山东大学学报 (医学版)

2009, 47(7): 1-3.

摘要 ( 1168 )

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目的研究单胺囊泡转运蛋白2（VMAT2）抑制剂利血平（RE）作用于转染VMAT2基因的中国仓鼠卵巢细胞（VMAT2CHO）时，VMAT2CHO对鱼藤酮（Rotenone）、多巴胺（DA）的毒性抵抗作用。方法采用MTT比色法检测RE与不同浓度Rotenone及DA共同作用下的VMAT2CHO细胞存活率；采用流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平。结果Rotenone对VMAT2CHO细胞有毒性作用，随浓度增大，细胞存活率下降;Rotenone和DA对细胞有协同毒性作用。随DA浓度增大，VMAT2CHO细胞产生的ROS增加；VMAT2抑制剂利血平增加DA的毒性，使同样浓度的DA诱发VMAT2CHO细胞产生的ROS增加，存活率下降。结论RE使VMAT2功能抑制时DA在胞浆内聚集，触发DA内源性毒性，通过氧化应激系统而发挥毒性作用。DA内源性毒性可协同环境毒物Rotenone增加对细胞的毒性作用。

快速老化小鼠P10海马PI3K信号转导通路的变化及APP17肽的影响

2009, 47(7): 4-8.

摘要 ( 1041 )

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目的探讨APP17肽对快速老化小鼠P10（SAMP10）学习记忆、海马组织抗氧化酶活性和PI3K信号转导通路蛋白质变化的影响。方法采用通道式水迷宫实验观察SAMP10行为学改变，采用羟胺法和硫代巴比妥酸（TBA）比色法、黄嘌呤氧化酶法及免疫组织化学染色技术，测定过氧化脂质降解产物中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、PI3K信号转导通路蛋白质的变化。结果①模型组小鼠存在明显的学习记忆功能障碍，APP17肽治疗组小鼠的行为学障碍明显轻于模型组与正常对照组无明显差异；②模型组海马神经细胞线粒体SOD活性明显降低（P<0.01），MDA含量显著升高（P<0.01）；APP17肽组SOD活性高于模型组（P<0.05），而MDA含量低于模型组（P<0.01）；③模型组PI3K信号转导通路相关蛋白TrkA、Akt/PKB、bcl2阳性染色细胞数较对照组分别减少63%、50%和45%(P<0.01)，经APP17肽治疗后，各种蛋白的表达明显上调(P<0.05)；而神经生长因子（NGF）和结合元件蛋白（CREB）的表达无明显差异（P>0.05）。结论SAMP10存在学习记忆障碍，海马组织抗氧化酶活性降低、自由基代谢产物含量增加、PI3K信号转导通路蛋白表达异常，APP17肽能部分纠正这些异常变化。

血小板源性生长因子介导内皮素1所致人肾小球细胞外基质的合成

2009, 47(7): 9-12.

摘要 ( 980 )

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目的探讨内皮素1（ET1）致系膜细胞细胞外基质（ECM）合成增加的介导途径。方法体外培养人肾小球系膜细胞，按培养条件不同分为正常对照组、ET1组、阻断剂（RG50864）干预组及氯沙坦干预组，分别培养24?h。采用ELISA法测定细胞上清液中IV型胶原（Col IV）、纤维连接蛋白（Fn）的含量；RTPCR法测定培养系膜细胞内血小板源性生长因子B（PDGFB）mRNA的表达，Western blot法检测PDGFB蛋白的表达。结果① 在外源性ET1作用下，上清液中Col IV、Fn蛋白含量、系膜细胞PDGFB mRNA及蛋白表达增加（P<0.05），以10-7mol/L ET1作用最为明显。RG50864呈浓度依赖方式抑制ET1所致的Col IV、Fn分泌增加（P<0.05）；② 氯沙坦能抑制ET1所致系膜细胞PDGFB mRNA及蛋白表达增加，减少上清液中Col IV、Fn蛋白的含量（P<0.05）。结论① ET1能够刺激ECM分泌增加并促进系膜细胞合成PDGFB，ET1所致的系膜细胞ECM分泌增加可能部分由PDGFB介导；② 氯沙坦可以通过拮抗系膜细胞PDGFB的产生进而减少ECM的分泌和沉积，从而产生明显的肾脏保护作用。

RNA干扰抑制视网膜母细胞瘤细胞血管内皮生长因子的表达

2009, 47(7): 13-15.

摘要 ( 1214 )

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目的利用RNA干扰（RNAi）技术，研究血管内皮生长因子（VEGF）编码基因的siRNA对人视网膜母细胞瘤（RB）细胞的影响，从而探讨通过抑制血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤组织中的表达来治疗视网膜母细胞瘤的机理。方法将VEGF编码基因特异的siRNA转染入视网膜母细胞瘤细胞，采用RTPCR和Westernblot技术检测siRNA处理前后RB细胞VEGF基因表达变化。MTT法检测siRNA处理前后RB细胞生长的抑制情况。结果RTPCR和Westernblot均显示VEGF特异性siRNA对视网膜母细胞瘤细胞血管内皮生长因子基因的表达有抑制作用，MTT法检测RB细胞生长的抑制情况显示，抑制率可达40%。结论VEGF特异性siRNA的特异性基因沉默作用对RB细胞VEGF基因的表达有抑制作用。

nAChRα7在条件免疫反应治疗小鼠支气管哮喘中的作用机制

2009, 47(7): 16-20.

