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    2012年 第50卷 第6期 刊出日期:2012-06-10
      
    内分泌与代谢疾病研究
    老年2型糖尿病患者周围神经病变的影响因素
    周雁1,郭立新1,周璐2,汪耀1,牟忠卿1,王晓霞1,于冬妮1,张丽娜11,周璐2,汪耀1,牟忠卿1,王晓霞1,于冬妮1,张丽娜1
    2012, 50(6):  1-4. 
    摘要 ( 834 )   PDF (1001KB) ( 325 )   收藏
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    目的   探讨老年2型糖尿病患者周围神经病变的影响因素。方法   回顾分析1069例≥60岁的2型糖尿病患者资料,根据肌电图分为糖尿病周围神经病变(DPN)组和非糖尿病周围神经病变(NDPN)组,对两组数据比较,探寻DPN的影响因素。结果   ①DPN组873例(81.7%),NDPN组196例(18.3%);②DPN与NDPN两组的年龄分别为(71.20±6.70)岁、(69.54±5.92)岁,糖尿病病程分别为(12.42±8.02 )年、(9.89±7.67)年,糖化血红蛋白(HbA1c)分别为(9.04±2.52 )%、(8.26±1.91)%,性别比(男/女)分别为450/423、83/113,空腹C肽分别为(471.25±320.31)pmol/L、(529.72±298.10)pmol/L,总胆固醇(TC)分别为(4.93±1.27)mmol/L、(4.62±1.09)mmol/L,低密度脂蛋白胆固醇(LDL)分别为(2.95±0.90)mmol/L、(2.77±0.81)mmol/L, 以上各指标差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);③Logistic回归结果显示,DPN与年龄、糖尿病病程、HbA1c、TC有关(OR值分别是1.047、1.042、1.152、1.275)。结论   DPN与老年2型糖尿病患者年龄、糖尿病病程、HbA1c、TC相关,联合控制血糖和血脂对于老年人周围神经病变的防治具有重要意义。

    罗格列酮经LRP-1途径降低糖尿病大鼠脑微/小血管中β-淀粉样蛋白含量的研究
    胥文娟1,朱梅佳2,赵张宁2,孙忠文1,鲍梦馨1
    2012, 50(6):  5. 
    摘要 ( 745 )   PDF (2179KB) ( 355 )   收藏
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    目的   研究罗格列酮对不同病程糖尿病大鼠脑微/小血管中低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的影响及其清除β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)的机制。方法   采用自发性2型糖尿病大鼠(GK大鼠)作为动物模型,将其按病程分为6月龄及3月龄2组,其中6月龄组再随机分为罗格列酮干预组(DM6RSG组)和非干预组(DM6组),3月龄GK大鼠(DM3组)作为病程对照组;采用免疫组织化学法定位检测各组脑微/小血管上Aβ1-40及LRP-1的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组脑组织中Aβ1-40及LRP-1蛋白的表达量,RT-PCR定量检测脑组织中LRP-1mRNA的表达。结果   与DM3组相比,DM6组Aβ1-40的表达明显增加(P<0.01);与DM6组相比,DM6RSG组Aβ1-40的表达明显减少(P<0.01),LRP-1和LRP-1mRNA的表达均明显增加(P均<0.05)。结论   随糖尿病病程增长,Aβ140在脑微/小血管中沉积明显增多,罗格列酮可上调LRP-1和LRP-1mRNA的表达并明显减少Aβ1-40在糖尿病脑组织微/小血管中的沉积。

    型糖尿病患者血清褪黑素水平及分泌节律的改变与氧化应激的关系
    孙东,李明龙,孙晓静,林爱清,张荣荣,潘翠真
    2012, 50(6):  10. 
    摘要 ( 699 )   PDF (926KB) ( 370 )   收藏
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    目的   观察2型糖尿病(T2DM)患者血清褪黑素(MT)水平及节律变化与氧化应激的关系。方法   选择T2DM患者32例(DM组)和正常对照16例(NC组)作为研究对象。DM组又分为合并大血管病变(MV)和无大血管病变(NMV)两个亚组。受试者于02:00(t2)和08:00(t8)抽血测定血清MT、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的水平,以t2和t8时间点的比值表示其昼夜节律的变化。结果   ①与NC组比较,DM组的血清MTt2水平、MTt2/t8的比值均显著降低(P<0.01)。DM组两亚组比较,MV组的血清MTt2水平、MTt2/t8的比值显著低于NMV组(P<0.01)。②DM组的血清SODt2、SODt8的活性显著低于NC组(P<0.01),NOt2、NOt8含量显著高于NC组(P<0.05)。与NMV组比较,MVC组的血清SODt2、SODt8活性显著降低(P<0.01),血清NOt2、NOt8含量显著升高(P<0.05)。③多元线性回归分析显示,MTt2与患者的病程、HbA1c、NOt2呈负相关(P<0.05),与SODt2呈正相关(P<0.01);而MTt8仅与NOt8呈负相关(P<0.05)。结论   T2DM患者存在MT夜间血清水平降低及昼夜分泌节律紊乱,并与机体氧化应激增强有相关性,这可能参与了糖尿病大血管并发症的发生与发展。

    霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响
    王杰1,常相帝1,李冰1,肖晓燕1,张扬1,甄军晖2,姜虹3,胡昭1
    2012, 50(6):  14-19. 
    摘要 ( 762 )   PDF (3697KB) ( 452 )   收藏
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    目的   探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响及其可能机制。方法   雄性SD大鼠28只,随机选取8只作为正常对照组(N组),其余20只注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病模型,并随机分为糖尿病组(DM组)、霉酚酸酯组(M组)。12周后测量大鼠血糖、体质量、肾质量/体质量、24h尿蛋白定量、血肌酐(SCr),观察肾小管间质病理形态学变化,应用免疫组化技术和Western blot检测肾组织中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1 (TGF -β1)的表达。结果   DM组血糖、肾质量/体质量、24h尿蛋白定量、血SCr、肾小管-间质损伤指数(TII)均明显高于N组(P<0.01),M组除血糖、体质量外(P>0.05),其余指标均明显低于DM组(P<0.01);免疫组化结果显示,DM组肾小管上皮细胞胞浆中αSMA、TGF -β1表达均明显高于N组(P<0.01),M组明显低于DM组(P<0.01);Western blot结果显示,DM组肾组织α-SMA、TGF-β1表达较N组分别增加3.4倍与1.1倍,M组肾组织α-SMA、TGF-β1表达较DM组分别下降55%与40%。结论   MMF能下调糖尿病大鼠肾小管上皮细胞αSMA、TG-β1的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化,起到肾脏保护作用。

    FK506对早期糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用
    常相帝1,王杰1,李冰1,甄军晖2,姜虹3,胡昭1
    2012, 50(6):  20-25. 
    摘要 ( 838 )   PDF (4200KB) ( 429 )   收藏
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    目的   探讨FK506对早期糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞损伤的保护作用。方法   将38只正常雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组)8只、糖尿病肾病组(DN组)10只、FK506治疗组(F组)10只、洛汀新治疗组(L组)10只,其中DN组、F组、L组应用链脲佐菌素(STZ)60mg/kg腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。F组成模4周后给予FK506 1mg/(kg·d)灌胃,L组成模4周后给予洛汀新10mg/(kg·d)灌胃,DN组与N组4周后给予等量蒸馏水灌胃,每4周末监测各组大鼠血糖(BS)、体质量(BW)、24h尿蛋白定量,药物干预8周后测定各组大鼠的血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肾质量/体质量(KW/BW),在光镜、电镜下观察肾脏病理组织学改变,应用Western blot印迹检测足细胞特异标记物Nephrin的蛋白表达。结果   ①与N组比较,DN组大鼠BS、SCr、BUN、KW/BW、24h尿蛋白定量均明显上升(P<0.05);与DN组比较,F组和L组上述指标除BS外均明显降低(P<0.05),且F组和L组之间差异无统计学意义(P>0.05);②光镜下,肾组织病理学观察N组无明显异常,DN组可见明显的肾小球体积增大,肾小球系膜细胞增生,系膜区增宽,基底膜增厚;F组、L组较DN组病理改变明显减轻(P<0.05),且F组和L组之间病理改变无显著性差异(P>0.05);③电镜下,DN组肾小球基底膜显著增宽,足突排列紊乱,足突增宽、融合,F组、L组较DN组上述病变有所减轻(P<0.05);④Western blot结果显示,DN组肾组织Nephrin蛋白表达较N组下降60.1%(P<0.05),F组和L组可明显恢复肾组织Nephrin蛋白的表达(P<0.05)。结论   FK506可能部分通过恢复糖尿病大鼠肾组织Nephrin蛋白表达、维护足细胞结构和功能的完整而发挥减少尿蛋白、延缓DN进展的作用。

    冬虫夏草菌丝对糖尿病大鼠肾脏DKK1、β-catenin表达的影响
    杜月娟1,刘元涛2,卢圣霞1,刘晔1,齐文文1,傅余芹1
    2012, 50(6):  26. 
    摘要 ( 807 )   PDF (3066KB) ( 446 )   收藏
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    目的   研究冬虫夏草菌丝对糖尿病大鼠肾脏纤维连接蛋白(FN)、Dickkopf-1(DKK1)及β连环蛋白(β-catenin)表达的影响,探讨其作用效果及机制。方法    Wistar大鼠40只,随机取12只为对照组,28只用链脲佐菌素造模。24只建模成功,随机分为非治疗组(n=12)和虫草菌丝治疗组(n=12)。12周末处死各组大鼠,测定血糖、尿白蛋白肌酐比(UACR)和内生肌酐清除率(Ccr);应用免疫组化、实时荧光定量PCR观察大鼠肾脏DKK1、β-catenin和FN表达的变化;应用Western blot检测 DKK1的表达。结果   与对照组相比,非治疗组和虫草菌丝治疗组大鼠UACR和Ccr明显升高(P<0.05)。免疫组化和PCR结果显示,FN、DKK1 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05)。与非治疗组相比,治疗组大鼠UACR和Ccr显著降低(P<0.05),FN 、DKK1 mRNA及蛋白表达减少(P<0.05)。非治疗组β-catenin蛋白表达较对照组明显减少(P<0.05),治疗组β-catenin蛋白表达明显高于非治疗组(P<0.05)。结论   冬虫夏草对糖尿病大鼠肾脏FN表达具有抑制作用,其机制可能与抑制DKK1、稳定β-catenin有关。

