当期目录

2013年 第51卷 第06期 刊出日期：2013-06-10

  

基础医学

HO-1对AngⅡ诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的作用

谷颖，王爱红，屈福超，陈东昌，张克，鹿克风

2013, 51(06):  1-4. 

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目的  探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的作用。方法   原代培养1～2d Wistar乳鼠心肌细胞，随机分为对照组、AngⅡ组(加入AngⅡ)、HO-1诱导组(加入AngⅡ和HO-1诱导剂氯化血红素hemin)和HO-1抑制组(加入AngⅡ和HO-1抑制剂锌原卟啉-9 ZnppIX)。采用Western blotting检测心肌细胞HO-1蛋白的表达，Hoechst及流式细胞仪Annexin-V/PI检测细胞凋亡。结果   AngⅡ组较对照组心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05)；HO-1诱导组较AngⅡ组细胞凋亡率明显下降(P<0.05)，HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05)；而HO-1抑制组较AngⅡ组心肌细胞凋亡率及HO-1蛋白表达水平均无明显变化(P>0.05)。结论   HO-1对AngⅡ诱导的乳鼠心肌细胞凋亡具有抑制作用。

瑞舒伐他汀逆转压力超负荷引起心肌肥厚的作用机制

徐雪，梁江久

2013, 51(06):  5-10. 

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目的   探讨瑞舒伐他汀(RSV)逆转腹主动脉缩窄术大鼠引起心肌肥厚的作用机制。方法   28只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、手术组、瑞舒伐他汀小剂量组［4mg/(kg·d)］和瑞舒伐他汀大剂量组［10mg/(kg·d)］，每组7只。腹主动脉缩窄术前5d及术后4周,各组均用相对应剂量的瑞舒伐他汀或生理盐水灌胃。术后4周结束实验，测量4组Wistar大鼠超声心动图参数、左室质量/体质量(LVW/BW)并观察左心室组织横截面细胞面积。采用RT-PCR法检测心肌组织中肥大相关因子ANF、β-MHC mRNA表达水平,Western blot法检测大鼠心肌细胞细胞核内GATA4、磷酸化的GATA4(p-GATA4)蛋白水平。结果   与假手术组相比，手术组舒张期室间隔厚度(IVSd)、左室后壁厚度(LVPWd)、左室质量/体质量(LVW/BW)和左室横截面心肌细胞面积(CSA)均明显增加(P＜0.01)。在瑞舒伐他汀小剂量组与瑞舒伐他汀大剂量组，IVSd、LVPWd、CSA较手术组明显减小(P＜0.01)，LVW/BW较手术组也有较明显的减小(P＜0.05)，且瑞舒伐他汀小剂量组与瑞舒伐他汀大剂量组结果无明显差异(P＞0.05)，即左心室肥厚明显减轻。手术组大鼠左室射血分数(LVEF)较假手术组明显减低，瑞舒伐他汀小剂量组与瑞舒伐他汀大剂量组有明显改善(P＜0.01)。 手术组ANF、β-MHC mRNA表达以及GATA4磷酸化水平较假手术组明显升高(P＜0.01), 瑞舒伐他汀小剂量组与瑞舒伐他汀大剂量组较手术组大鼠左心室组织中ANF、β-MHC mRNA表达以及GATA4磷酸化水平明显降低(P＜0.01)。结论   GATA4可能参与了压力超负荷性引起的心肌肥厚过程，瑞舒伐他汀可抑制压力超负荷性引起的心肌肥厚，其作用机制可能与降低GATA4活性有关。

血管紧张素Ⅱ通过NF-κB信号传导途径促进人脐静脉内皮细胞内皮脂肪酶表达

吴明绘，朱清，岳欣

2013, 51(06):  11-14. 

