当期目录

2013年 第51卷 第5期 刊出日期：2013-05-10

  

基础医学

心肌梗死后Neurturin动态表达与心脏迷走神经重构的相关性

索菲1，胡和生2，薛梅2，王晔1，轩永丽1，闫素华2

2013, 51(5):  1-5. 

摘要 ( 974 )   PDF (2537KB) ( 329 )   收藏

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目的  探讨Neurturin(NRTN)在心肌梗死后的动态表达及其与迷走神经重构的关系。方法  选用SPF级Wistar健康雄性大鼠54只，随机分为心肌梗死3d组(n=10)、心肌梗死1周组(n=10)、心肌梗死4周组(n=10)和各自对应的假手术组(n=8)。利用结扎冠状动脉左前降支的方法制备大鼠心肌梗死模型。从各组大鼠梗死周边及左室游离壁(LVFW)取材，采用RT-PCR、Western blot法检测NRTN的mRNA及其蛋白表达，RT-PCR、免疫组织化学法检测迷走神经的表达及支配。结果  心肌梗死1周组大鼠梗死周边心肌中NRTN mRNA及蛋白的表达显著增加，且高于心肌梗死3d组及心肌梗死4周组(P<0.01)。心肌梗死3d组梗死灶周边ChAT阳性神经纤维密度及mRNA含量低于假手术组，而心肌梗死1周组及4周组ChAT阳性神经纤维密度及mRNA含量明显高于相应假手术组，且高于心肌梗死3d组(P<0.01)。结论  心肌梗死后NRTN的动态表达与迷走神经重构密切相关，通过调节NRTN的表达可能有利于纠正心肌梗死后心脏自主神经失衡并改善预后。

海风藤提取物对Aβ寡聚体激活的小胶质细胞释放炎性因子的抑制作用

韩晓娟1，马学强2，杜怡峰1

2013, 51(5):  6-10. 

摘要 ( 804 )   PDF (21098KB) ( 283 )   收藏

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目的   探讨Aβ寡聚体(Aβo)激活小胶质细胞释放相关炎性因子的作用及海风藤提取物对该过程的影响。方法   取Wistar乳鼠的大脑皮层，进行小胶质细胞原代培养、分离、纯化并鉴定；采用醇提取法制备海风藤提取物，将提取物与DMSO按4∶1混合后加生理盐水并用0.22μm微孔滤膜过滤；将纯化后的小胶质细胞按相同密度种植于48孔板，分为空白对照组、Aβo组、Aβo+海风藤提取物组和Aβo+DMSO组；采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定培养基上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的浓度。结果   与空白组对照相比，经Aβo处理的小胶质细胞产生的炎性因子明显增加；Aβo+海风藤提取物组的炎性因子浓度低于Aβo组(P<0.05)。结论   Aβo能激活小胶质细胞并导致其释放大量炎性因子，而海风藤醇提取物能抑制该过程中炎性因子的释放。

海风藤提取物对激活的小胶质细胞IL-1β和TNF-α表达的影响

亓珅，韩晓娟，王璐，张清华，杜怡峰

2013, 51(5):  11-14. 

摘要 ( 731 )   PDF (1430KB) ( 418 )   收藏

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目的  研究海风藤提取物对不同聚集状态的β淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）诱导小胶质细胞中炎性因子白细胞介素1β(IL-1β) 和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法  体外培养小鼠小胶质细胞株BV2，制备寡聚体和纤丝状Aβ1-42，应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度的海风藤提取物对BV2细胞活力的影响；BV2细胞分为4个实验组，分别采用寡聚体Aβ1-42、寡聚体Aβ1-42+海风藤提取物、纤丝状Aβ1-42、纤丝状Aβ1-42+海风藤提取物干预48h，并设空白对照组，应用实时荧光定量PCR测定各组IL-1β和TNF-α的表达水平。结果  海风藤提取物在10~80g/L范围内对细胞活性无影响；实时荧光定量结果显示，4个实验组的小胶质细胞表达IL-1β和TNF-α的水平均高于空白对照组。寡聚体Aβ1-42+海风藤提取物组IL-1β和TNF-α的表达水平低于寡聚体Aβ1-42组，纤丝状Aβ1-42+海风藤提取物组IL-1β和TNFα的表达水平低于纤丝状Aβ1-42组。结论  炎性指标IL-1β和TNF-α的表达增高证明寡聚体和纤丝状Aβ1-42均能激活小胶质细胞；IL-1β和TNF-α的表达降低，表明海风藤提取物可以抑制寡聚体和纤丝状Aβ1-2对小胶质细胞的激活。

尾加压素Ⅱ对大鼠肺动脉平滑肌细胞胶原合成的影响

孟庆红1，赵翠芬1，孔清玉1，李福海1，李栋2，夏伟1

2013, 51(5):  15-19. 