    基础医学
    角膜上皮细胞体外培养技术的研究进展
    王瑞鑫,樊廷俊
    2012, 50(6):  31. 
    摘要 ( 1037 )   PDF (945KB) ( 460 )   收藏
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    体外重建组织工程角膜并将其用于角膜移植是使角膜盲患者复明的惟一有效途径,其中角膜上皮种子细胞的来源成为急需解决的关键问题。由于体外生长的角膜上皮细胞生命周期短,因此通过改进体外培养技术来获得增殖能力强的细胞成为解决角膜上皮种子细胞来源问题的首要任务。本研究从角膜上皮细胞的体外培养技术包括培养方法和培养条件这两方面进行了综述。

    趋化因子RANTES和受体CCR5在心脏移植慢性排斥反应中的表达
    张远浩,宋光民,赵文杰,白宵,张敬国,赵鑫
    2012, 50(6):  38. 
    摘要 ( 704 )   PDF (2396KB) ( 326 )   收藏
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    目的   探讨调节活化正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)及其受体CCR5在心脏移植慢性排斥反应中的表达及意义。方法   健康近交系SpragueDawley(SD)大鼠为受者,Wistar大鼠为供者,采用“套管连接技术”建立颈部心脏移植的实验模型。将SD大鼠随机分为3组:A组(n=12)供、受者均未采用任何治疗;B组(n=12)移植手术后使用环孢素A(CsA)10mg·kg-1治疗受者,术后2~3个月采集移植心脏;C组(n=24)使用供者脾细胞(SPC)及环磷酰胺(CP)预处理受者,其中12只在术后15~60d采集移植心脏(C1组),另外12只术后至少观察半年(C2组)。采用HE染色观察移植心脏组织排斥反应病理改变程度,Van Gieson染色观察移植心脏血管病变(CAV)的血管狭窄程度,免疫组化检测RANTES和CCR5的表达水平。结果   SPC和CP预处理后,移植心脏的存活时间明显延长,RANTES和CCR5在冠状血管和心肌组织中呈低水平表达,移植心脏血管病和心肌纤维化明显减轻;而在急性排斥反应和CsA治疗的移植心脏组织中,RANTES和CCR5的表达水平明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论   移植心脏组织中RANTES和CCR5的表达水平与移植排斥反应的程度密切相关。

    戊二醛鞣制驴心包与牛心包的体外力学性能比较
    陈善良1,许莉2,王雪梅2,刘羽曦3,厉泉2,张辉2,路平2,刘天起2
    2012, 50(6):  42. 
    摘要 ( 892 )   PDF (2432KB) ( 420 )   收藏
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    目的   探讨驴心包在力学性能方面是否符合生物瓣膜的制备条件。方法   用戊二醛鞣制脱细胞处理后的驴心包和牛心包进行对比研究。光镜下观察两组脱细胞效果。力学实验测定两组收缩温度、心包厚度、最大载荷、抗拉强度和撕裂强度。结果   脱细胞处理后,光镜下见戊二醛鞣制的驴心包和牛心包无残存的细胞核,而未经脱细胞处理的驴心包和牛心包可见弥漫性细胞核存在,两种心包无明显差异;驴心包组收缩温度(87.5000±0.5916)℃,牛心包组收缩温度为(87.5600±0.3715)℃,两组差异无统计学意义(P>0.05);取相同心尖部位的驴心包与牛心包比较,驴心包厚度薄,抗拉强度大(P<0.001);两者的最大载荷和撕裂强度差异无统计学意义(P>0.05)。结论   戊二醛鞣制的驴心包在力学性能方面适合制作心脏瓣膜材料。

    心脉隆注射液对新生SD大鼠海马神经干细胞增殖分化的影响
    满潇潇1,于君2,王晓云1,刘震1,罗珊珊1,谢兆宏1,赵翠萍1,毕建忠1
    2012, 50(6):  46-50. 
    摘要 ( 861 )   PDF (2028KB) ( 352 )   收藏
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    目的   初步探讨心脉隆注射液对新生SD大鼠海马神经干细胞增殖分化作用的影响。方法   分离新生SD大鼠海马组织,采用无血清及单克隆培养方式获得大量神经干细胞,将不同浓度心脉隆注射液加入第3代神经干细胞单细胞悬液中有血清贴壁培养并分实验组和对照组,应用免疫荧光及细胞化学染色检测Nestin、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、微管相关蛋白2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,计算MAP2阳性细胞百分率。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察心脉隆注射液对神经干细胞增殖能力的影响。结果   海马NSCs在分化后,各心脉隆注射液干预组MAP2阳性细胞比例均较空白对照组增高(P<0.05),MTT结果显示培养5d后各药物组NSCs增殖能力均较对照组增强(P<0.05)。结论   心脉隆注射液具有促进神经干细胞增殖并向神经元方向分化的作用。