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目的   探讨血管紧张素Ⅱ促进内皮脂肪酶(EL)表达的信号传导通路。方法   体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分为3组: ①血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激组：在培养液中加入AngⅡ，使之终浓度为10μmol/L；②PDTC预处理组：核因子(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)(10mmol/L)预处理HUVECs 1h后加入AngⅡ(10μmol/L)刺激；③对照组：不加任何刺激因子。上述各组细胞分别孵育2、4、8、12、24h后终止实验，收集细胞，采用western blot法检测不同时间各组EL、NF-κB亚单位p65(NF-κB p65)的表达。结果   ①AngⅡ可以上调HUVECs 的EL、NFκB p65的表达，两者的升高趋势一致。HUVECs经AngⅡ刺激后，在4、8、12h其EL的表达量较对照组明显增加(P均<0.05)； 2、4、8、12h时NF-κB p65的表达量较对照组明显增加(P均<0.05)。②PDTC可以抑制EL的表达。HUVECs经PDTC处理后，其EL蛋白表达量在作用2、4、8、12、24h与AngⅡ刺激组比较明显降低(P均<0.05)。结论   AngⅡ可能通过NF-κB p65信号传导通路促进内皮细胞中内皮脂肪酶EL的表达。

丙戊酸钠增强大鼠胶质瘤C6细胞放射敏感性的体外实验

牛俊婕1,王晗1,2,徐英1，周勇1，姜玉华1

2013, 51(06):  15-19. 

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目的   观察丙戊酸钠(VPA)对C6胶质瘤细胞系的体外放射增敏性，为治疗胶质瘤提供实验依据。方法   体外常规培养C6胶质瘤细胞，采用不同浓度(0、0.25、0.5、1、2、4mmol/L)的VPA，作用于C6胶质瘤细胞不同时间(24、48、72h)后，MTT法检测C6胶质瘤细胞增殖抑制率，选择合适的作用浓度和作用时间；0.5mmol/L VPA作用C6胶质瘤细胞后，分别给予不同剂量(0、2、4、6、8Gy)的X射线，克隆形成实验观察其对C6胶质瘤细胞的放射增敏作用；流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测不同浓度VPA对C6胶质瘤细胞凋亡率的影响；实验分为对照组、药物组、照射组及联合组，实时定量PCR法检测各组凋亡基因Bcl-2及Bax mRNA的表达。结果   VPA对大鼠胶质瘤C6胶质瘤细胞具有增殖抑制作用，且呈浓度、时间依赖性，不同浓度、时间之间比较，差异有统计学意义(P<0.05)；VPA在0.5mmol/L浓度时，对C6胶质瘤细胞毒性较低，且可增加X射线对C6胶质瘤细胞的杀伤作用，放射增敏比为1.30；VPA能够诱导C6胶质瘤细胞凋亡，并且凋亡率随浓度的增高而升高，各浓度之间比较差异有统计学意义(P<0.05)；VPA对C6胶质瘤细胞的凋亡作用，在转录水平可下调Bcl-2表达，同时上调Bax的表达。结论   VPA对大鼠胶质瘤C6胶质瘤细胞具有增殖抑制作用，且呈浓度、时间依赖性。低浓度的VPA对C6胶质瘤细胞毒性较低，但可增加X射线对C6胶质瘤细胞的杀伤作用，其放射增敏机制与直接抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、调节凋亡相关基因的表达有关。

他克莫司对癫痫持续状态大鼠海马PKCδ表达的影响

杨倩倩1，李晓林2，林艳1，王爱华1

2013, 51(06):  20-24. 

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目的   研究氯化锂-匹鲁卡品癫痫持续状态(SE)大鼠模型中海马神经元蛋白激酶Cδ亚型(PKCδ)的表达及他克莫司(FK506)对其的影响。方法   将108只健康成年雄性大鼠随机分为对照组、癫痫组和FK506处理组,每组36只。采用HE染色法观察大鼠癫痫持续状态(SE)后海马神经元的损伤，应用逆转录PCR、免疫组织化学法检测各组大鼠海马PKCδ mRNA及蛋白的表达。结果   对照组PKCδ mRNA和蛋白仅有少量表达；与对照组相比，癫痫组各个时点PKCδ表达均显著增多(P<0.05)，SE后6h PKCδ mRNA表达最高，PKCδ蛋白的平均光密度值SE后12h达高峰(P<0.01)，以后二者均逐渐降低，但72h仍高于对照组水平(P<0.05)；FK506预处理可降低其表达，同时可减轻海马神经元损伤(P<0.05)。结论   FK506可能通过抑制依赖PKCδ的细胞凋亡途径，发挥抗癫痫和脑保护作用。

来曲唑在多囊卵巢综合征促排卵中的应用

王玮1,滑天2,曹金凤1,崔娜1,杨爱敏1,姜蕾1,郝桂敏1

2013, 51(06):  25-28. 

