009, 47(12): 91-94.

摘要 ( 1324 )

PDF (557KB) ( 351 )

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目的研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者支气管黏膜中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及与气流阻塞的关系。方法根据吸烟史及肺功能检查将其受试者分为3组：吸烟伴COPD患者18例；吸烟肺功能正常组15例；不吸烟肺功能正常组15例。全部受试者经电子支气管镜取支气管黏膜标本，采用免疫组织化学法检测支气管黏膜中核转录因子PPARγ、MMP9和iNOS的表达，并进行相关性分析。结果①免疫组织化学染色结果：核转录因子PPARγ在吸烟伴COPD组和吸烟肺功能正常组表达明显减少，MMP9和iNOS在两组表达明显增多，与不吸烟肺功能正常组比较差异均有统计学意义（P＜0.01）；②相关性分析：核转录因子PPARγ的表达与FEV1%、FEV1/FVC%呈直线正相关（P＜0.01）；MMP9和iNOS的表达与肺功能指标呈直线负相关（P＜0.01）。COPD患者支气管黏膜中核转录因子PPARγ的表达与MMP9和iNOS的表达均呈直线负相关（P＜0.05）。结论COPD患者支气管黏膜中核转录因子PPARγ表达减少导致气道的抗炎能力下降，气道内炎症细胞及炎症介质增多，导致肺组织损伤及重构，引起和加重COPD患者的气流阻塞。

中心体异常及P53蛋白过表达在食管癌变过程中的作用

张楠，孙美丽，李哲，刘杰，王琳琳，孙玉萍

2009, 47(12): 95-98.

摘要 ( 1310 )

PDF (532KB) ( 355 )

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目的了解食管癌变过程中中心体的变化及P53蛋白的表达情况，探讨中心体异常和P53蛋白过表达在食管癌变过程中的作用。方法选取食管鳞状细胞癌50例，非典型增生22例，正常食管粘膜12例的石蜡包埋组织，采用免疫组织化学染色SP法检测P53蛋白的表达，组织免疫荧光染色法检测中心体的变化。结果食管癌组织中P53蛋白呈过表达（88%），非典型增生组织中呈弱表达（54%），而正常组织无表达。同样，食管癌组织中有明显中心体异常，非典型增生组织中可见部分中心体异常，而正常组织未见中心体异常。中心体异常和P53蛋白过表达均与肿瘤分化程度及浸润程度呈正相关(P<0.05)。食管鳞癌组织中突变的P53蛋白表达与中心体异常显著相关(P<0.05)。结论中心体异常和P53蛋白过表达发生于食管癌变的早期阶段，且与预后相关。P53突变可能参与中心体异常的形成，与之共同参与食管癌的发生。

Ebstein 心脏畸形的临床解剖及外科治疗

李金东，王安彪，张海洲，张文龙，王正军，訾捷，范全心

2009, 47(12): 99-101.

摘要 ( 1507 )

PDF (267KB) ( 175 )

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目的总结先天性三尖瓣下移畸形（Ebsein 畸形）的临床解剖分型及外科治疗方法。方法2005年7月到2009年3月收治的Ebstein 畸形25例患者，根据术中所见的三尖瓣畸形及下移的程度分为Ⅰ型8例，Ⅱ型12例，Ⅲ型5例。其中Ⅰ型全部行后瓣环成形术，Ⅱ型中9例行房化心室折叠术+三尖瓣成形术，2例行三尖瓣置换术，1例行三尖瓣成形+双向腔肺动脉分流术（双向Gleen术）。Ⅲ型全部行三尖瓣置换术。结果全组病例无死亡。2例术后出现低心排综合征，应用强心利尿药后均好转，其余患者术后恢复良好。随访15例,随访时间4个月～2年，复查超声心动图显示：12例三尖瓣水平无返流，3例三尖瓣水平见轻-中度返流信号，10例心功能Ⅰ级(NYHA分级)，5例心功能Ⅱ级（NYHA分级）。结论Ebstein 心脏畸形的临床病理解剖分型对其临床诊断及手术方案的选择有较高的价值。

自酸蚀粘结剂XenoⅢ与激光联合应用封闭牙本质小管的实验研究

熊伯刚1，许伟森1，刘智永1，熊世江1,2

2009, 47(12): 102-104.

