当期目录

2010年 第48卷 第10期 刊出日期：2010-10-16

  

论文

2型糖尿病发病过程中外周血miR-34a的表达水平及其临床意义

孔磊，韩文霞，姜秀云，徐进，张栩，李秋，管庆波，高聆，赵家军

2010, 48(10):  1-3. 

摘要 ( 1266 )   PDF (339KB) ( 424 )   收藏

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目的    研究外周血中糖尿病相关的microRNA (miRNA) miR-34a 在2型糖尿病（T2D）发病过程中的表达水平及临床意义。方法    63例研究对象中18例为初发T2D患者（n-T2D组），19例为T2D前期患者（pre-diabetes组），26例为糖耐量正常的T2D易感个体（s-NGT组）。所有诊断均经口服葡萄糖耐量试验（OGTT）证实。以荧光定量实时RT-PCR法检测其血清miR-34a的表达水平。结果     s-NGT组、pre-diabetes组和n-T2D组血清样本中miR-34a水平呈现序贯上升的趋势，而n-T2D组显著高于s-NGT组和pre-diabetes组（P＜0.05）；s-NGT组与pre-diabetes组间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论    外周血miR-34a在T2D发病过程中具有重要意义，但在T2D前期阶段尚未发生明显改变。

羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠主动脉的保护作用

孔德焕1，于进堂2，高美娟1，李波1，卞丽香1，李明龙3，刘明4，于桂娜1

2010, 48(10):  4. 

摘要 ( 1160 )   PDF (960KB) ( 362 )   收藏

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目的    用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法制备大鼠糖尿病模型，通过检测糖尿病大鼠主动脉中纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达和血浆中PAI-1及内皮素（ET）含量的改变，观察羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠主动脉的保护作用并探讨其机制。方法    用STZ建立大鼠糖尿病（DM）模型,将DM模型大鼠随机分为羟苯磺酸钙组和糖尿病组，并设正常对照组，每组10只。羟苯磺酸钙组每天给予羟苯磺酸钙0.15mg/g灌胃，其余两组给予相同剂量的蒸馏水。各组大鼠分别干预8周。处死前抽血备测血清学指标，处死后固定主动脉留做形态学观察。分别用放射免疫法和酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆中ET和PAI-1含量。用免疫组化技术检测大鼠主动脉PAI-1、MMP-9的表达，光镜、电镜下观察主动脉病理形态的改变。结果     与糖尿病组相比，羟苯磺酸钙能降低血浆ET和PAI1的含量（P<0.05），改善大鼠主动脉病理损伤，减少主动脉局部PAI1和MMP9的表达（P<0.05）。糖尿病组大鼠主动脉内膜增厚,内皮细胞肿胀,平滑肌细胞增生、排列紊乱。羟苯磺酸钙组大鼠主动脉上述病变明显减轻。结论    羟苯磺酸钙能显著降低糖尿病大鼠ET、PAI-1和MMP-9的表达量，抑制血小板聚集 ,降低血管通透性，保护血管内皮，延缓动脉硬化，稳定粥样斑块。

胱抑素C对大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响

张书敏1，2，王永梅1，杜贻萌1，魏峰涛1，蒋卫东1，王欣1，董兆强1，徐冬玲1，姜红2，鹿庆华1

2010, 48(10):  9-13. 

摘要 ( 1000 )   PDF (985KB) ( 398 )   收藏

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目的    探讨胱抑素C（CysC）高表达对大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖能力的影响。方法   取出生1～3d的Sperague-Dawley（SD）清洁级大鼠10只，体质量10～15g，差速贴壁法培养乳鼠心肌成纤维细胞；采用Gateway技术构建重组CysC腺病毒高效表达载体(Ad-CysC)并体外转染大鼠CFs；将对数生长期的大鼠CFs随机分成正常细胞组（PBS组），携有绿色荧光蛋白（GFP）的腺病毒组（Ad-GFP组）及CysC腺病毒高表达组(Ad-CysC组)。采用蛋白免疫印迹技术（WB）检测CysC蛋白在CFs中的表达情况，通过5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入法检测CysC高表达对CFs增殖能力的影响。结果    经DNA测序及WB结果分析，CysC腺病毒高效表达载体构建成功，转染CFs 24h后（MOI=200），AdCysC的转染效率高达90%以上；用重组CysC腺病毒转染CFs后， CysC蛋白在24h即有明显的表达上调（P<0.05）；与PBS组及Ad-GFP组相比，转染Ad-CysC的CFs在72h的 BrdU摄取率显著提高（P<0.05）。结论     大鼠CysC腺病毒高效表达能够促进CFs增殖，可能加速心肌纤维化进程。

三七总皂苷对oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞CD40, VCAM-1表达的影响

刘桂林1，窦迎春2，刘粉叶3，张晴4，任敏5，张继东5

2010, 48(10):  14-19. 