摘要 ( 1244 )

PDF (1499KB) ( 166 )

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目的探讨nAChRα7在条件免疫反应治疗小鼠支气管哮喘中的作用机制。方法选4～6周龄的雌性BALB/C小鼠，用卵清蛋白（OVA）腹膜下注射致敏，OVA雾化吸入激发，建立支气管哮喘模型，健康对照组用PBS给予相同处理。将模型小鼠随机分为7组，每组15只。A组：CIR1组；B组：CIR2组；C组：常规治疗组；D组：常规治疗减量组；E组：单纯声音刺激组；F组：单纯糖精水刺激组；G组：空白对照组。以上7组每天给予哮喘激发1次，各治疗组在治疗间隔1?h后给予激发。健康对照组为H组，用PBS激发20周。治疗20周后，用流式细胞技术检测CD4+ T细胞胞膜上烟碱型乙酰胆碱受体alpha7（nAChRα7）与胞浆内IL4、IFNγ表达量，分析nAChRα7与IL4、IFNγ的相关性。结果①A、B、C组与G组比较，CD4+ T淋巴细胞表达nAChRα7、IL4明显降低（P＜0.01），IFNγ增高（P＜0.01）；各因子在A、B及C组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。nAChRα7与IL4表达呈正相关（r=0.76，P＜0.01）,与IFNγ表达呈负相关（r=-0.69，P＜0.01）；②D、E、F、G组与H组相比，气道上皮增厚，管腔狭窄，管壁周围有大量炎症细胞浸润；A、B、C组经治疗后气道上皮及炎性浸润明显改善。结论以声音或糖精水为条件刺激，以普米克令舒加万托林雾化吸入为非条件刺激建立起的条件免疫反应，通过下调CD4+ T淋巴细胞上nAChRα7的表达，调节CD4+ T淋巴细胞的免疫功能，缓解小鼠支气管哮喘。

口腔负压对淋巴循环影响的实验研究

2009, 47(7): 21-23.

摘要 ( 1125 )

PDF (448KB) ( 258 )

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目的探讨口腔负压对淋巴动力学的影响，探寻影响淋巴循环的新方法。方法在兔的口腔建立负压，分别在四肢及耳的固定部位注射定量染料，测量染料到达固定观察部位的时间，并与未建立口腔负压的对照组对比，观察口腔负压对淋巴动力学的影响。结果实验组在建立口腔负压后，注射染料到达固定测量部位的时间明显缩短。结论在口腔建立负压，能够影响淋巴动力学，促进淋巴的回流。

肝静脉及下腔静脉灰阶超声造影的实验研究

2009, 47(7): 24-26.

摘要 ( 1250 )

PDF (448KB) ( 213 )

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目的应用低机械指数灰阶超声造影研究肝静脉和肝段下腔静脉的动态增强变化规律及其诊断价值。方法分别经耳缘静脉对13只正常和16只荷VX2瘤新西兰大白兔团注超声造影剂SonoVueTM（0.1?mL/kg），应用CnTi(contrast tuned imaging)低机械指数实时造影匹配成像技术，动态观察兔肝静脉和肝段下腔静脉造影增强效应，并应用声学定量时间强度曲线分析(Washin/Washout)软件，定量分析8只正常兔下腔静脉造影增强效果。结果在所有造影过程中，肝段下腔静脉和第二肝门处肝静脉内造影剂均随时间延长呈动态增强。在早期从右心房反流来的造影剂，增强明显，是其增强的主要来源，与周围肝组织灰阶对比显著，是观察肝段下腔静脉和肝静脉病变的最佳时期。其开始增强时间和峰值时间均明显提前于肝实质，分别是6.4?s和13.5?s，与肝实质相比，两者差异具有统计学意义（P＜0.001）。随后造影剂逐渐退出，而肝实质逐渐增强，此时下腔静脉和肝静脉增强不明显。后期少量来源于经肝循环的造影剂进入下腔静脉及肝静脉，但增强效果轻微，与周围肝实质灰阶差别不明显，对下腔静脉和肝静脉疾病诊断意义不大。结论低机械指数灰阶超声造影技术能很好的对下腔静脉和肝静脉进行造影，对其疾病有一定的诊断意义。

早期雌激素替代疗法对去卵巢家兔动脉粥样硬化的影响

2009, 47(7): 27-31.

摘要 ( 1174 )

PDF (672KB) ( 260 )

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目的探讨早期雌激素替代疗法对去卵巢家兔动脉粥样硬化病变的影响。方法36只雌性新西兰大白兔随机分成假手术组（A组）、对照组（B组）和雌激素组（C组），每组12只，各组均进食含1.5%胆固醇的高脂饲料。A组不去卵巢，B组和C组均去卵巢，A组、B组均给予安慰剂，C组给予小剂量雌激素（戊酸雌二醇2?mg/周），饲养12周后均切开股动脉后取血，并取全长的主动脉。分别检测血液学指标，光镜下观察组织病理。取主动脉根部5?mm?标本进行切片(横切面):HE染色,观察横切面动脉硬化病变的内膜/中膜厚度比值;苦味酸天狼星红染色，观察斑块内胶原纤维的含量，免疫组化法半定量观察横切面斑块内巨噬细胞的阳性率。其余部分从胸主动脉起始部到腹主动脉分叉处纵行剖开，油红O染色，分析纵剖面斑块面积及占主动脉的面积比。结果无论是横切面HE染色的内膜/中膜厚度比，还是纵剖面油红O染色的动脉粥样硬化斑块面积及占主动脉的面积之比，A、C组都明显小于B组（P＜0.05），C组斑块内巨噬细胞的阳性率明显低于B组（P＜0.05），但C组斑块内胶原纤维的含量多于B组（P＜0.05）。结论早期雌激素替代治疗可改善血脂代谢，减少斑块内巨噬细胞的数量，增加斑块内胶原纤维的含量，稳定斑块，可能是通过这些作用抑制了动脉粥样硬化斑块的进展。

NT4TAT6×HisVHLβ结构域肾癌抑制融合肽cDNA克隆的构建

2009, 47(7): 32-36.