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目的   研究尾加压素Ⅱ（UⅡ）及其受体拮抗剂Urantide(UR)对培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。方法   以组织贴块法培养的大鼠PASMCs为研究对象，采用BrdU掺入实验观察不同浓度UⅡ（1×10-10～1×10-7 mol/L）及Urantide对PASMCs增殖的影响；采用Western blotting及Realtime PCR法，分别在蛋白和基因水平检测不同浓度UⅡ及Urantide对Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。结果    UⅡ(1×10-9～1×10-7mol/L)浓度依赖性地促进PASMCs增殖（P<0.05，P<0.001,P<0.001），增加PASMCs中Ⅰ、Ⅲ型胶原基因及蛋白表达（P<0.01，P<0.001），而1×10-10 mol/L UⅡ对PASMCs增殖及Ⅰ、Ⅲ胶原基因和蛋白表达无明显作用（P>0.05）；UⅡ受体拮抗剂Urantide可拮抗 UⅡ的上述作用（P<0.01）。结论   UⅡ通过与大鼠PASMCs的UⅡ受体UT结合而发生一系列诱导作用，最终引起PASMCs增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原合成增加，Urantide通过竞争性结合UT而阻断UⅡ与UT的结合，使UⅡ无法发挥诱导作用。

EGFR和HER-3在人肺腺癌细胞及培美曲塞二钠耐药细胞中的表达差异

刘冰1，于壮1，侯宪鹏1，姚如永2

2013, 51(5):  20-23. 

摘要 ( 770 )   PDF (955KB) ( 447 )   收藏

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目的   探讨EGFR和HER-3基因在人肺腺癌细胞株A549和培美曲塞二钠(PEM)诱导的耐药细胞株A549/PEM中的表达变化。方法   用大剂量PEM诱导、建立耐药细胞株A549/PEM，CCK-8法检测A549和A549/PEM细胞的增殖抑制率，流式细胞术检测细胞的周期分布，RT-PCR检测EGFR与HER-3 mRNA在A549和A549/PEM细胞中的表达量。结果   CCK-8法测得PEM对A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为3.43×10-6mol/L，用PEM反复处理细胞4个月，成功诱导出耐药指数(RI)为5.15倍的耐药细胞株A549/PEM。流式细胞术检测结果显示，A549和A549/PEM 细胞处于G1/G0期的比例分别为(56.25±0.10)％和(65.12±0.40)％(P＜0.05)，处于S期的细胞比例分别为(40.87±0.30)％和(31.74±0.40)％(P＜0.05)。EGFR mRNA 在A549和A549/PEM细胞中的相对表达量分别为0.55±0.08和0.64±0.07，HER-3 mRNA在A549和A549/PEM细胞中的相对表达量分别为1.29±0.03和1.56±0.12，其差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论   与A549细胞相比，A549/PEM中EGFR和HER-3的表达量均增高，提示这两种基因表达量的变化可能与PEM耐药相关。

Tet-on系统诱导COX1基因在小鼠前脂肪细胞3T3-L1中的表达

张玉颖，张晾，潘杰

2013, 51(5):  24-28. 

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目的   利用Tet-On诱导表达系统，调控目的基因环氧化酶(COX)的表达，探讨COX对脂肪细胞分化的作用，为进一步深入研究肥胖的致病机制奠定理论基础。方法   脂质体介导调控质粒pTet-On转染3T3-L1细胞，G418筛选单细胞克隆，RT-PCR法检测四环素反应转录活化因子(rtTA)基因的整合；pTRE-Tight-Luc质粒瞬时转染含rtTA基因的细胞克隆，强力霉素(DOX)诱导表达后检测荧光素酶活性，筛选出高效表达的抗性克隆，命名为3T3-L1-Tet-On-26#；构建重组质粒pTRE-Tight-COX1，双酶切鉴定后测序，将测序正确的重组质粒瞬时转染3T3-L1-Tet-On-26#细胞克隆，免疫荧光检测COX1的表达。结果   建立了3T3-L1-Tet-On细胞模型；成功构建了pTRE-Tight-COX1重组质粒，瞬时转染3T3-L1-Tet-On-26#，DOX诱导后COX1表达显著升高。结论   诱导表达细胞株3T3-L1-Tet-On的建立为COX1功能基因的研究提供了平台。

健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下肾小球系膜细胞增殖的影响

刘丹丹1,高聆2，赵家军1，韩文霞1

2013, 51(5):  29-32. 