摘要 ( 1050 )   PDF (879KB) ( 162 )   收藏

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目的   比较来曲唑(LE)、克罗米芬(CC)和尿促性素(HMG)在多囊卵巢综合征(PCOS)促排卵中的效果,探讨LE在PCOS促排卵中的优势。方法   有生育要求的PCOS患者150例，共239个促排卵周期，随机分为CC组、LE组、CC+HMG组、LE+HMG组和HMG组。比较各组患者绒促性素(HCG)注射日成熟卵泡(卵泡直径≥14mm)的数量、多于3个卵泡的例数、排卵率、卵泡不破裂黄素化综合征(LUFS)发生率、HCG注射日子宫内膜的厚度、尿促性素用量、诱导排卵时间、周期妊娠率。结果   LE组和LE+HMG组患者HCG注射日成熟卵泡的数量和多于3个卵泡的例数均显著低于其他3组(P＜0.05)；CC组排卵率均低于其他4组，而LUFS的发生率高于其他4组(P＜0.01)；LE组、LE+HMG组和HMG组HCG注射日子宫内膜的厚度均显著高于其他2组(P＜0.05)；LE+HMG组中HMG的用量低于CC+HMG和HMG组(P＜0.05)；HMG组诱导排卵时间显著长于其他4组(P＜0.05)； CC组妊娠率明显低于其他4组(P＜0.05)。结论   在PCOS促排卵中，LE较CC和HMG排卵率高，LUFS发生率低，单卵泡发育率高，HCG注射日子宫内膜的厚度高，妊娠率高，节约促排卵时间和费用。

人脐带间充质干细胞对宫颈癌Hela细胞增殖的影响

刘华1，2，陈亚娜3，郑燕1，陈莉4，李财新4，庄秀萍4，汪运山1，2

2013, 51(06):  29-33. 

摘要 ( 1001 )   PDF (2297KB) ( 111 )   收藏

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目的   探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)对宫颈癌细胞生物学特性的影响。方法   分离培养脐带MSCs，将MSCs或其条件培养基与宫颈癌细胞Hela共培养，生长曲线、集落形成实验及RTPCR分别检测MSCs细胞或条件培养基对Hela细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响。结果   生长曲线结果显示，MSCs细胞及条件培养液可抑制Hela细胞增殖，并呈现一定的浓度依赖性。集落形成实验结果显示，MSCs条件培养液可抑制Hela细胞集落形成能力；RTPCR结果显示，MSCs条件培养基促进Hela细胞P53、Bax及caspase-3基因表达，下调Bcl-2及survivin表达。结论   MSCs体外可促进宫颈癌细胞凋亡，抑制Hela细胞增殖。

抑癌基因PDLIM4在前列腺癌细胞中的差异表达

李先哲1，司曼飞1,2，郭艳霞1，苑辉卿1

2013, 51(06):  34-39. 

摘要 ( 1073 )   PDF (2415KB) ( 198 )   收藏

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目的   探讨PDLIM4基因在正常前列腺上皮细胞(RWPE1)、前列腺癌细胞(PC-3、 DU145、LNCaP)、前列腺癌多药耐药细胞(PC-3/Doc)及其他耐药细胞(K562/A02、H460/Doc)中的差异表达。方法   采用定量PCR(qPCR)、Western blot、免疫荧光等方法检测PDLIM4基因在各种细胞株中的表达；利用Western blo和DNA甲基转移酶(DNMTs)活性检测分析细胞中DNMTs的表达及活性。结果   PDLIM4基因在RWPE1高表达，在DU145、LNCaP细胞中基本无表达，在前列腺癌PC-3细胞中表达甚低，而在与其对应的多药耐药PC-3/Doc细胞中高表达(P<0.05)，并且在耐药细胞株中的高表达具有组织特异性。DNMTs在RWPE1表达水平低于前列腺癌细胞，但在PC-3和PC-3/Doc中无差异。酶活性分析表明，PC-3/Doc中DNMTs的活性低于PC-3细胞(P<0.05)。结论   PDLIM4基因在前列腺癌细胞中低表达，这种特异性的在前列腺癌耐药细胞中表达显著上调可能是由DNMTs活性降低所致。

周期性机械牵张对大鼠肺泡巨噬细胞TLR4表达的影响

王雪芹1，岳忠勇2，李克忠1，马金凤1

2013, 51(06):  40-43. 

