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山东大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 47 ›› Issue (12): 21-24.

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GM1对人胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞的作用

高选1,2,颜军昊2,宦晴2,黄色新2,徐凯2,陈子江2,王磊1   

  1. 1. 山东大学药学院药物分析研究所, 济南 250012; 2. 山东大学附属省立医院生殖医学中心 山东省生殖医学重点实验室, 济南 250021
  • 收稿日期:2009-04-05 出版日期:2009-12-16 发布日期:2009-12-16
  • 通讯作者: 陈子江(1959- ),女,教授,博士,主要从事生殖医学的研究。Email:zjchen59@yahoo.com 王磊(1971),女, 博士, 副教授,主要从事大分子化学物质与细胞信号通路的研究。 Email: wanglsdu@sdu.edu.cn
  • 作者简介:高选(1969- ),女,实验师,硕士研究生,主要从事细胞生物学、生殖医学、制药工程学的研究。Email:cellgaoxuan@gmail.com

Role of GM1 in human embryonic stem cells differentiating into neural cells

GAO Xuan 1,2 , YAN Junhao 2 , HUAN Qing 2 , HUANG Sexin 2 , XU Kai 2 , CHEN Zijiang 2* , WANG Lei 1   

  1. 1. Institute of Pharmaceutical Analysis, School of Pharmaceutical Sciences, Shandong University, Jinan 250012, China;
     2. Reproduction Medical Center,  Shandong Provincial Hospital Affiliated to Shandong University,
    Shandong Key Laboratory of Repruduction Medicine, Jinan 250021, China
  • Received:2009-04-05 Online:2009-12-16 Published:2009-12-16

摘要:

目的方法将人胚胎干细胞(SDUhESm1)悬浮培养形成拟胚体(EB),EB再贴壁培养诱导分化神经细胞,分别于悬浮培养EB阶段和EB贴壁培养阶段的神经分化培养基中加入浓度为0、0.5、 5、50?μg/mL 的GM1,观察EB的形成,计数神经标记性抗原Nestin和βTubulin阳性细胞百分率。结果含GM1的神经分化培养基诱导生成"透亮EB", 分化出Nestin和βTubulin阳性细胞明显多于不含GM1培养基诱导出的神经细胞数量,不含GM1形成的EB发黑;在悬浮培养形成EB开始加GM1比EB贴壁培养开始加GM1产生Nestin和βTubulin阳性细胞数目更多,但2个加GM1阶段产生的神经细胞百分率均随GM1浓度增加而增大。结论首次发现GM1可以诱导hESC定向分化神经细胞,定向产生神经前体细胞(Nestin阳性),在hESC定向分化神经细胞的过程中,悬浮培养EB阶段加入GM1更有利于hESC的定向分化。

关键词: 干细胞, G(M1)神经节苷脂, 细胞,培养的

Abstract:

To explore the possible role of ganglioside GM1 in human embryonic stem cells differentiating into neural cells and to provide a method for clinical treatment in the future. MethodsHuman embryonic stem cells underwent suspension culture to form embryonic bodies (EB) and then the EB underwent adherent culture to induce neural cells. 0, 0.5?μg/ml, 5?μg/ml, and 50?μg/ml GM1 were respectively added to the neural differentiation culture media and then morphology of the EB and neural cells were observed, and positive cells of Nestin and βTubulin were counted. ResultsLight EB were formed when culture media were added to GM1, while dark EB were formed when culture media was not added to GM1. Nestin and βTubulin positive cells induced by neural differentiation culture media with GM1 were more significant than those without GM1. There were more Nestin and βTubulin positive cells when adding GM1 in suspension culture than in adherent culture, also with an increase of the concentration of GM1, the Nestin and βTubulin positive cells increased in both media. ConclusionGM1 may directionally induce hESCs into neural progenitor cells. GM1 added in suspension culture media is helpful in the directional differentiation of hESCs.

Key words:  , Stem cells, G(M1) ganglioside, Cells, cultured

中图分类号: 

  • R34
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