摘要 ( 777 )   PDF (1284KB) ( 308 )   收藏

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目的   探讨健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)增殖的影响及对转化生长因子-β1(TGF-β1)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达的影响。方法   将常规培养的RMCs分为对照组(5.6mmol/L葡萄糖组)、甘露醇组(5.6mmol/L葡萄糖+24.4mmol/L甘露醇)、高糖组(30mmol/L葡萄糖组)、高糖+中药复方组(30mmol/L葡萄糖+0.65mg/mL中药复方)。培养48h，采用4 -甲偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况，分析健脾益肾、活血化瘀中药复方对高糖刺激下RMCs增殖的影响。酶联免疫法检测TGF-β1的表达，实时定量PCR法检测BMP-7 mRNA的表达。结果   高糖组RMCs增生及TGF-β1的表达较对照组增加明显，BMP-7 mRNA的表达则明显下降，高糖+中药复方组较高糖组RMCs增生及TGF-β1的表达明显下降，BMP-7 mRNA的表达明显升高。结论   健脾益肾、活血化瘀中药复方能够抑制高糖刺激下的RMCs增殖及TGF-β1的表达，并上调BMP-7 mRNA的表达。

分泌表达肾癌抑制融合肽的重组腺伴随病毒对肾癌移植瘤的疗效

张斌1，陈杰2，刘雁3，张士宝2，刘双庆2，刘波2，王全颖4，杨广笑4，刘庆勇2

2013, 51(5):  33-36. 

摘要 ( 741 )   PDF (2307KB) ( 166 )   收藏

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目的   观察分泌表达NT4-TAT-6×His-VHLβ肾癌抑制融合肽的重组腺伴随病毒作用于肾癌鸡胚移植瘤的疗效。方法   将人肾癌细胞系RLC-310接种到鸡胚绒毛尿囊膜上。选取成瘤较好鸡胚，分别用rAAV/NT4-TAT-6×His-VHLβ(A组)、空病毒(B组)、PBS缓冲液(C组)进行干预，观察移植瘤生长及各组移植瘤的大小，采用HE染色及免疫荧光法比较各组的作用效果。结果   A组移植瘤生长速度明显慢于其他两组；A组移植瘤体积与B、C两组比较差异有统计学意义(P<0.05)；HE染色结果显示，A组鸡胚移植瘤生长受到抑制；荧光显微镜可观察到A组荧光明亮(++)，对照组未观察到荧光(-)。结论   rAAV/NT4-TAT-6×His -VHLβ对肾癌鸡胚移植瘤有抗肿瘤效应，为肾癌的基因治疗研究提供了一种新的途径。

阻断EGFR和mTOR信号通路对C6胶质瘤及其干细胞的影响

王通，刘玉光，张良文，王宏伟，李连陵,刘志国

2013, 51(5):  37-43. 

摘要 ( 849 )   PDF (10266KB) ( 199 )   收藏

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目的   探讨埃罗替尼(Erlotinib)和雷帕霉素(Rapamycin)抑制胶质瘤细胞增殖的可能机制，为胶质瘤靶向治疗提供新思路。方法   采用无血清培养基培养C6细胞，获取C6胶质瘤干细胞(GSCs)，细胞免疫荧光染色检测CD133和nestin鉴定胶质瘤干细胞； CCK-8、RT-PCR和Western blot检测经Erlotinib、Rapamycin干预后，肿瘤细胞增殖和细胞周期与EGFR和mTOR信号通路相关基因蛋白EGFR、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、rps6k、p-rps6k表达变化的关系。结果   胶质瘤干细胞表达CD133、Nestin；Erlotinib、Rapamycin对C6及C6 GSCs均呈剂量-时间依赖性抗增殖作用(P<0.05)。Erlotinib与Rapamycin能够增加Gl期细胞比例，减少S期比例，而且C6 GSCs对Erlotinib、Rapamycin的敏感性低于C6细胞(P<0.05)；用药组与空白对照组相比，细胞中EGFR和mTOR 通路中相关蛋白表达明显下调(P<0.05)，联合用药组效果更明显。结论   胶质瘤C6细胞系中存在一定量的肿瘤干细胞；Erlotinib与Rapamycin通过阻断EGFR和mTOR抑制C6、C6 GSCs生长增殖、细胞周期。

熊去氧胆酸对大鼠肝癌发生的抑制作用及机制

王夏青，韩国庆，盛瑜，刘慧，孟玫，秦成勇，谷旭

2013, 51(5):  44-47. 