摘要 ( 965 )

PDF (763KB) ( 145 )

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目的构建VHL蛋白(von HippelLindau protein, pVHL)β结构域肾癌抑制融合肽cDNA，并将其应用于肾癌的微基因治疗。方法分别设计合成pVHLβ结构域104123短肽cDNA的正向和反向引物以及编码TAT6×His cDNA的正、反向引物，使用互为引物模板PCR方法，扩增获得具有NaeI/Eco72I酶识别位点的TAT6×His cDNA片段和具有Eco72I/BamH I酶识别位点的VHLβ抑制肽cDNA片段，将两个片段分别克隆到pGEMT easy中，使用双脱氧终止法测序，通过DNASIS软件分析同数据库资料一致性和编码的氨基酸序列。用Nae I和BamH I双酶切获取的TAT6×HisVHLβcDNA片段插入到具有NT4信号肽的pBV220载体中，构建了pBV220NT4TAT6×HisVHLβ质粒。结果经DNA测序证实,获得了编码TAT6×His cDNA片段和编码VHLβ抑制肽的cDNA片段，分析证实核酸序列和推导的氨基酸同数据库资料一致。重组质粒pBV220NT4TAT6×HisVHLβ酶切图谱证实已将NT4TAT6×HisVHLβ融合肽cDNA克隆到pBV220原核表达载体中。结论成功扩增了编码TAT膜渗透肽和6×His标签肽以及VHL抑癌基因β结构域肾癌抑制肽的cDNA片段，构建了具有NT4信号肽的TAT6×HisVHLβ融合肽cDNA。

组织蛋白酶D在Raji细胞中的表达与阿霉素化疗敏感性的关系

2009, 47(7): 37-39.

摘要 ( 1245 )

PDF (460KB) ( 260 )

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目的探讨组织蛋白酶D(Cathepsin D)在人淋巴瘤细胞株Raji中的表达水平变化与Raji细胞增殖和对阿霉素(Adriamycin, ADM)化疗敏感性的关系。方法实验将对数生长期Raji细胞分为5组：①空白对照组；②二甲基亚砜（DMSO）对照组；③胃酶抑素A（Pepstatin A）处理组；④ADM处理组；⑤Pepstatin A+ADM处理组。Western blot法检测ADM处理前后各组Raji细胞Cathepsin D表达水平的变化。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测用Pepstatin A预处理后，Raji细胞对ADM敏感性的变化。结果Cathepsin D在Raji细胞中有表达，与空白对照组相比，Pepstatin A 处理组和Pepstatin A+ADM处理组的Cathepsin D表达均有下降，两组的下降程度无统计学差异(P<0.05)；而ADM处理组Raji细胞中Cathepsin D表达增高(P<0.05)。MTT结果显示，单用Pepstatin A处理，对Raji细胞增殖无影响，而ADM处理组及Pepstatin A+ADM处理组均明显抑制Raji细胞增殖，且Pepstatin A+ADM处理组的细胞增殖抑制率显著低于ADM处理组(P<0.05)。结论在ADM作用下，Raji细胞Cathepsin D表达上调，细胞增殖抑制率显著增高。据此推测Cathepsin D可能参与ADM介导的Raji细胞的凋亡，并能增强Raji细胞对ADM的化疗敏感性。

内支架联合125I粒子植入治疗恶性上腔静脉阻塞

2009, 47(7): 40-43.

摘要 ( 1111 )

PDF (379KB) ( 260 )

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目的探索上腔静脉支架联合125I粒子植入治疗恶性肿瘤引致上腔静脉阻塞的临床价值。方法19例胸部恶性肿瘤致上腔静脉阻塞综合征患者，上腔静脉支架置入后7?d左右，在CT导引下植入125I粒子。结果上腔静脉阻塞综合征症状明显改善，1、3、6个月复查肿块逐渐缩小。结论上腔静脉支架结合125I粒子植入近距放疗治疗胸部恶性肿瘤引致的上腔静脉阻塞效果明显。

原发性高血压家系与血压正常家系ACE基因I/D突变及CYP11B2基因单核苷酸多态性的相关性研究

2009, 47(7): 44-48.

摘要 ( 1081 )

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目的探讨原发性高血压家系与血压正常家系血管紧张素转换酶（ACE）基因插入/缺失位点及醛固酮合成酶（CYP11B2）基因C(344)T位点单核苷酸多态性的关系。方法以家系为基础进行高血压家系-血压正常家系对照研究。高血压家系组：高血压家系62个，229例受试者；正常血压家系组：正常血压家系61个，221例受试者。采用PCR技术，分析ACE基因多态性；采用PCRRELP技术，分析CYP11B2基因多态性。基因型和等位基因频率用基因计数法。结果与正常家系组比较，高血压家系组第一、二代及三代受试者全体ACE基因DD基因型与D等位基因频率升高（P＜0.05），高血压家系组各代及三代受试者全体CYP11B2基因TT基因型及T等位基因发生频率明显多于正常血压家系（P＜0.05）。与ACE基因I/D多态性协同作用中，高血压家系组的CYP11B2基因TT基因型及T等位基因发生频率明显多于正常血压家系（P＜0.05）。结论家族性原发性高血压与ACE基因I/D多态性及CYP11B2基因T（-344）C多态性之间具有相关性。D及T等位基因频率增高是原发性高血压患者家族中ACE基因I/D多态性及CYP11B2基因T（-344）C多态性的分布特点。D及T等位基因可能在家族性原发性高血压遗传中起协同作用。

RNA干扰沉默人血管平滑肌细胞胱抑素C基因表达及对组织蛋白酶S表达的影响

2009, 47(7): 49-53.