    p38MAPK磷酸化水平及Caspase-3在NMDA诱导的体外培养神经元中的激活及SB203580的保护作用
    刘学文1,朱锦莉2,田步先1,李熙东1,蔡爱民1,邢瑞仙1,张雪杰1,李秋实1
    2012, 50(6):  51-56. 
    摘要 ( 1000 )   PDF (2246KB) ( 318 )   收藏
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    目的   探讨p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化(P-MAPK)水平及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的体外培养神经元中的激活及p38MAPK抑制剂SB203580的保护作用。方法   随机将原代培养7d的大鼠皮质神经元分为对照组, NMDA组,SB203580低、中、高剂量组。对照组仅用DMEM/F12完全培养基,NMDA组去除正常神经元培养液,加入50μmol/L NMDA,处理时间10min;SB203580低、中、高剂量组浓度分别为5、10、20μmol/L,继续培养24h,加入50μmol/L NMDA。采用MTT法评价细胞生存力,丫啶橙(AO)染色检测凋亡细胞数量及乳酸脱氢酶(LDH)含量;免疫细胞化学染色法(IHC)及免疫印记法(WB)检测皮质神经元内PMAPK及Caspase-3的表达水平。结果   与对照组比较,NMDA组的吸光度值明显降低、神经元凋亡明显增加、P-MAPK及Caspase-3表达增加(P均<0.01),SB203580低、中、高剂量组PMAPK及Caspase-3随着浓度的增加表达减少,以高剂量组为明显(P<0.05,P<0.01);与NMDA组比较, SB203580低、中、高剂量组吸光度值均升高,以高剂量组为明显,细胞凋亡数量明显减少(P均<0.05)。结论   P-MAPK及Caspase-3在NMDA诱导的皮质神经元中表达增强,SB203580对NMDA诱导的神经元损伤具有保护作用,其作用机制可能与p38MAPK的活化,进而直接或间接激活Caspase-3的表达有关。

    cyclinD1在卵巢癌裸鼠移植瘤组织中的表达及意义
    代军1,刘培淑1,马道新2,常新忠1,冯进波1,尹格平3
    2012, 50(6):  57-60. 
    摘要 ( 982 )   PDF (1338KB) ( 479 )   收藏
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    目的   探讨细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤组织中的表达及意义。方法   构建人上皮性卵巢癌3AO裸鼠皮下移植瘤模型;设阴性对照组及早、中、晚期3个肿瘤组,应用免疫组化方法及流式细胞术(FCM)检测正常组织及移植瘤卵巢癌组织中cyclinD1的表达。结果   3AO卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型平均成瘤率91.7%。正常组织cyclinD1表达阴性或弱阳性,而卵巢癌组织中cyclinD1呈过表达(54.63%)。早、中、晚期卵巢癌组织中cyclinD1阳性表达率分别是35.00%、55.60%和73.30%,肿瘤细胞凋亡率分别是7.97%、3.45%及1.83%,Mean值分别是23.15、37.31、63.28。结论   cyclinD1在卵巢癌组织中呈过表达,且其表达与移植瘤生长增殖呈正相关,cyclinD1的表达与卵巢癌发生发展关系密切。

    Smac小分子compound 3调节顺铂诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡的研究
    乔真1,刘培淑2,韩冰1,王毓1
    2012, 50(6):  61. 
    摘要 ( 847 )   PDF (1567KB) ( 293 )   收藏
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    目的   探讨Smac小分子compound 3调节顺铂对卵巢癌细胞SKOV3凋亡及生长抑制作用。方法   噻唑蓝法检测Smac小分子compound 3单独应用组、顺铂单独应用组及二者联合应用组对卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制率、存活率的影响;并绘制生长曲线。Annexin V/PI双标流式细胞术检测Smac小分子compound 3单独应用组、顺铂单独应用组及二者联合应用组对SKOV3凋亡率的影响。Western印迹检测Smac小分子compound 3单独应用组、顺铂单独应用组及二者联合应用组对SKOV3的X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP) 、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达影响。结果   Smac小分子compound 3单独应用组、顺铂单独应用组及二者联合应用组12、24、48h SKOV3生长受到抑制,且呈时间依赖性。二者联合应用组与顺铂单独应用组比较生长抑制率明显升高。二者联合应用组的凋亡率高于顺铂单独应用组及Smac小分子compound 3单独应用组。Smac小分子compound 3单独应用组及二者联合应用组SKOV3的XIAP表达降低,二者联合应用组的caspase3的激活片段表达明显高于其他两组。结论   Smac小分子compound 3能够调节顺铂对SKOV3生长抑制作用,促进顺铂对卵巢癌细胞SKOV3凋亡作用。Smac小分子compound 3通过影响XIAP的表达来实现其促凋亡及生长抑制作用。

    辛伐他汀对COPD大鼠肺组织凋亡相关因子的影响
    丁启翠1,王伟1,王永彬1,陈旭东2,吴倩1
    2012, 50(6):  65. 
    摘要 ( 750 )   收藏
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    目的   探讨辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织凋亡相关因子的影响及作用机制。方法   随机将30只大鼠分为正常组、对照组、治疗组。对照组采用熏香烟加气管内滴入LPS法建立大鼠COPD模型,香烟暴露2周后治疗组同时给予辛伐他汀(2.5mg/kg)治疗6周, 8周后处死所有大鼠,HE染色观察大鼠肺组织病理改变,显微图像分析系统计算肺平均内衬间隔和平均肺泡数,免疫组织化学技术检测大鼠肺组织半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的水平。结果   对照组可见肺气肿和气道周围炎性改变,治疗组症状较对照组减轻;与正常组相比,对照组和治疗组肺平均内衬间隔(MLI)、iNOS、Caspase-3增多(P<0.05),平均肺泡数(MAN)、eNOS减少(P<0.05);与对照组比较,治疗组MLI、iNOS、Caspase-3减少(P<0.05),MAN、eNOS增多(P<0.05)。各组大鼠肺组织中Caspase-3与iNOS呈正相关(P<0.05),与eNOS呈负相关(P<0.05)。结论   辛伐他汀通过增加肺组织eNOS表达,降低iNOS及Caspase-3表达,减少COPD肺组织细胞凋亡,在COPD中起到保护性作用。