摘要 ( 999 )   PDF (927KB) ( 108 )   收藏

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目的   探讨周期性机械牵张对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法   采用美国Flexercell公司生产的Flexercell 4000TTM应力加载系统，对体外培养的AM进行周期性牵张。实验分为机械牵张6h组、8h组(30%应变率，0.3Hz频率，方波)和静止对照组。RT-PCR检测AM上TLR4 mRNA的表达；ELISA检测巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)的浓度；免疫细胞化学法检测AM上TLR4蛋白表达。结果   与静止对照组比较，机械牵张6h组、8h组TLR4 mRNA、MIP-2蛋白及TLR4蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论   机械牵张导致了大鼠肺泡巨噬细胞TLR4和MIP-2表达上调。

染料木黄酮在小细胞肺癌H446细胞中通过抑制FoxM1通路发挥抗肿瘤作用

田甜甜1，李际盛1，王亚伟1，马道新2，王秀问1

2013, 51(06):  44-48. 

摘要 ( 952 )   PDF (2717KB) ( 213 )   收藏

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目的   研究染料木黄酮(genistein)在人小细胞肺癌H446细胞系中的抗肿瘤作用并探讨其分子机制。方法   以不同浓度genistein(10、25、50、75、100μmol/L)处理H446细胞，采用CCK-8法、流式细胞术、质粒转染、Western blotting及 Realtime PCR等技术检测genistein对细胞增殖、凋亡、细胞周期分布以及FoxM1及其下游靶基因表达的影响。结果   genistein引起H446细胞发生药物浓度相关性增殖抑制、凋亡增加及G2/M期细胞周期阻滞(P<0.05)，此过程伴随FoxM1及其靶基因survivin、cyclinB、cdc25B的表达降低(P<0.05)，而FoxM1过表达可部分拮抗genistein的抗肿瘤增殖作用(P<0.05)。结论   genistein可通过诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞抑制H446细胞的增殖，而抑制FoxM1通路是其在小细胞肺癌中发挥抗肿瘤作用的机制之一。

miR-200c在CIK细胞诱导胃癌细胞凋亡中的作用

杜宪红1，邢召全2，焦晋山1

2013, 51(06):  49-52. 

摘要 ( 864 )   PDF (1692KB) ( 158 )   收藏

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目的   观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对胃癌细胞凋亡的影响，探讨微RNA-200c(miR-200c)在此过程中的作用。方法   实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞(MKN-45、BGC-803)miR-200c表达，流式细胞术检测胃癌细胞凋亡。构建包含miR-200c作用位点的psiCHECK2-FAP-1 3’-UTR，转染胃癌细胞，双荧光素酶报告基因试剂盒检测胃癌细胞Fas相关磷酸酯酶-1(FAP-1)荧光素酶活性。结果   CIK细胞促进MKN-45细胞miR-200c表达［(2.10±0.25)倍，P<0.05］及凋亡(P<0.01)，而miR-200c inhibitor能够拮抗此过程(P<0.05)。另外，miR-200c mimics诱导胃癌细胞凋亡(P<0.05)，BGC-803细胞也发现相似趋势。miR-200c直接作用于FAP-1基因3’-UTR区，且CIK细胞降低胃癌细胞荧光素酶活性［MKN-45细胞：(49.67±2.36)%，P<0.01；BGC-803细胞：(43.86±4.41)%，P<0.01］。结论   CIK细胞通过上调miR-200c促进胃癌细胞凋亡，为CIK细胞治疗胃癌提供新的数据。

间歇性缺氧大鼠模型的建立及评价

闫静，侯瑾，盛颖，王波涛，祝康，康全清

2013, 51(06):  53-56. 