摘要 ( 986 )

PDF (705KB) ( 205 )

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目的研究小干扰RNA（siRNA）对胱抑素C（CysC）基因表达的抑制作用及对组织蛋白酶S（CatS）表达的影响。方法利用Ambion公司设计合成的以CysC为靶标的siRNA，通过脂质体转染人血管平滑肌细胞（VSMC），以未转染siRNA细胞和转染无关siRNA细胞为对照，采用RTPCR和Western blot分别检测CysC在mRNA水平和蛋白水平的改变。选取抑制效率最高siRNA转染VSMC，以空白对照组、无关干扰组和CysC高表达组为对照，采用RTPCR法和Western blot分别检测CatS在mRNA水平和蛋白水平的改变。结果转染24?h后，siRNA组CysC mRNA和蛋白表达均被有效抑制，与空白对照组相比，差异有统计学意义（P<0.01），其中，siRNA2的抑制效率最高。CatS的mRNA及蛋白表达水平在siRNA组均有明显升高，与其他三组比较，差异有统计学意义（P<0.01）。结论体外转录合成的siRNA可有效抑制人VSMC中CysC的表达，并对CatS基因表达有一定影响。

高血压病患者血清对血管内皮细胞DNA损伤的实验研究

2009, 47(7): 54-56.

摘要 ( 1148 )

PDF (74KB) ( 257 )

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目的探讨高血压病患者血清导致血管内皮细胞结构发生变化的原因及其与高血压发生、发展的关系。方法将细胞分为高血压病组、健康组、空白组，分别用含15%高血压病患者血清、15%健康人血清、100%DMEM的培养基干预人脐静脉内皮细胞48?h，应用单细胞凝胶电泳技术(彗星实验)检测DNA损伤程度，用化学比色方法检测干预后的细胞上清中丙二醛(MDA)含量，以及超氧化物歧化酶（SOD）的活力。结果数据用SPSS 11.0软件包处理。与健康及对照组相比，用含高血压病患者血清的培养基干预后的细胞DNA损伤明显，且细胞释放的MDA升高，SOD活力降低(P＜0.05)。结论高血压病患者血清中的损伤因素可导致人脐静脉内皮细胞DNA产生氧化性损伤，提示其可能与高血压病发生、发展的病理机制相关。

CYP2E1、GSTT1基因多态性与非霍奇金淋巴瘤易感性的关系

2009, 47(7): 57-60.

摘要 ( 1326 )

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目的探讨细胞色素P450酶2E1(CYP2E1)和谷胱甘肽硫转移酶(GSTT1)基因多态性与非霍奇金淋巴瘤（NHL）易感性的关系。方法分别采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术和聚合酶链反应技术对254例NHL患者和254例健康对照者CYP2E1和GSTT1基因多态性进行分析。结果NHL组和对照组CYP2E1基因多态性分布无明显差异(P>0.05)；NHL组GSTT1基因缺失型频率明显高于对照组（48.0% vs 37.8%，P<0.05）。对NHL亚型分析显示，与GSTT1野生型者相比，携带GSTT1缺失型者发生弥漫大B细胞性淋巴瘤和滤泡性淋巴瘤风险分别为1.78倍（95%CI：1.12～2.82，P=0.02）和1.69倍（95%CI：1.03～2.77，P=0.04）。基因多态联合作用分析显示，CYP2E1野生型伴GSTT1缺失型者发生NHL的风险为1.83倍(95%CI：1.14～2.95，P=0.01)。结论GSTT1基因多态性可能是NHL的独立易感因素，GSTT1缺失型与CYP2E1野生型联合作用可进一步增加NHL的发病风险。

乳腺癌转移相关蛋白蛋白质组学初步研究

2009, 47(7): 61-64.

摘要 ( 1264 )

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目的筛选人乳腺癌腋窝淋巴结转移相关蛋白，并对所筛选的两个差异蛋白进行验证。方法选取有淋巴结转移和无淋巴结转移的乳腺癌新鲜标本各10例,提取组织蛋白进行双向凝胶电泳（2DPAGE），通过对比分析筛选出差异蛋白点并进行质谱鉴定(MALDITOFMS)。免疫组织化学SP法检测72例乳腺癌组织中差异表达蛋白Stathmin和Ezrin。结果质谱鉴定出214个蛋白位点。排除胶原蛋白、血清白蛋白及电泳弥散等造成的部分相同蛋白后，筛选出表达差异≥3.0倍的蛋白36个。免疫组织化学检测显示Stathmin、Ezrin蛋白在乳腺癌淋巴结转移组和无淋巴结转移组阳性率分别为73.5%、47.4% 和78.6%、46.9%，两组间差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论淋巴结转移组和无转移组乳腺癌组织存在多种差异蛋白。Stathmin、Ezrin蛋白可能参与了乳腺癌的浸润与转移过程。

环氧化酶2和乙酰肝素酶mRNA在肾癌中的表达

2009, 47(7): 65-69.