    人BNIP3真核表达载体和shRNA表达载体的构建及其对肝癌细胞自噬的影响
    孙磊,魏清,张颖,韩丽辉
    2012, 50(6):  70. 
    摘要 ( 905 )   PDF (2452KB) ( 444 )   收藏
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    目的   利用人BNIP3的真核表达载体和靶向BNIP3的shRNA表达载体,研究BNIP3过表达和封闭时对肝癌细胞自噬的影响。方法   从人肝癌细胞系中,通过RT-PCR扩增人BNIP3基因编码区序列,酶切后插入pcDNA3.1-His-C载体,以此构建重组pcDNA3.1BNIP3真核表达载体。同时构建靶向人BNIP3基因的shRNA表达载体pSilencer-BNIP3。分别经测序、酶切、RT-PCR和Western blot等方法对重组载体是否构建成功进行验证。并通过采用Western blot检测自噬标志物LC3蛋白的剪切,研究BNIP3过表达和抑制时对肝癌细胞自噬的影响。结果   pcDNA3.1-BNIP3和pSilencer-BNIP3分别过表达BNIP3和抑制BNIP3的表达。BNIP3过表达能够显著增加肝癌细胞的自噬;BNIP3表达受到抑制时,肝癌细胞的自噬明显减少。结论   成功构建了人BNIP3的真核表达载体pcDNA3.1-BNIP3和shRNA表达载体pSilencerBNIP3,并在人肝癌细胞系中证实BNIP3对肝癌细胞自噬的促进作用。

    EC1基因真核表达质粒的构建及对胃癌细胞增殖的影响
    戴新1,郑燕2,郏雁飞2,肖东杰2,童书青1,汪运山2
    2012, 50(6):  75. 
    摘要 ( 706 )   PDF (2565KB) ( 403 )   收藏
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    目的   构建人分化型胚胎软骨发育基因DEC1真核表达载体,探讨DEC1基因对胃癌细胞增殖的影响。方法   提取人胃癌细胞MGC803总RNA,RT-PCR扩增获得DEC1基因,将DEC1基因插入pGEM-T载体,再插入真核表达质粒pcDNA3,将成功构建的pcDNA3-DEC1载体介导转染MGC-803细胞。通过RT-PCR和Western blot分别检测转染后细胞DEC1在mRNA和蛋白水平的表达;MTT法、免疫细胞化学法检测过表达DEC1基因后MGC-803细胞增殖的变化。结果   转染pcDNA3-DEC1质粒的MGC-803细胞DEC1 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05); MTT试验、ki-67免疫细胞化学染色显示转染后细胞增殖能力明显升高(P<0.05)。结论   DEC1的过表达能明显增强胃癌细胞MGC-803的增殖能力。

    临床医学
    替莫唑胺对高级别脑胶质瘤疗效的Meta分析
    王耀伍1,尹春丽1,张志勇1,张宏义1,张坤1,张志民2,廖珩1
    2012, 50(6):  80. 
    摘要 ( 921 )   PDF (1110KB) ( 549 )   收藏
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    目的   比较不同治疗药物在高级别脑胶质瘤手术治疗后的效果,分析评价替莫唑胺的疗效。方法   利用文献检索方法收集国内使用替莫唑胺治疗高级别脑胶质瘤的文献,对符合入选条件的文献,应用Stata软件中的Meta程序分析替莫唑胺对高级别脑胶质瘤的疗效。结果   入选文献7篇,共纳入病例438例,其中治疗组227例,对照组211例。Meta分析结果显示,合并OR值为3.70,95%可信区间为2.37~ 5.79,Mantel-Haenszel的固定效应模型检验结果Z=5.75,P<0.01,表明替莫唑胺的总体疗效显著高于其他同类药物。结论   替莫唑胺可作为当前阶段治疗高级别脑胶质瘤首选药物。