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目的   设计制造自动控制间歇性缺氧试验箱，用于儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)间歇性缺氧动物模型的建立及评价。方法   将24只SD大鼠随机分为3组：对照组、轻度缺氧组和重度缺氧组。后两组分别饲养于间歇缺氧箱内，通过调整参数，使大鼠在3个舱中直线往返运行，以实现动物间歇性缺氧。采用夹指型血氧饱和度仪检测不同低氧条件下血氧饱和度，进而模拟符合儿童OSAHS的缺氧条件。结果   经过反复实验，当低氧舱中氧浓度为6%~8%时，轻度组在低氧舱停留8s，过渡舱2s，动物舱停留600s，为1个周期，每天持续循环8h，最后在过渡舱内测得平均血氧饱和度为(85.25±1.75)%。重度缺氧组在低氧舱停留8s，过渡舱2s，动物舱停留150s，为1个周期，每天持续8h，最后在过渡舱测定平均血氧饱和度为(77.63±3.78)%，轻、重度缺氧组大鼠返回动物舱时的血氧饱和度均为98%~100%，均实现了间歇性缺氧。轻度缺氧组睡眠呼吸暂停/低通气指数(AHI)为6 次/h；重度缺氧组AHI为24 次/h。缺氧程度、发生缺氧事件的时间及频率均符合儿童OSAHS轻、重度标准。结论   自行研制的自动控制缺氧试验箱可用于建立儿童OSAHS间歇性缺氧动物模型。

流式细胞术测定蠕形螨基因组大小

苏磊1，郭淑玲1，冯玉新2，肖克源1，朱晓丽1，袁方曙1

2013, 51(06):  57-60. 

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目的   采用流式细胞术(FCM)测定蠕形螨基因组大小，为构建蠕形螨基因文库和筛选功能基因奠定基础。方法   自然沉降法清洗收集蠕形螨，组织匀浆器和超声波破碎螨体，在柠檬酸介质中分离蠕形螨的细胞核。以家鸡血细胞核DNA含量为内标，用FCM测定经碘化丙啶(PI)染色的家鸡血细胞核和蠕形螨细胞核混合样品发出的PI荧光强度，通过比较蠕形螨与家鸡血细胞DNA含量峰值的倍数关系，计算出蠕形螨的基因组大小。结果   采用FCM测得蠕形螨DNA含量约为1.05pg/2C，以1pg DNA相当于978Mb计算得出蠕形螨基因组大小约为512Mb。结论   流式细胞术可快速、精确测定蠕形螨基因组大小，为蠕形螨基因组研究奠定了基础工作。

临床医学

不同病因心房颤动患者卒中危险的评估

付开丽1，张学义2，朱萌3，王志浩1，王华1，钟明1，张运1，张薇1

2013, 51(06):  61-63. 

摘要 ( 1003 )   PDF (905KB) ( 613 )   收藏

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目的   本研究旨在比较不同病因的房颤患者左心耳血栓前状态、血栓形成以及临床缺血性脑卒中发生率的异同。方法   持续性房颤患者140例，按是否存在动脉粥样硬化相关疾病，分为伴有动脉粥样硬化相关疾病组(AS组)和非动脉粥样硬化相关疾病组(NAS组)，应用经胸超声和经食管超声(TEE)技术，比较两组患者心脏结构和功能改变，检测患者左心耳血流速度，观察是否存在重度自发声学显影(SEC)、血栓以及临床是否存在缺血性脑卒中。结果   与NAS组比较，AS组患者左心耳重度SEC(71.6% vs 47.0%)、左心耳血栓 (35.1% vs 16.7%)和缺血性脑卒中(19.8% vs 9.9%)的发生率显著增加(P<0.05)；两组间左室收缩功能、左房内径和面积、左心耳面积和血流速度均差异无统计学意义(P>0.05)。结论   伴有动脉粥样硬化相关疾病的房颤患者左心耳血栓前状态、血栓形成以及临床缺血性脑卒中的发生率显著高于非动脉粥样硬化相关疾病的房颤患者，提示对此类患者的处理需要独特的策略，为房颤患者抗凝治疗的个体化研究提供了依据。

多器官功能障碍综合征患者血清热休克蛋白70的变化及其临床意义

侯云峰1,2，卜培莉1

2013, 51(06):  63-70. 