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目的   研究熊去氧胆酸(UDCA)对大鼠肝癌发生的抑制作用并探讨其机制。方法   利用二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝癌模型，75只雄性Wistar大鼠随机分为5组：正常对照组、UDCA对照组、DEN组、UDCA高和低剂量组。DEN组及UDCA高低剂量组均给予DEN腹腔注射(20mg/kg)，正常对照组及UDCA对照组给予等剂量的生理盐水腹腔注射。同时UDCA对照组及UDCA高低剂量组分别按30、 30、15mg/kg给予UDCA灌胃，正常对照组及DEN组给予等量生理盐水灌胃。观察大鼠肝质量、体质量及肝脏系数的变化；并检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及甲胎蛋白(AFP)的含量；采用实时定量RTPCR检测不同组间DNA损伤修复基因hMTH1在大鼠肝脏中的表达。结果   与正常对照组相比，DEN组大鼠的体质量明显降低，肝质量和肝脏系数明显增加，ALT、AST及AFP的含量均明显升高(P<0.05)；与DEN组相比，UDCA高低剂量组各项指标明显好转。实时定量RTPCR显示，hMTH1在DEN组大鼠肝脏中的表达较正常对照组明显升高(P<0.05)；UDCA高低剂量组大鼠肝脏中hMTH1的表达较DEN组明显降低(P<0.05);且hMTH1在UDCA高剂量组中的表达也较UDCA低剂量组明显降低(P<0.05)。UDCA对照组与正常对照组相比，各项指标无统计学差异。结论   UDCA对大鼠肝癌发生有抑制作用，并能够抑制DNA损伤修复基因hMTH1的表达，其效果和剂量呈正相关,提示UDCA对肝癌的抑制作用可能与抑制氧化应激有关。

猪脱细胞基质矿化支架材料的生物相容性及降解特性

陈荟，郭泾

2013, 51(5):  48-53. 

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目的   探讨猪脱细胞基质矿化支架材料的生物相容性及体外降解特性。方法   体内实验将猪脱细胞基质矿化支架材料(HAPADM)、猪脱细胞基质支架材料(PADM)、明胶海绵分别埋植在12只新西兰大白兔脊柱两侧肌肉内，并且于观察时间(7、14、21、28d)取出，组织病理学切片HE染色后观察组织的炎症反应，同时于术前、植入第2天、第4天兔耳缘静脉抽血行血常规检查；体外实验将HAPADM、PADM、明胶海绵浸泡于细胞培养液(DMEM)中，于各个时间点(7、14、21、28d)称重研究材料的体外降解情况。结果   各时间点实验动物的血常规检测结果无显著性差异(P>0.05)；三种支架材料周围肌肉组织无脓肿形成和组织坏死发生；此种支架材料的降解特性符合牙周组织工程的要求。结论   猪脱细胞基质矿化支架材料生物相容性良好，降解时间适宜，是一种应用前景广阔的牙周组织工程支架材料。

慢病毒载体靶向携带survivin-siRNA对恶性黑色素瘤A375细胞的影响

朱守荣1，张芮2，曹永倩1，冯璋1，王一兵1

2013, 51(5):  54-57. 

摘要 ( 877 )   PDF (1505KB) ( 328 )   收藏

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目的   观察靶向survivin的RNA干扰对人恶性黑色素瘤A375细胞的影响。方法   将处于对数生长期的黑色素瘤A375细胞随机分为3组：阳性组、阴性对照组、空白对照组，将设计并构建好的survivin-siRNA慢病毒载体分别转染入各组细胞内，实时定量PCR及Western-blot法分别检测转染前后3组细胞survivin mRNA及蛋白的表达情况。结果   成功设计并构建了survivin-siRNA慢病毒载体，与空白对照组相比，转染survivin-siRNA的阳性组survivin mRNA及蛋白的表达明显降低，抑制率分别为60%、87.38%，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论   靶向survivin的siRNA能够明显抑制恶性黑色素瘤A375细胞的survivin基因的表达。

未折叠蛋白反应在严重烧伤大鼠淋巴液诱导肺内皮细胞凋亡中的作用

唐公杰1，王德昌2，薛文君2，张涛1，赵春平1

2013, 51(5):  58-61. 