    脑动静脉畸形合并出血相关危险因素分析
    纪森,王志刚,冀勇,王益华,韩超,姜彬,何伟
    2012, 50(6):  83. 
    摘要 ( 916 )   PDF (911KB) ( 282 )   收藏
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    目的   通过数字减影血管造影(DSA)检测脑动静脉畸形(AVM)血管构筑特征,探讨脑动静脉畸形合并出血的相关影响因素,以期预测脑AVM出血的危险性。方法   采用DSA为87例脑AVM患者行全脑血管造影。采用SPSS18.0软件行单因素和多因素Logistics回顾分析,分析畸形血管团的大小、位置、供血动脉类型、引流静脉数目、引流静脉路径、有无合并动脉瘤、有无合并静脉瘤等因素与畸形血管团破裂出血的关系。结果   单因素分析表明,造成畸形血管团破裂出血的因素包括AVM大小、位置,供应动脉类型,引流静脉支数与合并动脉瘤。多因素Logistics分析发现,畸形血管团破裂出血独立危险因素是引流静脉支数与合并动脉瘤。结论   与脑AVM出血密切相关的危险因素是引流静脉的数目和合并动脉瘤。

    h17细胞相关因子在人脑胶质瘤中的测定
    郑鲲鹏1,宋辉2,樊明德1,张源3,李科1,王成伟1
    2012, 50(6):  87-91. 
    摘要 ( 876 )   PDF (3469KB) ( 474 )   收藏
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    目的   了解Th17细胞相关因子在人脑胶质瘤组织中的表达,确定Th17的存在及浸润程度。方法   应用免疫组化二步法检测Th17细胞相关因子CD4+和IL-17在34例脑胶质瘤和10例正常脑组织病理切片中的表达,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)技术,检测IL-17mRNA、RORγtmRNA在人脑胶质瘤组织中的表达量。结果   IL-17、CD4+在正常脑组织表达不明显,在低级别脑胶质瘤中表达较少,CD4+和IL-17在高级别脑胶质瘤中表达明显,组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。IL-17mRNA和RORγt mRNA在正常脑组织、低级别、高级别脑胶质瘤中的表达量随恶性程度升高而增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论   脑胶质瘤中存在Th17的浸润,其表达量随脑胶质瘤恶性程度的升高而增加。

    全反式维甲酸促人脐血多能干细胞向多巴胺能神经元分化
    李恒1,李晓红2,毕建芬3,陈亚娜4
    2012, 50(6):  92-96. 
    摘要 ( 788 )   PDF (3012KB) ( 506 )   收藏
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    目的   探讨在全反式维甲酸(alltrans retinoic acid, ATRA)作用下,人脐血多能干细胞(cord blood-stem cells,CB-SCs)向多巴胺能神经元的分化潜能。方法   分离、培养CB-SCs后,分为诱导组、神经培养基对照组和无血清培养基对照组。诱导培养12d后,观察干细胞的形态学变化,免疫化学荧光法检测多巴胺神经元标志物的表达。ELISA法检测上清液中多巴胺递质的含量。结果   ATRA处理后,大部分CBSCs出现神经样分化,神经培养基对照组仅少量CB-SCs出现神经样分化,无血清培养基对照组CB-SCs继续扩增而无明显形态学变化;诱导组(48±11)%的细胞酪氨酸羟化酶(TH)表达阳性;神经培养基对照组仅少量TH阳性细胞;ELISA检测结果表明,诱导组多巴胺较神经培养基对照组明显升高(P<0.001)。结论   ATRA可以较为高效地促CB-SCs分化为多巴胺能神经元。

    骨髓增生异常综合征患者骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用
    韩艳鑫,丛雅琴,王志敏
    2012, 50(6):  97. 
    摘要 ( 827 )   PDF (1286KB) ( 392 )   收藏
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    目的   本研究通过检测骨髓增生异常综合征-难治性贫血(MDS-RA)及难治性贫血伴原始细胞增多(MDS-RAEB)患者骨髓间充质干细胞(MSC)转化生长因子(TGFβ1)、肝细胞生长因子(HGF)的表达,探讨MSC的免疫抑制作用在MDS发病中的意义。方法   分离、培养23例MDS患者(MDS-RA组14例, MDS-RAEB组9例)及对照组12例的骨髓间充质干细胞,比较3组MSC的形态,采用实时定量PCR的方法检测骨髓MSC内转化生长因子(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF) mRNA的表达水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测骨髓MSC分泌的TGF-β1、HGF的浓度。结果   3组MSC的形态无明显差异, MDS-RA组和MDS-RAEB组MSC表达和分泌TGF-β1、HGF水平明显低于对照组(P均<0.05),MDS-RA组和MDS-RAEB组MSC表达和分泌TGF-β1、HGF无明显差异(P均>0.05)。结论   MDSRA与MDS-RAEB表达TGF-β1、HGF mRNA的水平及分泌TGF-β1、HGF的浓度水平均较正常减低,导致MSC免疫抑制能力减低,可能与MDS免疫监视低下,出现异常单克隆造血相关。

    膀胱尿道软镜配合筋膜扩张器治疗单纯性尿道狭窄疗效分析
    袁航,金讯波,孙鹏,李鹏
    2012, 50(6):  101. 
    摘要 ( 970 )   PDF (1457KB) ( 602 )   收藏
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    目的   探讨膀胱尿道软镜配合筋膜扩张器治疗单纯性尿道狭窄的临床疗效。方法   回顾性分析自2008年10月至2010年10月,使用膀胱尿道软镜配合筋膜扩张器治疗80例单纯性尿道狭窄患者的过程。分析患者尿道狭窄类型、术后留置尿管时间、术后并发症及预后,评估该手术方式治疗单纯性尿道狭窄的疗效,并对手术技巧及术后处理进行总结。结果   78例患者一次扩张成功,手术时间7~12min,平均9min,无尿道穿孔、尿道撕裂及假道形成等并发症;2例因瘢痕质硬及狭窄段较长扩张失败,最终改行绿激光汽化术治疗。术后随访4~24个月,64例患者随访至今,56例患者经不同次数尿道扩张后,至今排尿情况良好;8例患者因狭窄段瘢痕质硬及扩张后瘢痕缩窄迅速,反复出现尿线变细、排尿困难最终改行绿激光手术治疗。结论   膀胱尿道软镜配合筋膜扩张器是治疗单纯性尿道狭窄简单、安全、有效的方法。