摘要 ( 1246 )

PDF (243KB) ( 425 )

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目的评价自酸蚀粘结剂XenoⅢ与激光联合应用对离体牙牙本质小管通透性的影响。方法将40颗离体牙制备成牙本质暴露模型，随机均分为4组，分别给予自酸蚀粘结剂、激光、自酸蚀粘结剂与激光联合应用、对照组，并用染色法测量染料渗入的最大距离。结果联合应用组的染料渗入距离较自酸蚀粘结剂组或激光组减少（P＜0.05），较对照组明显减少（P＜0.01）。结论酸蚀粘结剂与激光联合应用较单独使用自酸蚀粘结剂或激光能更好地降低牙本质小管的通透性。

P物质、血管活性肠肽在OSAHS患者舌根组织中的表达及意义

王岩1，李延忠1，王卫之2

2009, 47(12): 105-107.

摘要 ( 1104 )

PDF (561KB) ( 382 )

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目的探讨P物质及血管活性肠肽在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)舌根平面阻塞中的意义。方法通过免疫组织化学染色对49例OSAHS患者的舌根组织的P物质及血管活性肠肽的表达进行分析。结果OSAHS患者舌根组织中的粘膜下层、小血管周围、腺泡及腺导管周围均有多量P物质及血管活性肠肽表达。P物质在有舌根肥厚组阳性表达率为80.6%(25/31)，在无舌根肥厚组的阳性表达率为33.3%(6/18)，经统计学处理χ2=10.97，P=0.000?9；血管活性肠肽在有舌根肥厚组的阳性表达率为90.3%（28/31）,在无舌根肥厚组的阳性表达率为55.6%(10/18)，χ2=12.296?9，P=0.000?5，差异有统计学意义。结论OSAHS患者舌根组织中有多量P物质及血管活性肠肽表达，它们可引起局部组织肿胀并参与神经源性炎症，进而引起舌根肥厚和塌陷。

颅脑手术后颅内感染危险因素分析研究

王萍王丽

2009, 47(12): 108-110.

摘要 ( 1155 )

PDF (235KB) ( 490 )

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目的探讨颅脑手术后颅内感染的危险因素。方法以病例对照研究的方法研究患者颅内感染的危险因素，采用检验和logistic回归分析方法研究各因素与颅内感染的关系。结果急诊手术、术后放置引流管、手术时间长、后颅凹部位手术、脑脊液漏、切口积液与术后颅内感染呈显著相关（P＜0.05）；患者的性别、年龄、术前是否应用抗生素与颅内感染无显著相关。结论急诊手术、术后放置引流管、手术持续时间、手术部位、脑脊液漏、切口积液是术后颅内感染的危险因素。

食管型颈椎病数字化X线吞咽造影录像研究

王光明杨小庆燕敦华杨玉娥李德春

2009, 47(12): 111-113.

摘要 ( 1242 )

PDF (365KB) ( 426 )

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目的探讨颈椎病所致吞咽障碍患者的数字化X线吞咽造影录像表现，并评定其应用价值。方法对175例颈椎病性吞咽障碍患者行数字化X线造影录像检查，应用图像后处理软件对录像逐帧分析，计数颈椎增生以及咽、食管后壁压迹的位置、数量，测量压迹宽度、深度。结果175例患者椎体前缘唇样、鸟嘴样增生396处，共出现压迹331个，其中单一压迹82例（46.5%），两处压迹30例（17.2%），三处压迹63例(36.3%)；压迹位于C3/4椎间隙9个(2.7%)、C4/5椎间隙78个(23.6%)，C5/6椎间隙154个(46.5%)、C6/7椎间隙81个(24.5%)，C7/T1椎间隙9个(2.7%)；其中轻度压迹216个（65.2%），中度压迹75个(22.6%)，重度压迹40个(12.2%)。结论数字化X线吞咽造影录像能够直观、精确、详细的分析颈椎病所致吞咽障碍患者颈椎骨质的改变以及咽、食管后壁受压情况，有重要的应用价值。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者心脏结构及功能变化的研究

王岩李延忠李春敏祝希敏

2009, 47(12): 114-118.