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目的   探讨未折叠蛋白反应介导的凋亡通路在严重烧伤大鼠淋巴液对大鼠肺微血管内皮细胞损伤中的作用。方法   选成年Wistar雄性大鼠20只，分为烫伤组(行30%体表面积Ⅲ度烫伤)和假伤组，建立大鼠胸导管淋巴瘘模型，收集伤后24h淋巴液，用于体外实验。将细胞实验分为烫伤淋巴液刺激组(A组)、烫伤淋巴液+4苯基丁酸(4PBA)处理组(B组)和假伤淋巴液处理组(C组)。刺激6h后，Annexin V/PI标记法流式细胞术检测细胞凋亡。western blot检测caspase12、葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)等蛋白表达的情况。结果    A组细胞凋亡水平显著高于C组(P<0.01)，B组细胞凋亡水平显著低于A组(P<0.01)。A组GRP78、CHOP和caspase12蛋白表达水平显著高于C组，经PBA处理后3种蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论   烧伤大鼠淋巴液可以引起血管内皮细胞凋亡，未折叠蛋白反应可能是其主要通路之一。

Ang (1-7)及培哚普利对糖尿病视网膜TGF-β1表达的影响

刘娜，蔡可丽

2013, 51(5):  62-65. 

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目的   研究血管紧张素(1-7)(Ang (1-7))及培哚普利对实验性糖尿病大鼠视网膜上TGF-β1表达的影响，探讨Ang (1-7)及培哚普利对糖尿病视网膜病变的保护作用。方法   选择健康的雄性8周龄Wistar大鼠为研究对象。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ， 65mg/kg)的方法建立糖尿病大鼠模型。随机分为5组：a组为Ang (1-7)组(400ng·kg-1·mim-1), b组为培哚普利组(2mg·kg-1·d-1 ), c组为Ang (1-7) +培哚普利组［Ang (1-7), 400ng·kg-1·mim-1+培哚普利, 2mg·kg-1·d-1］ , d组为糖尿病对照组, e组为正常对照组。采用免疫组化的方法检测各组大鼠视网膜上TGF-β1蛋白的表达。结果   Ang (1-7 ) 组、培哚普利组及糖尿病对照组TGF-β1的表达高于正常对照组(P均<0.01)，Ang(1-7)+培哚普利组 与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05), Ang(1-7 )组、培哚普利组、Ang(1-7)+培哚普利组TGFβ1的表达明显低于糖尿病对照组(P均<0.01), Ang (1-7)组、培哚普利组TGF-β1的表达高于Ang(1-7)+培哚普利组(P<0.01)。结论   糖尿病视网膜中TGF-β1的表达高于正常对照组，Ang (1-7)和培哚普利能够有效抑制糖尿病大鼠视网膜TGF-β1的表达，Ang(1-7)与培哚普利联合应用能够更有效抑制糖尿病大鼠视网膜TGF-β1的表达，对糖尿病大鼠视网膜具有保护作用。

临床医学

纯母乳喂养对妊娠期糖尿病患者产后糖脂代谢和体成分的影响

唐林凤1，高燕燕1，林慧2，姚培培1

2013, 51(5):  66-70. 

摘要 ( 1093 )   PDF (864KB) ( 311 )   收藏

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目的   探讨纯母乳喂养对妊娠期糖尿病(GDM)患者产后糖、脂代谢和体成分的影响。方法   选取80例GDM患者，根据产后母乳喂养情况分为纯母乳喂养组和混合喂养组，测定产前和产后第42天口服葡萄糖耐量试验(OGTT)、血脂谱、胰岛素及产后24h内和第42天体成分。结果   58例患者完成观察，其中纯母乳喂养组30例，产后42d较产前OGTT血糖、胰岛素值和胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)水平均明显降低(P＜0.05)，胰岛素敏感指数(ISI)明显升高(P＜0.01)；较产后24h内的基础代谢明显增加(P＜0.01)、内脏脂肪等级降低(P＜0.05)。混合喂养组28例，产后42d较产前空腹血糖(FBG)、OGTT 2h血糖(2hPG)降低(P＜0.05)，而其余指标均无明显变化(P＞0.05)。产后42d时纯母乳喂养组较混合喂养组血糖、胰岛素及血脂、内脏脂肪等级均明显低(P＜0.05)，ISI和基础代谢明显高(P＜0.01)。结论   GDM患者产后进行纯母乳喂养可以有效改善其糖、脂代谢，提高胰岛素敏感性，降低胰岛素抵抗，改善脂代谢；并有利于提高基础代谢率和减少内脏脂肪。

阿卡波糖对2型糖尿病患者血清nesfatin-1水平及糖脂代谢的影响

杨青，高宁，刘芳芳，陈少华

2013, 51(5):  71-74. 