    腺苷受体A3在特发性炎症性肌病中的表达
    遇晓1,于丕先2,赵丹丹3,刘付臣3,焉传祝3
    2012, 50(6):  105. 
    摘要 ( 810 )   PDF (2023KB) ( 734 )   收藏
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    目的   探讨腺苷受体A3(A3AR)在特发性炎症性肌病(IIMs)发病机制中的作用。方法   收集IIMs患者骨骼肌活检组织标本30例,其中皮肌炎(DM)患者15例、多发性肌炎(PM)患者11例、包涵体肌炎(IBM)患者4例;正常对照标本12例。在冰冻切片上行组织化学染色和A3AR抗体免疫荧光染色。结果   A3AR抗体免疫荧光染色阳性见于骨骼肌2型肌纤维胞浆,1型肌纤维胞浆呈阴性;与正常对照比较,30例IIMs患者中22例2型肌纤维胞浆荧光增强。肌纤维膜荧光染色在正常对照呈阴性,而19例IIMs患者呈阳性。血管平滑肌和部分坏死肌纤维A3AR抗体免疫荧光染色呈强阳性。结论   人骨骼肌2型肌纤维表达A3AR;特发性炎症性肌病患者A3AR表达增加,可能对肌纤维的修复和凋亡起双向调节作用。

    血清脂联素、瘦素水平与乳腺癌相关性的初步研究
    张家鑫,马忠兵,于理想,刘丽媛,王斐,郭明明,王峰,余之刚
    2012, 50(6):  110. 
    摘要 ( 767 )   PDF (922KB) ( 345 )   收藏
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    目的   探讨血清脂联素、瘦素水平与乳腺癌的相关性。方法   通过流行病学调查收集新发乳腺癌病例123例,剔除拒绝采集血液标本的病例后得到乳腺癌患者43例。以该43例乳腺癌患者为病例组,以同社区、同年龄(±3岁)为配对标准,选择经临床检查或病理诊断排除乳腺癌的女性为对照组,按照1∶1进行配对,最终入组病例及对照共43对。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清脂联素、瘦素水平,进行配对t检验、χ2检验、条件Logistic回归分析等统计学处理。结果   病例组血清脂联素水平低于对照组,瘦素水平高于对照组,脂联素/瘦素比值(A/L)低于对照组。Logistic回归分析结果显示,A/L与乳腺癌密切相关(OR=6.33,95%CI:1.87~21.40,P<0.01)。结论    人群中乳腺癌患者较非乳腺癌患者有较低的血清脂联素水平,较高的血清瘦素水平。A/L与乳腺癌的发病具有明显相关性,此相关性明显优于单独脂联素或瘦素与乳腺癌发病的相关性。

    涎腺腺样囊性癌免疫组化表达的临床意义
    杨晶磊1,2,徐欣1
    2012, 50(6):  114-118. 
    摘要 ( 1389 )   PDF (2277KB) ( 401 )   收藏
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    目的    观察涎腺腺样囊性癌的免疫组化表达特点,探讨CD117表达对腺样囊性癌预后的意义。方法   采用组织芯片和免疫组化方法,观察41例涎腺腺样囊性癌、19例涎腺基底细胞腺瘤及31例涎腺多形性腺瘤平滑肌特异性肌动蛋白(SMA)、p63基因蛋白(p63 )、S-100蛋白(S-100 Protein)、细胞角蛋白(CKpan)、上皮膜抗原(EMA)、Ki-67核抗原(Ki-67)及C-kit原癌基因(CD117)的表达,总结各抗体在涎腺腺样囊性癌、基底细胞腺瘤及多形性腺瘤中表达的强度和阳性分布模式,分析其诊断、鉴别诊断和预后意义。结果   免疫组化标记SMA、p63、S-100蛋白、CKpan、EMA在涎腺腺样囊性癌、基底细胞腺瘤、多形性腺瘤中显示不同的分布特点。SMA、p63、S-100蛋白标记,腺样囊性癌肿瘤细胞巢周边及筛孔衬覆细胞呈阳性,腺管状结构外层细胞显示阳性;基底细胞腺瘤瘤细胞巢外围及腺管结构外层细胞呈阳性;多形性腺瘤阳性细胞弥漫分布或巣状分布。CKpan、EMA标记,腺样囊性癌肿瘤细胞胞质、胞膜强阳性;基底细胞腺瘤腺样结构内层细胞胞质阳性;多形性腺瘤上皮分化的肿瘤细胞标记阳性,肌上皮细胞分化的肿瘤细胞部分阳性。腺样囊性癌不同预后组Ki-67表达有差别,复发生存病例及死亡病例与无复发生存病例比较,差异有统计学意义(SNK-q检验q值分别为7.4729和5.2186,P<0.01)。死亡病例CD117强阳性表达与无复发生存病例比较,差异有统计学意义(P=0.0394)。Ki-67指数高、CD117表达强阳性者预后较差。结论   SMA、p63、S-100蛋白、 CKpan、EMA的不同表达对涎腺腺样囊性癌、基底细胞腺瘤、多形性腺瘤的诊断和鉴别诊断具有参考价值,Ki-67、CD117的表达与涎腺腺样囊性癌的预后相关。