摘要 ( 1063 )

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目的探讨环氧化酶2（COX2）和乙酰肝素酶（Hpa）mRNA在肾癌（RCC）组织中的表达，分析其与RCC发生发展及预后的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(半定量RTPCR)方法检测56例RCC组织标本及28例癌旁正常组织标本中COX2 mRNA与Hpa mRNA的表达（βactin作为定量标准物），观察其在RCC组织和癌旁组织中的表达差异以及与临床病理参数和预后的关系。结果56例RCC组织中COX2 mRNA与Hpa mRNA阳性率分别为73.2％和67.9％，均高于癌旁正常组织（χ2＝17.719，χ2＝21.429，P均＜0.05）；COX2 mRNA阳性表达率G1～G2高于G3～G4（χ2＝30.727，P＜0.05），COX2 mRNA表达与患者预后不相关（χ2＝0.890，P＞0.05）；Hpa mRNA阳性表达率与RCC病理分级、临床分期、淋巴转移密切相关（χ2＝7.718，χ2＝3.963，χ2＝3.852，P均＜0.05），Hpa mRNA表达与患者预后相关（χ2＝12.72，P＜0.05）；COX2 mRNA与Hpa mRNA的阳性表达不相关（r＝-0.244，P＞0.05）。结论COX2 mRNA高表达是RCC发生的早期分子事件；Hpa mRNA高表达与RCC进展、转移、预后等密切相关。

荧光定量RTPCR法检测OATPB和OATPD mRNA表达

2009, 47(7): 70-73.

摘要 ( 1083 )

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目的建立荧光定量RT—PCR检测肺癌及正常肺组织中人类有机阴离子转运多肽(organic anion transporting polypeptide, OATP) OATPB、OATPD mRNA表达的方法，了解肺癌和正常肺组织中OATPB、OATPD mRNA的表达水平。方法利用RTPCR方法从肺癌及正常肺组织中扩增出目的基因片段，用TA克隆的方法将基因片段插入到PGEMT质粒载体中，在LineGene荧光定量检测系统上建立检测OATPB、OATPD mRNA表达的标准曲线，并通过40例肺癌及正常肺组织标本进行验证。结果成功构建了OATP基因的质粒重组子，建立了在mRNA水平定量检测OATPB、OATPD基因的标准曲线，相关系数为0.998。以荧光定量RT—PCR法检测， OATPB、OATPD 的mRNA在肺癌及正常肺组织中均有表达，且肺癌中OATPB、OATPD mRNA的表达水平高于正常肺组织（P＜0．05）。结论成功建立了荧光定量RTPCR检测OATPB、OATPD mRNA表达的方法，检测结果用绝对拷贝数表示，定量准确可靠，敏感性高。

³¹P-MR波谱对肝硬化时骨骼肌能量代谢的评估

2009, 47(7): 74-77.

摘要 ( 1110 )

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目的探讨31PMRS技术评估肝硬化对骨骼肌代谢的影响。方法分别对35例肝硬化患者及30例正常对照组的大腿后方骨骼肌进行单体素31PMRS扫描，计算骨骼肌细胞内pH值(pHi)、磷酸单酯(PME)、磷酸双酯(PDE)、无机磷(Pi)、磷酸肌酸(PCr)、γATP、βATP、αATP、Pi/ATP、PCr/ATP、PCr/PME、PCr/PDE、PCr/Pi、PME/ATP、PME/PDE、PME/Pi、PDE/ATP、PDE/Pi等指标。分析肝硬化及其分级对骨骼肌31PMRS指标的影响。结果肝硬化组骨骼肌的PME、PCr、βATP、PME/PDE及Pcr/PDE均大于正常对照组，而PDE/ATP则相反(P<0.05)。在ChildPugh分级A、B、C级患者骨骼肌的pHi分别为7.18±0.10、7.20±0.10、7.41±0.08，具有统计学差异(P=0.041, F=4.629)；PME/PDE分别为0.57±0.26、0.68±0.24、1.16±0.24，也存在明显差异(P=0.047, F=4.254)，而其余代谢物指标未见统计学差异(P>0.05)。结论31PMRS可以对肝硬化患者骨骼肌的异常代谢进行无创评估，骨骼肌pHi及PME/PDE随肝硬化ChildPugh分级的增加而上升。

应用PAR指数评价不同矫治技术的治疗效果

2009, 47(7): 78-80.

摘要 ( 976 )

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目的应用PAR指数评价Damon、SmartClip自锁托槽矫治技术以及MBT滑动直丝弓矫治技术的临床应用效果。方法选取北京大学深圳医院口腔科2006～2009年采用Damon自锁托槽矫治技术、SmartClip自锁托槽矫治技术以及MBT矫治技术不拔牙矫治完成治疗的错?畸形患者，以治疗前相同的PAR总分值将患者进行配对分为3组，每组30例，对治疗前后模型进行PAR指数测量，记录治疗前后PAR分值及其差值以及每组疗程，对两组患者的测量数据进行统计学检验。结果治疗后Damon组前牙排列的PAR分值略高于另外两组，前牙排列效果较其他两组略差。3组患者治疗后其余各项PAR分值及治疗前后PAR差值差异均无统计学意义(P＜0.05)。Damon组平均疗程与MBT组比较缩短2.36月，而SmartClip组疗程比MBT组长2.65月。结论3种矫治技术均能取得较好的治疗效果，而疗程略有差异。

不明原因早期复发性自然流产患者蜕膜组织中杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DL1的表达

2009, 47(7): 81-84.