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目的   评估阿卡波糖对2型糖尿病患者血清nesfatin-1水平及糖、脂代谢的影响。方法   对符合纳入标准的60例2型糖尿病患者进行原降糖药物调整，当空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)分别控制在6~8、8~10mmol/L后，将所有患者随机分为2组：试验组在原降糖方案基础上给予阿卡波糖片，对照组进行空白对照。试验周期12周。结果   试验组与对照组基线水平差异无统计学意义(P＞0.05)。试验组治疗前后nesfatin-1水平上升(P＜0.01)，FPG、2hPG、糖化血红蛋白(HbA1c)、体质量指数(BMI)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)及总胆固醇(TC)均较前降低(P＜0.01或P＜0.05)，对照组仅2hPG较前下降(P＜0.01)。治疗后行协方差分析结果显示，试验组nesfatin1水平较对照组升高(P＜0.05)，FPG、2hPG、HbA1c、空腹胰岛素(FPI)、HOMA-IR、TG及TC均较对照组降低(P＜0.05或P＜0.01)。结论   阿卡波糖可升高2型糖尿病患者血清nesfatin-1水平，并有效改善糖脂代谢。

老年慢性卒中后肺炎的临床特征及预后因素

吴倩1，丁启翠2，宋国栋1，王伟1

2013, 51(5):  75-79. 

摘要 ( 836 )   PDF (1081KB) ( 300 )   收藏

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目的   探讨老年慢性卒中后肺炎的临床特征、病原学及相关预后因素，为疾病的诊治提供依据。方法   从2008年1月~2010年8月入住山东大学第二医院呼吸内科、>65岁的340例老年肺炎患者中，筛选出符合诊断标准的老年慢性卒中后肺炎及单纯老年性肺炎患者各60例，采用专用登记表，收集患者资料并进行统计分析。结果   与单纯老年性肺炎患者相比，老年慢性卒中后肺炎患者一般情况差，常合并多种慢性病，其血液白细胞水平更高，动脉血氧分压更低，且住院时间较长，预后较差；老年慢性卒中后肺炎患者中合并吞咽障碍者，预后较差；老年慢性卒中后肺炎患者病原学检查以革兰阴性菌居多，最常见为大肠埃希菌，其次为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌，同时合并革兰阳性菌及真菌感染的概率亦较高；机械通气及鼻饲是老年慢性卒中后肺炎患者预后的独立危险因素。结论   老年慢性卒中后肺炎患者一般情况、化验指标及预后较单纯老年性肺炎患者差，病原学复杂，初始选择抗生素治疗时应注意覆盖可能的致病菌，给予足量、足疗程治疗，并可适当选用具有神经保护作用的抗生素；机械通气及鼻饲为影响预后的独立危险因素。

伴13号染色体缺失的多发性骨髓瘤患者CD138+细胞差异表达miRNAs的筛选

翟珊珊1，丁卜同2，李海霞3，陈昀1，常亚丽1，桑坦1，郭农建1

2013, 51(5):  80-84. 

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目的   初步筛选伴13号染色体缺失的多发性骨髓瘤患者CD138+细胞差异表达显著的microRNAs(miRNAs)并探求其生物学功能。方法   通过荧光原位杂交(FISH)实验从29例多发性骨髓瘤初治患者中筛选出13号染色体缺失和核型正常的多发性骨髓瘤患者各3例；应用miRNA芯片技术获得差异表达miRNAs，并进行实时定量PCR验证；应用在线软件预测差异miRNAs的潜在靶基因，并建立miRNAs与靶基因的调控网络。结果   检测出5个在伴13号染色体缺失的多发性骨髓瘤患者CD138+细胞中差异表达的miRNAs，其中4个表达下调，1个表达上调；生物信息学分析显示，SMAD3基因位于miRNAs靶基因调控网络的关键节点上。结论   伴13号染色体缺失的多发性骨髓瘤患者CD138+细胞中存在特异性表达的miRNAs；SMAD3基因可能在该类型多发性骨髓瘤发病中发挥作用。

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8对胃癌细胞转移能力的影响

耿超1，潘英芳2，林森1

2013, 51(5):  85-88. 