    济南市体检人群脂肪肝检出率及危险因素
    高西美1,王静2,杨晓云1,高立菊3,王凯4
    2012, 50(6):  119-121. 
    摘要 ( 951 )   PDF (909KB) ( 362 )   收藏
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    目的   了解济南市体检人群脂肪肝患病情况,探讨其主要危险因素,为脂肪肝一级预防提供依据。方法   2011年3月对济南市2 162名18岁以上体检人员进行调查,分析其年龄、身高、体质量、行为习惯及肝功、血脂、空腹血糖等血清学指标,同时行肝脏超声检查。结果   济南市体检人员脂肪肝检出率为20.3%,男性检出率高于女性(P< 0.05),男性40~岁组检出率最高,女性50~岁组检出率最高。Logistic回归分析显示,性别、体质量指数、腰围、血压、空腹血糖水平、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、饮酒等与脂肪肝密切相关。结论   济南市成人脂肪肝检出率较高,且以中老年多见。男性、肥胖、高血压、高脂血症、高血糖、饮酒等是脂肪肝患病的危险因素。

    功能性消化不良患者精神心理因素与十二指肠肥大细胞的相关性
    袁海鹏1,2,李福康2,李改芹2,王晓虹2,李晓沛2,李延青1
    2012, 50(6):  122. 
    摘要 ( 784 )   PDF (1256KB) ( 370 )   收藏
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    目的   探讨精神心理因素和十二指肠黏膜肥大细胞(mast cell,MC)在功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)中的作用。方法   应用医院焦虑抑郁量表(hospital anxiety and depression scale,HADS)评定焦虑(HADS-A)和抑郁积分(HADS-D ),甲苯胺蓝染色计数十二指肠黏膜MC总数及脱颗粒比率。直线相关分析HADSA、HADS-D与十二指肠黏膜MC的相关性。结果   FD患者HADS-A和HADS-D显著高于对照组(P<0.05),十二指肠黏膜MC显著高于对照组(P<0.01),MC脱颗粒比率显著高于对照组(P<0.001)。HADS-A、HADS-D与十二指肠MC计数、脱颗粒比率呈正相关(P<0.05)。结论   FD患者的精神心理异常,可能与十二指肠黏膜MC的数目及脱颗粒比率增高有关。

    公共卫生与管理
    山东省3县农村地区儿童超重肥胖的影响因素分析
    林少倩1,何丕山2,李军1,刘大聪3,高莉洁1,贾兴兵4,李慧1,刘冬梅1,王志萍1
    2012, 50(6):  125. 
    摘要 ( 851 )   PDF (927KB) ( 329 )   收藏
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    目的   了解山东省3县农村地区儿童超重和肥胖现况及其影响因素。方法   于2009年9月至2010年1月随机选取山东省3县17个行政村的7~12岁儿童进行横断面研究;采用χ2检验和非条件Logistic回归模型对儿童超重肥胖的影响因素进行单因素和多因素分析。结果   7~12岁儿童超重和肥胖率分别为11.41%和5.86%,男童和女童之间超重率和肥胖率差异均无统计学意义(P<0.05)。儿童每天看电视时间(OR=3.062, 95%CI:1.708~4.932)、每天睡眠时间(OR=2.693, 95%CI: 1.136~5.641)、油炸食品的食用频率(OR=2.024, 95%CI:1.041~3.570)、膨化食品的食用频率(OR=2.304, 95%CI:1.208~5.416)是儿童超重肥胖的主要影响因素,儿童出生体质量(OR=1.615, 95%CI:1.013~2.742)以及父亲或母亲是否肥胖(OR=1.846, 95%CI:1.109~3.520)也与农村儿童超重肥胖相关联。结论   山东省3县农村地区儿童超重肥胖的比例相对较高,控制农村儿童超重肥胖应重点关注儿童日常生活和饮食习惯。

    大学生伤害与睡眠质量的相关性
    罗艳
    2012, 50(6):  130-132. 
    摘要 ( 763 )   PDF (906KB) ( 305 )   收藏
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    目的   探讨大学生伤害的睡眠质量影响因素,为伤害的预防提供参考依据。方法   整群抽取淮南市某高校一、二年级3154名大学生进行伤害调查,将再发伤害的260名学生作为病例组,按照1∶1配对病例对照进行匹兹堡睡眠质量指数(pittsburgh sleep quality index, PSQI)问卷调查。结果   伤害年发生率为27.65%,以跌落伤发生率最高(19.28%),男生伤害发生率为31.52%,明显高于女生的25.18%(P<0.01)。病例组学生主观睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠障碍和日间功能障碍平均得分均显著高于对照组;多因素Logistic回归分析显示睡眠时间、睡眠障碍和日间功能障碍是伤害的危险因素;睡眠异常学生伤害的相对危险度增加1.91倍。结论   应根据再发伤害大学生睡眠特征采取相应的干预措施预防伤害发生。