摘要 ( 1041 )

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目的研究不明原因早期复发性自然流产（RSA）患者早孕蜕膜组织中杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）2DL1 mRNA和蛋白的表达变化，探讨RSA发病的免疫机制。方法选择30例不明原因早期RSA者作为研究组，30例同期正常早孕要求行人工流产术者为对照组，采用SYBR绿色荧光染料I(SYBR Green I)实时荧光定量PCR法及Western blotting技术检测两组蜕膜组织中KIR2DL1 mRNA和蛋白的表达差异。结果① 研究组蜕膜中KIR2DL1mRNA阳性表达率为90.00%(27/30)，对照组蜕膜中KIR2DL1mRNA阳性表达率为96.67%(29/30)，两者无统计学差异(P＞0.05)。研究组KIR2DL1mRNA表达量用RQ值表示为699.37±259.78，对照组KIR2DL1mRNA的表达量为1?002.96±476.976，差异亦无统计学意义(P＞0.05)；② 研究组蜕膜中KIR2DL1蛋白阳性表达率为86.67%（26/30），对照组蜕膜中KIR2DL1蛋白阳性表达率为93.33%（28/30），两者差异无统计学意义(P＞0.05)。但研究组蜕膜中KIR2DL1蛋白的表达量0.28±0.14显著低于对照组0.71±0.14(P＜0.05)。结论蜕膜组织中KIR2DL1表达量降低,传递给NK细胞的抑制性信号减少，可能影响母胎免疫耐受过程，导致RSA的发生。

新诊断2型糖尿病患者动脉粥样斑块的发病情况及危险因素研究

2009, 47(7): 85-88.

摘要 ( 1115 )

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目的探讨新诊断2型糖尿病合并动脉粥样斑块的发病情况及影响因素。方法对538例新诊断的2型糖尿病患者行颈总动脉、髂总动脉、股动脉超声筛查，根据超声结果分为无斑块组425例（内中膜厚度IMT≤1.3?mm）及斑块组113例（内中膜厚度IMT＞1.3?mm），观察两组间年龄、性别、腰围、体质量指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、空腹血糖（FBG）、餐后2?h血糖（2hBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、胰岛素抵抗指数（HOMAIR）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）和高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）的差异及危险因素。结果①538例新诊断2型糖尿病患者动脉斑块发病率为28.6%；无斑块组颈总动脉、髂总动脉、股动脉IMT分别为（0.74±0.17）mm、（0.74±0.15）mm和（0.74±0.17）mm，斑块组颈总动脉、髂总动脉、股动脉IMT分别为（0.91±0.23）mm、(0.94±0.21)mm和（0.88±0.22）mm，且两组间各动脉的IMT差异具有统计学意义（P<0.05）；②斑块组年龄、腰围、BMI、SBP、DBP、FBG、2hBG、HbA1C、HOMAIR、TG、TC和LDLC平均水平均比非斑块组高（P<0.05），其中两组间年龄、SBP、FBG、2hBG、TG和LDLC的差异有统计学意义（P<0.05）；③多元逐步回归分析结果显示，年龄、SBP、2hPBG和TG为新诊断2型糖尿病患者颈总动脉、髂总动脉、股动脉斑块发生的主要危险因素。结论新诊断2型糖尿病动脉斑块发病率高，仅行颈动脉超声检测漏诊率高，糖代谢异常及脂质代谢紊乱对动脉粥样硬化的发生、发展起着重要作用。

比较基因组杂交技术的改进及其在产前诊断中的应用

2009, 47(7): 89-92.

摘要 ( 1130 )

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目的改进比较基因组杂交（CGH）技术，为产前诊断胎儿染色体异常提供有益手段。方法选取唐氏综合征筛查结果为高风险、细胞遗传学结果异常的孕妇5例，因胎儿畸形、死胎引产的孕妇11例。缺口平移法标记待测DNA和对照DNA，同时将待测DNA和对照DNA的荧光颜色互换，即进行荧光互换CGH，根据绿红两种信号的比值制作CGH拷贝数核型模式图，以1.0表示平衡比例，荧光强度比（FR）阈值定为1.25和0.75。以细胞遗传学检查检验CGH分析的敏感性和可靠性。结果16例孕妇胎儿样本均成功利用CGH方法进行了分析、确认，结果与细胞遗传学分析一致；1例细胞遗传学诊断为4号染色体的长臂远端部分缺失病例，CGH为4号染色体q32qter缺失。CGH分析在荧光互换前后FR曲线并不完全互补。结论CGH技术经荧光互换等改进能最大程度的排除在实验过程中可能产生的误差，可作为产前诊断中传统核型分析的有益和必要补充。

米非司酮对人早孕绒毛组织中TGFβ/smads信号通路功能状态的影响

2009, 47(7): 93-95.

摘要 ( 967 )

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目的研究米非司酮对人早孕绒毛组织中转化生长因子β(TGFβ)信号传导通路功能状态的影响以及与终止妊娠之间的关系。方法用免疫组化SP法和RTPCR方法分别检测药物流产组(20例)和人工流产组（13例）绒毛组织中TGFβ信号传导通路的下游靶基因smad7的蛋白质和mRNA表达水平，结果用平均光密度值和光度比值表示，半定量分析结果。结果药物流产组和人工流产组绒毛组织中smad7的免疫组化结果的平均光密度值分别为0.346?6±0.046?9和0.233?7±0.065?7,P＜0.01。药物流产组和人工流产组绒毛组织中smad7mRNA的平均光度比值为0.561?7±0.410?3和0.222?2±0.244?1,P＜0.02。结论米非司酮能够增强TGFβ信号传导通路的功能，使该信号通路的下游靶基因纤溶酶原激活物抑制物表达增多，降低了滋养细胞的转移、侵袭能力，可能是该药物致早孕流产的机制之一。

血清微量元素含量与乳腺癌风险的关系

2009, 47(7): 96-98.