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目的   探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP8)在患者胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的相关性，体外研究TNFAIP8对胃癌细胞株SGC7901转移能力的影响。方法   应用免疫组织化学染色SABC法检测30例胃癌及癌旁组织中TNFAIP8蛋白表达，分析其与临床病理特征相关性。体外培养人胃癌细胞株SGC7901，脂质体介导重组质粒pcDNA3.0-TIPE转染SGC7901，通过Transwell实验检测转染后胃癌细胞侵袭与迁移能力的差异。结果   癌旁组织中TNFAIP8的表达与胃癌组织具有明显差异(P<0.001)，TNFAIP8蛋白的表达水平与性别、年龄、肿瘤大小无相关性(P>0.05)； TNFAIP8蛋白表达水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况相关，差异有统计学意义(P<0.05)。转染pcDNA3.0-TIPE的SGC7901细胞较转染pcDNA3.0对照组细胞其迁移与侵袭能力具有明显差异(P<0.001)。结论   TNFAIP8在胃癌的发生发展、转移中可能发挥重要的作用，TNFAIP8有可能成为新的治疗靶点。

肝细胞癌患者癌组织中RASSF1A和WIF-1基因甲基化的临床意义

范海燕，张慧景，郭占军，李胜棉

2013, 51(5):  89-93. 

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目的   观察肝细胞癌患者癌组织中RASSF1A基因甲基化状态的临床意义，阐明WIF-1基因甲基化在肝细胞癌发生发展中的作用。方法   97例肝细胞癌患者手术切除癌组织蜡块标本为肝细胞癌组，随机留取26例手术切除肝细胞癌旁肝硬化组织蜡块标本为肝硬化组。两组标本经蜡块组织DNA提取、亚硫酸盐甲基化修饰，并采用甲基化特异性PCR法对抑癌基因RASSF1A和WIF-1进行目的片段的扩增，扩增产物通过电泳凝胶成像系统进行甲基化结果分析判定；根据患者术前实验室检测是否感染HBsAg，将肝细胞癌组细分为HBsAg阳性组及HBsAg阴性组，分析抑癌基因RASSF1A和WIF-1甲基化的意义。结果   RASSF1A基因甲基化率肝细胞癌组(67.01%)高于肝硬化组(42.31%)，差异有统计学意义(P=0.021)；WIF-1基因甲基化率肝细胞癌组(46.39%)高于肝硬化组(7.69%)，差异有统计学意义(P<0.05)；肝细胞癌组中抑癌基因RASSF1A和WIF-1基因甲基化表达均阳性为35.05%，肝硬化组为7.69%，差异有统计学意义(P=0.006)。HBsAg阳性肝细胞癌组RASSF1A基因的甲基化阳性率(72.84%)高于HBsAg阴性组(23.08%)，差异有统计学意义(P=0.001)；WIF-1基因在HBsAg阳性(44.44%)和阴性肝细胞癌组(53.84%)差异无统计学意义(P=0.528)。肝细胞癌患者RASSF1A和WIF-1基因的甲基化状态与生存率比较差异无统计学意义(P=0.735，P=0.229)。结论   肝细胞癌患者癌组织较肝硬化组织RASSF1A，WIF-1基因甲基化率高，提示抑癌基因RASSF1A和WIF-1的甲基化在肝细胞癌的发生中起到一定作用。

乙肝病毒感染不同阶段血清HBsAg定量值及其与HBV DNA水平和年龄的相关性

符晓莉，王磊，刘峰

2013, 51(5):  94-98. 