摘要 ( 1037 )

PDF (394KB) ( 389 )

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目的探讨重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者心脏结构的改变及左心室收缩及舒张功能的影响。方法对经多导睡眠图监测确诊的87例重度OSAHS患者及30例正常对照组采用多普勒超声检测仪对心脏结构，左心室舒张功能，左心室收缩功能等指标进行比较。结果OSAHS组与正常对照组比较室间隔厚度，左室后壁厚度，左室质量及质量指数等主要反映心脏结构的超声指标比较差异均有统计学意义。组织多普勒显像室间隔舒张早期峰值运动速度/舒张晚期峰值运动速度（Em/Am）、二尖瓣环Em/Am及左室后壁Em OSAHS组与正常对照组之间比较差异有统计学意义。室间隔、二尖瓣环及左室后壁收缩期峰值运动速度在OSAHS组与正常对照组之间比较差异有统计学意义。结论重度OSAHS患者心脏结构发生明显的改变，呈向心性肥厚；同时左室舒张功能及收缩功能也存在明显的减退。

异基因外周造血干细胞移植治疗儿童重型再生障碍性贫血

郭鹏黄宁葛林阜

2009, 47(12): 119-121.

摘要 ( 1188 )

PDF (281KB) ( 377 )

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目的探讨异基因外周血造血干细胞移植(allo—PBSCT)对儿童重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效。方法8例接受allo—PBSCT治疗的SAA 患儿均为血缘供体移植，男6例，女2例，7～14岁，中位年龄为11岁。4例患儿为急性SAAI型，其中2例移植前合并重型感染且未能完全控制；另4例患儿为SAAⅡ型，患儿移植前大多经包括环孢菌素A(CSA)在内的多种治疗无效。诊断至移植的时间为1～45个月，中位时间为13个月。预处理方案由低剂量环磷酰胺（CTX）和抗淋巴细胞球蛋白（ALG）或抗胸腺细胞球蛋白（ATG）组成，采用CsA+短程甲氨蝶呤(MTX)方案预防移植物抗宿主病(GVHD)。以DNA短串联重复序列多态性分析(STRPCR)检测学植入依据。结果患者移植后均获造血重建，中性粒细胞绝对值≥0.5×109／L和血小板计数≥20×109／L的中位时间分别为移植后+12.75d(+10～+15d)和+19.88d(+15～+32d)。8例患儿均为完全供体型植入，其中1例移植后10个月出现外周血白细胞、红细胞、血小板计数逐渐下降，STRPCR显示移植排斥，经ATG、CsA 等药物治疗逐渐恢复自身造血。1例患儿出现Ⅱ度急性GVHD，1例出现局限性慢性GVHD。随访15～50个月，中位数为29个月，8例SAA患儿均存活。结论采用以免疫抑制为主的ATG/ALG+CTX预处理方案进行allo—PBSCT能够有效治疗儿童SAA，移植相关并发症少，值得临床推广应用。

基于时空重排扫描统计量的结核病聚集性研究

刘云霞李士雪王忠东薛付忠

2009, 47(12): 122-125.

摘要 ( 1452 )

PDF (621KB) ( 618 )

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目的探讨青岛市结核病发病的时空聚集性。方法应用时空重排扫描统计量（采用SaTScan v8.0软件）对青岛市2006年1月1日至2007年12月31日的结核病登记资料进行分析。结果回顾性时空聚集分析确定了5个可能的结核病发病聚集区域：莱西市日庄镇东庞周围区域的结核病发病在2006年10月1日至2006年12月31日期间具有聚集性（P=0.001），李沧区永安路办事处文安路周围区域的结核病发病在2007年1月1日至2007年6月30日期间具有聚集性（P=0.006），平度市崔家集镇王家庄周围区域的结核病发病在2006年3月1日至2006年3月31日期间具有聚集性（P=0.016），即墨市普东镇后家屯周围区域的结核病发病在2007年7月1日至2007年8月31日期间具有聚集性（P=0.041），胶南市大村镇大石岭周围区域的结核病发病在2006年4月1日至2006年4月30日期间具有聚集性（P=0.066）。结论时空重排扫描统计量是空间流行病学中用于评价疾病时空聚集性的一种有效的方法，可为结核病时空聚集性特征的阐明以及结核病的有效防控提供统计学依据。

血脂异常患者膳食摄入情况及相关危险因素研究

张凤凤王淑娥李心河王惠敏赵长峰

2009, 47(12): 126-129.