摘要 ( 1201 )

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目的研究乳腺癌患者血清中微量元素含量与乳腺癌风险的关系。方法应用三电极直流等离子体原子发射光电直读光谱仪（DCPAES）测定88例乳腺癌患者和50例正常对照者血清中Zn、Mn、Al、Cd、Fe、Mg、Ca、Pb、Cu、Ni、Co、Ti、Li和Cr含量，比较两组间血清微量元素含量的差别。结果与正常对照者相比，乳腺癌患者血清中Cd、Mg、Cu、Co、Li和Cr含量明显升高，Mn、Al、Ti和Fe含量则明显降低，差异均有统计学意义（P均＜0.05），而Zn、Ca、Pb和Ni含量差异均无统计学意义（P均＞0.05）。结论血清微量元素含量可能影响乳腺癌风险, 测定血清中微量元素含量可能对乳腺癌有诊断价值。

人类白细胞抗原G在卵巢恶性肿瘤组织中的表达

2009, 47(7): 99-102.

摘要 ( 956 )

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目的探讨免疫抑制分子人类白细胞抗原G(HLAG)在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法，应用抗HLAG单克隆抗体4H84，检测45例原发性卵巢恶性肿瘤和36例卵巢良性肿瘤组织中HLAG蛋白的表达。应用逆转录酶聚合酶链式反应(RTPCR)法分析新鲜卵巢良、恶性组织中HLAG mRNA的表达。结果①免疫组织化学显示，30例卵巢恶性肿瘤组织中有HLAG的表达阳性（66.67%）， HLAG在卵巢恶性肿瘤组织中的表达明显高于良性组织（P＜0.01）;②浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、子宫内膜样癌间HLAG分子的阳性率差异有统计学意义（P＜0.05），HLAG阳性率与年龄、临床分期、病理分级、淋巴结转移无关;③RTPCR结果表明卵巢恶性肿瘤组织中有HLAG mRNA的表达，而卵巢良性肿瘤及卵巢瘤样病变组织中则无HLAG mRNA的表达。结论卵巢恶性肿瘤组织中HLAG mRNA及HLAG蛋白的表达异常，提示在卵巢恶性肿瘤的发生发展中免疫抑制起到重要作用。

ReSTOR多焦点人工晶体的临床应用研究

2009, 47(7): 103-106.

摘要 ( 1616 )

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目的探讨ReSTOR多焦点人工晶体的临床应用效果。方法选取30例（60眼）老年性白内障患者，按统一标准分为两组，其中双眼非同期植入ReSTOR多焦点人工晶体者15例设为MIOL组；双眼非同期植入单焦点人工晶体者15例设为SIOL组。均行角膜缘透明角膜切口，应用超声乳化术摘除白内障联合人工晶体植入。术后1?d观察术眼的屈光状态，裸眼远、近视力；术后1个月观察术眼的屈光状态，裸眼远、近视力，矫正远、近视力，最佳远矫下近视力，焦距深度，对比敏感度，远近立体视锐度，问卷调查视觉质量、各视觉功能区满意度及脱镜率。结果术中术后无严重并发症。两组患者术后均有良好的远视力；MIOL组患者同时获得良好的近、中程视力。术后对比敏感度MIOL组较SIOL组有所下降，但无功能性意义。MIOL组有80%（12例）的患者裸眼近立体视锐度≤60?s，SIOL组所有患者裸眼近立体视锐度≥400?s，差异有统计学意义（χ2=26.28，P＜0.05）；MIOL组有93.33%（14例）的患者矫正近视力下近立体视锐度≤60?s，SIOL组有33.33%（5例）患者矫正近视立下近立体视锐度≤60?s，差异有统计学意义（χ2=12.59，P＜0.05）。MIOL组视近脱镜率80%。结论ReSTOR多焦点人工晶体植入安全有效，可为患者提供良好的全程视力及双眼视觉,患者满意度较高。

耳后筋膜-骨膜瓣在乳突充填术中的应用

2009, 47(7): 107-110.

摘要 ( 1034 )

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目的探讨经设计的各种不同类型的耳后筋膜-骨膜瓣在乳突填塞术中的应用，以达到提高手术效果及患者术后生活质量的目的。方法回顾性分析216例（耳）行耳后筋膜-骨膜瓣填塞乳突根治术腔的患者临床资料。结果术后随访1.5～4.0年，随访率92.6%。术后干耳率为100%，同期行鼓室成形术的126例术后半年平均语频气导、骨导听阈及气骨导差均较术前提高，1例胆脂瘤复发进行二次手术清除。结论经设计的各种不同类型的耳后筋膜－骨膜瓣，应用在乳突填塞术中对于缩小或消除乳突手术腔效果明显。

SERPINE2基因多态性与慢性阻塞性肺疾病的相关性

2009, 47(7): 111-114.

摘要 ( 1149 )

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目的研究血清中丝氨酸蛋白酶抑制剂2(SERPINE2)基因多态性与慢性阻塞性肺疾病（COPD）表型的相关性，探索COPD的发病机制。方法选取100例COPD散发患者作为病例组，同时选100例健康者作为对照组，通过等位基因特异性探针检测血清单核苷酸多态性（SNP），判定单个样本的基因型并进行χ2检验和相关分析。结果rs6734100位点的突变与COPD不存在相关性。结论SERPINE2不是汉族人COPD患者的易感基因。

强化谷氨酰胺的肠内营养对严重颅脑损伤患者应激状态和免疫功能的影响

2009, 47(7): 115-116.