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目的   研究未经抗病毒治疗干预的慢性乙肝病毒(HBV)感染不同阶段血清乙肝表面抗原(HBsAg)定量值的特点及其与血清HBV DNA水平和年龄的相关性。方法   收集564例未经抗病毒治疗的慢性HBV感染者血清，分为6组：慢性HBV携带65例，非活动性HBsAg携带164例，e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎171例，HBeAg阴性慢性乙型肝炎74例，HBeAg阳性乙肝肝硬化42例，HBeAg阴性乙肝肝硬化48例。采用微粒子化学发光法检测HBsAg定量值，荧光PCR定量法检测血清HBV DNA水平。结果   慢性HBV携带、HBeAg阳性慢性乙型肝炎、HBeAg阴性慢性乙型肝炎、非活动性HBsAg携带、HBeAg阴性肝硬化和HBeAg阳性肝硬化6组的血清HBsAg定量值依次下降，其中位数分别为：4.71(3.71～5.31)、4.04(2.45～5.22)、3.50(2.68～4.43)、3.34(1.38～4.37)、3.25(1.85～3.88) 和3.15(2.51～3.92) lgIU/mL，６组间比较差异有统计学意义(χ2=263.0，P＜0.001)。总慢性HBV感染者(非活动性HBsAg携带者除外)的HBsAg与HBV DNA呈正相关(r=0.719，P＜0.001)，总慢性HBV感染者的HBsAg与年龄呈负相关(r=-0.397，P＜0.001)。年龄均＞40岁的非活动性HBsAg携带与HBeAg阴性慢性乙型肝炎两组HBsAg定量值的差异有统计学意义(Z=-3.783，P＜0.001)，区分两组的HBsAg定量临界值为3.29lgIU/mL。结论   慢性HBV感染不同阶段的HBsAg定量值不同；血清HBsAg定量值与血清HBV DNA水平及年龄相关；HBsAg定量值是预测年龄＞40岁的非活动性HBsAg携带是否发展为HBeAg阴性慢性乙型肝炎的重要指标。

CD36单核苷酸多态性与老年动脉粥样硬化性脑梗死的相关性

臧静1，张涌2，王滨2，杨绍祥2，李彬2，王建丽1

2013, 51(5):  99-104. 

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目的   探讨CD36单核苷酸多态性（SNPs）与老年动脉粥样硬化性脑梗死（ACI）相关性。方法   选取75岁以上ACI患者121例作为病例组，对照组选取无脑梗死病史体检者217例。采用PCRLDR技术检测CD36 rs1761667、rs9784998两个位点基因型，ELISA法测定血栓素B2。结果    病例组rs9784998基因型、等位基因频率与对照组相比无统计学差异（P＞0.05）。rs1761667 AG基因型频率分布在两组间具有统计学差异（χ2=7.03, P＜0.01）。Logistic多因素分析和逐步回归分析显示，与其他两种基因型相比，AG基因型均能增加脑梗死的患病风险（P＜0.05）。病例组血栓素B2水平较对照组明显升高（P＜0.01），但AG基因型人群中血栓素B2水平两组间无统计学差异（P＞0.05）。结论   CD36 rs9784998单核苷酸多态性与动脉粥样硬化性脑梗死无统计学相关，rs1761667单核苷酸多态性是老年动脉粥样硬化性脑梗死的遗传危险因素。CD36基因多态性与血栓素B2无统计学相关。

尿激酶3′-UTR 基因多态性与特发性草酸钙结石易感性的关系

习海波,傅龙龙,王共先,傅斌,李煜,宋小芬

2013, 51(5):  105-107. 

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目的   探讨尿激酶3′- UTR基因多态性与特发性草酸钙结石易感性的相关性。方法   采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法，检测138例特发性草酸钙结石患者和142例健康对照组人群尿激酶3′- UTR基因+4506 位点C/T基因多态性的表达。结果   特发性草酸钙结石组与健康对照组比较，TT 与CC+TC基因型频率、T/C等位基因频率进行卡方检验，差异均有统计学意义(P<0.05)。T等位基因携带者是特发性草酸钙结石的危险因素。与等位基因C相比，T基因携带者的患病风险是其1.493倍。结论   尿激酶3′- UTR+4506 C/T基因多态性与特发性草酸钙结石存在相关性

公共卫生与管理

基于信息-动机-行为技巧模型的女性性工作者艾滋病高危行为研究

张华1，庄霞2，刁玉涛1，刘振东1，赵颖馨1，姜宝法3

2013, 51(5):  108-112. 

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目的   以信息-动机-行为技巧模型为理论基础，分析女性性工作者艾滋病高危行为的影响因素及相互作用机制。方法   采用同伴推动法招募328名女性性工作者进行问卷调查，应用结构方程模型建模方法构建该人群的艾滋病高危行为模型。结果   建立模型的拟合评价指数均在可接受范围之内， 模型中预防信息和动机可通过行为技巧影响预防行为，动机对预防行为直接和间接效应差异均有统计学意义(P＜0.05)，行为技巧对预防行为的效应大于动机的效应。结论   行为技巧对预防行为的效应最大，同时作为中介变量调节着预防信息和动机对预防行为的效应。