摘要 ( 814 )   PDF (1309KB) ( 183 )   收藏

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目的   动态监测多器官功能障碍综合征(MODS)患者细胞外(血清)热休克蛋白70(eHSP70)的变化，探讨其与炎症因子间的相关性、与疾病严重程度的关系及其对评估临床预后的价值。方法   收集重症监护病房的MODS患者80例，健康体检人群80例为对照组, 采用ELISA法检测入院时与入院24h后的eHSP70，计算24h内eHSP70的变化值，并测定炎症因子。根据20h后的生存状况，将MODS患者分成存活组和死亡组，比较两组间eHSP70的变化，并进行Logistic回归分析。结果   MODS患者入院时与入院后24h eHSP70水平明显高于对照组(P<0.05)；死亡组较存活组eHSP70显著上升(P<0.05)；eHSP70水平与炎症因子呈正相关；Logistic回归分析表明, APACHEⅡ评分、功能不全器官数目、尤其eHSP70变化值是判断MODS预后的独立可靠的危险因素。结论   MODS患者入院时、入院后24h eHSP70水平及其变化值与疾病严重程度密切相关,并与炎症因子呈正相关,其中变化值是MODS患者预后的独立的预测因素。

替罗非班和磺达肝癸钠联用在急性冠脉综合征中的疗效

高远，张海山，郭亮，李玉泽，关启刚，田文，贾志梅，贾大林，张月兰，齐国先，孙英贤

2013, 51(06):  71-74. 

摘要 ( 951 )   PDF (918KB) ( 194 )   收藏

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目的   评估非ST段抬高急性冠脉综合征(NSTEACS)患者经皮冠状动脉介入(PCI)手术期联合应用替罗非班和磺达肝癸钠的效果。方法   连续入选211例NSTEACS患者，随机分为实验组105例(围术期联合应用替罗非班和磺达肝癸钠)，对照组106例 (围术期单独应用磺达肝癸钠)。对比两组术后冠脉血流校正的心肌梗死溶栓(TIMI)帧数(CTFC)计数、心肌坏死标志物升高及术后6个月主要心脏不良事件(MACE)的发生率。结果   与对照组比较，实验组患者PCI术后CTFC得到明显改善；PCI术后24h心肌坏死标志物的升高实验组明显低；实验组患者术后6个月的MACE发生率明显下降；但出血发生率不增加。结论   NSTEACS患者围PCI手术期联合应用替罗非班和磺达肝癸钠可改善心肌灌注，减少CTFC、围PCI术期心肌损伤及MACE发生率。

SOCS-3和3-OST-2基因甲基化在子宫内膜癌中的作用及其临床病理意义

陈海燕，姚树哲，张晓莹，张建平，张翠娟，张廷国

2013, 51(06):  75-80. 

摘要 ( 1075 )   PDF (1156KB) ( 131 )   收藏

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目的   研究子宫内膜癌(EC)中相关抑癌基因(SOCS-1、SOCS-3、3-OST-2、DLC-1)的启动子甲基化状态，探讨其临床病理意义。方法   收集60例EC、79例增生子宫内膜和27例正常子宫内膜标本，运用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测4个抑癌基因的甲基化状态；MSP和实时荧光定量PCR法检测表观遗传学药物处理前后Ishikawa细胞株中抑癌基因甲基化及mRNA表达变化。结果   在EC中,SOCS-1和DLC-1基因甲基化率较低(分别为13.3%和21.7%),SOCS-3和3-OST-2基因甲基化率很高(分别为88.3% 和78.3%)，且SOCS-3在复杂和不典型增生中就出现高频率的甲基化(分别为53.3%和54.2%)。3-OST-2甲基化与肿瘤分化呈正相关(P＜0.05)。SOCS-3和3-OST-2在Ishikawa细胞株中均呈完全甲基化状态，DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂5-Aza-dC或组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂TSA处理后甲基化均得到部分逆转，mRNA表达明显增加，且TSA效果优于5-Aza-dC；两药联合处理后甲基化被完全逆转，mRNA水平显著升高。结论   SOCS-3、3-OST-2基因启动子甲基化在EC中是一个频发事件，且SOCS-3甲基化的发生早于3-OST-2。DNA甲基化和组蛋白修饰共同参与了3-OST-2和SOCS-3的基因表达调控，并存在交叉作用。

正常妊娠不同时期胎盘组织中chemerin的表达

张艳慧1，马玉燕1，杨宁2，张匀2，菅凤1，王琳琳1,刘振平2

2013, 51(06):  81-83. 