摘要 ( 1096 )

PDF (295KB) ( 285 )

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目的探讨血脂异常患者膳食摄入情况及相关危险因素。方法选取217例血脂异常患者和163例健康人群进行病例对照研究，比较两组的膳食摄入情况，并分别与平衡膳食宝塔建议量比较；进行非条件多因素Logistic回归分析寻找危险因素。结果病例组谷薯杂豆类、畜禽肉类、鱼虾类、植物油每天摄入量高于健康组（P＜0.05）；两组均存在严重的蔬菜、水果、乳类摄入不足，而植物油、食盐摄入过多现象；谷薯杂豆类、畜禽肉类、甜食、动物内脏、咸菜、植物油摄入过多，腰臀比（WHR）和脉压大、经常吃夜宵和零食、睡前＜4?h晚餐、经常接受他人食品是血脂异常的危险因素，饮茶、适量进食畜禽肉类是其保护因素。结论两组均存在某些食物摄入过多和不足的情况；血脂异常存在严重的膳食依赖性，对危险因素的探讨有助于确定血脂异常高危人群和采取针对性的防治措施。

去铁酮大鼠血浆蛋白结合率的实验研究

巩泉泉刘萍徐华雷张雅楠贾晓静李玉彩

2009, 47(12): 130-132.

摘要 ( 1236 )

PDF (269KB) ( 434 )

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目的建立测定透析液中去铁酮（DFP）浓度的高效液相色谱法（HPLC），观察DFP的大鼠血浆蛋白结合率。方法以体外方式，采用平衡透析法模拟DFP在大鼠体内与血浆蛋白结合的过程，并用HPLC法测定其透析液中DFP的浓度及血浆蛋白结合率。结果低、中、高3种浓度下，DFP的大鼠血浆蛋白结合率范围为4.25%～5.31%，不同浓度组血浆蛋白结合率差异无统计学意义（P＞0.05）。结论DFP血浆蛋白结合率较低，属于低血浆蛋白结合药物，其主要以游离形式存在而发挥药效。

均匀设计法优选中草药免疫活性成分工艺研究

张明

2009, 47(12): 133-137.

摘要 ( 1114 )

PDF (272KB) ( 269 )

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目的优选复方中草药免疫活性成分最佳的工艺条件。方法用均匀试验法设计最佳提取工艺条件，以复方的提取物得率、巨噬细胞吞噬活性和淋巴细胞增值率为测定指标，研究液料比、温度、提取时间和醇沉比例四个因素提取的免疫活性成分对小白鼠免疫功能的影响。结果最佳提取工艺条件为：液料比20∶1(g/mL), 温度为100?℃，提取时间为170?min,醇沉比例为85%。结论该工艺适合于中草药免疫复方配伍的筛选。

HPLC/MS/MS法测定抗风湿中药制剂中糖皮质激素类化学药

黄萍凌霄

2009, 47(12): 138-140.

摘要 ( 1418 )

PDF (784KB) ( 217 )

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目的采用液相色谱－电喷雾离子阱质谱联用法（HPLC/MS/MS），以保留时间、结构和分子量信息为指标测定抗风湿、镇痛类中药制剂中可能添加的糖皮质激素类化学药醋酸泼尼松及泼尼松。方法建立HPLC/MS/MS 方法, 液相色谱: 色谱柱为Agilent C18柱，以0.01?mol/L甲酸铵溶液（甲酸调节pH值至4.0）－甲醇（30：70）为流动相, 流速0.4?mL/min，柱温30?℃, 检测波长270?nm；质谱: 电喷雾离子源正离子检测方式（ESI＋），m/z范围50～1000，离子源喷射电压5?KV，雾化电压40?psi，干燥气温度350?℃，干燥气（N2）流速10?L/min，毛细管电压15?V。结果通过与对照品峰的保留时间及一级、二级质谱图谱比较,确定样品中是否添加了化学药。应用该法在供试品溶液中检出了醋酸泼尼松。结论该方法选择性强，可用于鉴别中药制剂中非法添加糖皮质激素类化学药醋酸泼尼松及泼尼松。

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