摘要 ( 1062 )

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目的观察应用强化谷氨酰胺的肠内营养对严重颅脑损伤患者应激和免疫状态的影响。方法72例严重脑损伤患者随机分为实验组和常规组，每组36例，放置鼻-十二指肠管，均使用肠内营养支持泵均匀持续滴注的鼻饲方法，实验组使用肠内营养制剂强化谷氨酰胺，常规组使用肠内营养制剂加蛋白粉，两者氨热比值保持一致。2周后抽静脉血，观察两组患者实验前后的应激状态［C3、C4、C反应蛋白(CRP)］和免疫功能（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgA、IgG、IgM）的变化。结果实验结束时实验组C3、C4、CRP低于实验前，实验组C3、C4、CRP含量均低于常规组，差异有统计学意义。实验结束时实验组CD4+、CD4+/CD8+、IgA、IgG均高于实验前，差异有统计学意义，CD4+、CD4+/CD8+、IgA、IgG均高于常规组，差异有统计学意义，两组的CD8+数量的差异无统计学意义(P＞0.05)。结论强化谷氨酰胺的肠内营养能有效地改善严重脑损伤患者的应激和免疫状态。

济南市青少年心理健康素质状况调查

2009, 47(7): 117-121.

摘要 ( 1267 )

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目的了解济南市心理健康素质的现状和发展趋势, 探讨不同类别青少年心理健康素质的差异。方法采用“青少年心理健康素质调查表”对419名大中学生的心理健康素质状况进行调查研究。结果①济南市青少年在适应状况、人际素质、动力系统、认知风格、应对方式得分上均显著高于全国常模（P＜0.01），自我维度得分显著低于常模（P＜0.001）；②济南市青少年心理健康素质多数维度呈现出初二较高，随着年级的升高逐渐下降，高三或大学阶段有所回升的发展趋势；③除自我维度外，男生各维度得分均高于女生（P＜0.001），城市均高于农村（P＜0.01），家庭收入水平中等和较好者高于较低和较高者，父母受教育水平较高者高于较低者。结论济南市青少年心理健康素质状况良好；各类学生心理健康素质的发展模式不同。

蔬菜表面残留磷酸酯类有机磷农药降解方法研究

2009, 47(7): 122-124.

摘要 ( 1296 )

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目的研究经存储、加工等不同处理方法对蔬菜中磷酸酯类有机磷农药残留的降解情况，比较家居生活中常用方法的去除效果。方法选取常用磷酸酯类有机磷农药制成蔬菜农药残留模型，采用不同方法处理，分别检测处理前后蔬菜表面农药残留量，计算去除率。结果蔬菜分别经放置24?h、光照、清水、盐水、碱水、沸水及有机磷农药降解酶处理后，韭菜中敌敌畏、氧化乐果、毒死蜱的平均去除率分别为95.5%～99.9%、22.5%～95.0%、51.7%～94.6%；豆角中敌敌畏、氧化乐果、毒死蜱的平均去除率分别为57.8%～99.9%、34.8%～83.1%、28.0%～73.6%。其中有机磷农药降解酶对敌敌畏去除效果最好，平均去除率为98.1%；沸水对氧化乐果、毒死蜱的去除效果最好，平均去除率分别为89.1%、82.3%。结论7种家居生活中常用方法均能不同程度的去除蔬菜表面磷酸酯类有机磷农药残留，要去除农药并尽可能保留营养素，有机磷农药降解酶的效果最佳。

基于GIS的中国人群乙肝多表位疫苗的预测

2009, 47(7): 125-132.

摘要 ( 1215 )

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目的预测可能的HLAⅠ类限制性HBV特异性CTL表位组合在中国人群的理论免疫应答率，旨在指导乙型肝炎（HBV）多表位疫苗的研制和应用。方法利用“中国多表位疫苗设计的HLAⅠ积累表型频率空间预测系统”计算HLAA、B限制性HBV特异性CTL表位组合在中国人群中的累积表型频率（CPF），得出理论免疫应答率，并绘制CPF预测等值线图，比较结果。结果HLAA或B单一超型组合针对中国人群的理论免疫应答率普遍偏低。HLAA和B超型组合针对中国人群的理论免疫应答率相对较好。结论根据不同HLA组分组合设计的多表位疫苗（或DNA疫苗）在中国各地人群中的免疫效果不同，根据中国人HLA分布特点，进行疫苗理论免疫应答率预测研究，可以指导制备适合中国人群的HBV特异性CTL多表位疫苗，应用前景广阔，有重要的指导意义。

农村卫生适宜技术推广影响因素定性分析

2009, 47(7): 133-135.

摘要 ( 932 )

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目的分析农村卫生适宜技术推广的影响因素。方法通过问卷调查、小组座谈和个人深入访谈定性研究方法收集资料。结果组织管理、技术持有者、技术本身及卫生服务供需双方因素都会影响适宜技术的推广和应用。结论应从研制、评估、转移、培训、服务提供和接受6个环节入手，加强卫生适宜技术推广工作。

稳心胶囊的制备及质量标准

2009, 47(7): 136-140.

摘要 ( 1140 )

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目的建立稳心胶囊的制备方法及质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中甘松、党参、三七进行定性鉴别；用高效液相色谱法测定制剂中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量。结果薄层色谱法专属性强；人参皂苷Rg1平均回收率为96.07%，RSD为0.33%；三七皂苷R1平均回收率为95.98%，RSD为0.56%。结论高效液相色谱法简便、准确，重复性好，可用于稳心胶囊的质量控制。

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