摘要 ( 923 )   PDF (1665KB) ( 170 )   收藏

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目的   探讨正常妊娠不同时期胎盘组织中chemerin水平变化，及其与妊娠进展的关系。方法   选取妊娠早期孕妇20例，妊娠中期孕妇15例，妊娠晚期孕妇30例，采用免疫组织化学技术和实时定量PCR技术检测各妊娠组胎盘绒毛组织中chemerin水平。结果   chemerin阳性染色颗粒主要表达于胎盘组织中的合体滋养细胞及细胞滋养层细胞胞质中，各期均有不同程度的表达，妊娠晚期近临产组chemerin表达水平与早、中期妊娠组相比明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论   chemerin可能在维持妊娠期间母胎免疫应答中起重要的作用。

艾塞那肽对肥胖2型糖尿病患者血清nesfatin-1水平及肝脏脂肪含量的影响

孙丽萍1，高燕燕1，李莉1，杨青2，宁周雨2

2013, 51(06):  84-88. 

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目的   比较艾塞那肽治疗前、后肥胖2型糖尿病患者糖脂代谢、血清nesfatin-1水平和肝脏脂肪含量(LFC)的变化。方法   采用自身治疗前后对照的方法，对15例应用口服降糖药和(或)胰岛素治疗3个月以上血糖控制不佳的肥胖2型糖尿病患者加用艾塞那肽，随访8周，观察治疗前后体质量、腰围、体质量指数(BMI)、血压、血脂、空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹C肽、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMAIR)、LFC和nesfatin-1水平的变化及药物不良反应。应用质子磁共振波谱分析(1H-MRS)定量测定LFC。结果   与基线水平比较，加用艾塞那肽后体质量、2hPG、HbA1c、收缩压较治疗前显著下降(P＜0.01)。FBG、HOMA-IR、舒张压较治疗前明显降低(P＜0.05)。治疗8周后nesfatin-1较治疗前明显升高(1.32±0.47 vs 0.92±0.62，P＜0.05)，LFC较治疗前显著下降［12.10(7.90%~21.20%)% vs 7.60(5.30%~15.60%)%，P＜0.01］。多元逐步回归分析显示，HOMA-IR和BMI的下降为LFC下降的独立影响因子。结论   艾塞那肽可有效控制2型糖尿病患者的血糖，同时具有提高nesfatin-1水平及降低肝脏脂肪含量的作用，该药有望成为肥胖2型糖尿病患者的新选择。

SLC11A1、SGPP2基因多态性与山东汉族类风湿关节炎的关联性

于成成1，李璐2，户中丹1，张源潮1，杨清锐1

2013, 51(06):  89-93. 

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目的   探讨SLC11A1和SGPP2基因的单核苷酸多态性(SNPs)与山东汉族人群类风湿关节炎(RA)的关联。方法   采用Realtime PCR法对山东汉族134例RA患者(RA组)和242例健康者(对照组)SLC11A1基因的rs1059823、rs2695343位点和SGPP2的rs13382934、rs2009150位点及进行检测，采用SPSS13.0软件对其分析，数据分析采用χ2检验和Fisher确切概率法。结果   RA组SLC11A1基因的rs1059823、rs2695343位点及SGPP2的rs13382934、rs2009150位点与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论   SLC11A1和SGPP2基因与山东汉族人群RA的易感性无关。

ETS基因重排在前列腺癌中的特征分析

戚美1，杨晓庆1，王林1,2，张娟3，王妍3，韩博1,3

2013, 51(06):  94-99. 

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目的   确定前列腺癌人群中ETS家族常见成员基因ERG、ETV1、ETV4和ETV5重排的发生频度；分析ERG基因重排与常见临床及分子病理学指标的关联；验证ERG过表达是否促进前列腺癌细胞上皮间质转化(EMT)。方法   荧光原位杂交技术(FISH)检测128例前列腺癌患者肿瘤组织中ERG、ETV1、ETV4和ETV5基因的重排和PTEN基因的缺失；免疫组织化学PV-9000二步法检测前列腺癌组织中雄激素受体(AR) 及转录因子SOX4的表达；采用siRNA、Real-time PCR和Western blot检测ERG与前列腺癌细胞EMT的关联。结果   ERG在前列腺癌人群中重排发生率为23% (25/108)，其中60%(15/25)的ERG重排患者伴有ERG 5’ 端的缺失。ETV1、ETV4和ETV5的重排发生率分别为2% (2/109)、 1%(1/103)和0%。ERG基因重排与肿瘤远处转移呈正相关(P<0.05)，但与Gleason 评分、术前PSA水平及肿瘤临床分期等无关联。ERG基因重排与PTEN基因的缺失、SOX4蛋白的表达均呈正相关(P<0.05)，但与AR的表达未见相关性；体外实验显示，干扰ERG的表达可抑制前列腺癌Vcap细胞EMT的发生。结论   ERG基因重排在我国前列腺癌患者中的发生频率较西方国家低。ERG基因重排与EMT相关，并可能与其他基因协同发挥促癌作用。

21mm机用镍钛锉在后磨牙根管治疗中的应用

徐冬梅

2013, 51(06):  100-102. 

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目的   评价21mm长度ProTaper机用镍钛器械用于后磨牙根管预备的临床疗效。方法   选择临床需要根管治疗的后磨牙病患者198例，198颗患牙，随机分为两组：PT组使用21mm长度ProTaper机用镍钛锉、冠向下法预备根管；K锉组使用手动不锈钢K锉、步退法预备根管。两组均采用冷侧压法充填根管，摄片比较两组根管充填质量。记录根管预备术后疼痛反应和根管充填情况。结果   PT组预备术后疼痛反应明显低于K锉组(PT组反应发生率为3.03%，K锉组为18.18%)；根管充填情况明显优于K锉组(PT组适充发生率92.53%，K锉组为85.16%)。结论   21mm ProTaper机用镍钛锉应用于后磨牙根管治疗，能使根管预备术后疼痛反应明显减轻，根管充填效果满意。

膝关节骨关节炎患者与健康成年人股骨髁间窝宽度、高度的MR测量及比较

齐萌1，王颖2，陈绍明3，王一兵2，叶颖2，吴文浩2

2013, 51(06):  103-105. 

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目的   比较膝关节骨关节炎患者与健康成年人髁间窝宽度与高度的差别，分析髁间窝形态与骨关节炎的关系。方法   选取112例膝关节骨关节炎患者和150例健康成年人，进行膝关节MR扫描，并在MR图像上测量膝关节髁间窝的高度及宽度；将所得结果按性别分组并进行比较。结果   健康成年人组髁间窝宽度为(21.23±2.81)mm，骨关节炎组为(17.72±2.66)mm，二者有明显统计学差异(P＜0.001)；健康成年人组髁间窝高度为(28.83±2.9)mm，骨关节炎组为(23.04±3.20)mm，二者有明显统计学差异(P＜0.001)。结论   膝关节骨关节炎患者的髁间窝宽度及高度明显小于健康成年人，骨关节炎的发生可能与髁间窝狭窄有关。

Toll样受体4在小儿哮喘致病机制中的作用

周佳丽1,2,张岩1,王东明2,张艳2

2013, 51(06):  106-109. 

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目的   分析小儿哮喘患者外周血单核细胞(PBMCs)中Toll样受体4(TLR4)的表达及其与PBMCs培养上清中IL-6和TNFα浓度的相关性，探讨TLR4在小儿哮喘发病中的作用。方法   将40例哮喘患儿分为哮喘发作组和哮喘静止组(各20例)，以健康查体儿童20例为正常对照组。采用实时荧光定量逆转录PCR方法检测三组PBMCs中TLR4 mRNA的表达水平，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测PBMCs培养上清IL-6和TNFα的浓度。结果   哮喘发作组PBMCs中TLR4 mRNA的表达水平高于哮喘静止组和正常对照组(P均<0.05)，在哮喘发作组PBMCs培养上清中IL-6和TNFα的浓度较哮喘静止组和正常对照组高(P均<0.05)，通过TLR4阻断剂抑制其作用后，上清中IL-6和TNFα表达水平降低，而TLR2阻断剂对以上两种细胞因子的表达量无影响。结论   TLR4及其对固有免疫反应的调节在小儿哮喘发病机制中起重要作用，其机制可能与促进IL-6和TNFα等细胞因子的分泌有关。

病例报道

哌拉西林舒巴坦钠(4∶1)过敏致哮喘患儿心脏骤停1例

吴平

2013, 51(06):  110-110. 

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儿童急性鼻窦炎并发眶蜂窝织炎1例

牟鸿1，刘俊杰2，李东梅1，郭忠凤1，赵春1，张建基1

2013, 51(06):  111-112. 

摘要 ( 910 )   PDF (836KB) ( 292 )   收藏

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