摘要 ( 1182 )   PDF (1159KB) ( 334 )   收藏

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目的    探讨三七总皂苷(TPNS)对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）白细胞分化抗原40（CD40）、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）表达的影响。方法    原代培养HUVECs。细胞分为空白组、刺激组、小剂量（100mg/L）TPNS组、大剂量（200mg/L）TPNS组及辛伐他汀组并予相应处理。采用MTT法测定HUVECs活性，实时定量RT-PCR检测VCAM1的基因表达，Western blot 分析CD40蛋白表达量。结果    TPNS及辛伐他汀均可以升高HUVECs的活性（P＜0.05, P＜0.001），下调HUVECs表达免疫炎症因子CD40 (P＜0.05, P＜0.01)及VCAM-1（P均＜0.001）的水平。且大剂量TPNS作用优于小剂量TPNS（P＜0.05）。结论    TPNS能够减轻oxLDL对内皮细胞的损伤，降低内皮细胞免疫炎症因子的表达，在防治动脉粥样硬化中具有重要作用。

非洛地平逆转代谢综合征大鼠心肌纤维化的作用

邢姗姗1,2，谭红伟1，毕秀萍1,3，钟明1，张运1，张薇1

2010, 48(10):  20. 

摘要 ( 957 )   PDF (2035KB) ( 431 )   收藏

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目的    探讨非洛地平逆转代谢综合征（MS）心肌纤维化的作用机制。方法    雄性Wistar大鼠33只随机分为对照组（12只）和代谢综合征组（21只），采用10%高果糖饮水8个月建立MS动物模型，随机将9只代谢综合征组大鼠给予非洛地平。并采用苦味酸天狼猩红染色法检测大鼠左室心肌胶原含量，RT-PCR法检测心肌白细胞介素-18（IL-18）mRNA表达水平。结果    与对照组相比，MS大鼠左室心肌组织胶原含量升高(P<0.01)；IL-18 mRNA表达水平升高(P<0.01)；应用非洛地平干预治疗后，上述异常均减轻。结论    非洛地平通过抑制IL-18表达在逆转MS心肌纤维化发生发展中起重要作用。

体外培养细胞拉伸加载装置的研制

张晓燕1, 孙玉德2, 袁晓3, 王洪玲1, 赵芳1, 刘东旭1

2010, 48(10):  25-28. 

摘要 ( 1085 )   PDF (603KB) ( 384 )   收藏

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目的   为模拟在体细胞的应力环境，研制一种对离体细胞施加周期性拉伸应变的实验装置。方法    细胞拉伸加载装置由计算机控制的硬件和软件组成。硬件包括真空负压系统、控制电路和抗干扰优化装置，软件是基于C语言的系统开发套件。此装置利用单片机控制电磁阀和真空泵抽吸柔性细胞培养膜形成负压而使基底膜产生拉伸应变,使贴附生长的细胞受到牵张力的作用。通过对大鼠血管平滑肌细胞的加载实验，进一步验证装置的可行性。结果    加载装置可以对加载力值、牵张及松弛时间和持续工作时间进行有效控制；加载后血管平滑肌细胞在培养板中稳定生长并有增殖活性。结论    本装置满足离体细胞周期性拉伸加载的要求，并可广泛用于拉伸加载条件下的细胞力学生物学的研究。

正畸加载对自体移植牙预后影响的显微CT研究

薛涵1，杜文婷2，郭泾3

2010, 48(10):  29-33. 

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目的    建立不同时程正畸加载自体移植牙的动物模型，利用显微CT（Micro CT）研究正畸加载对其预后的影响。 方法     选取4只犬的16颗中切牙作为实验牙齿，在自体牙移植术后第1、4、8、12周分别进行正畸加载。加载1月后对实验牙齿及周围骨块拍摄Micro CT，进行形态学观察、数字化软件分析及三维重建。 结果    自体牙移植术后第4周、第8周进行正畸加载的移植牙，形态学观察无明显骨粘连、牙根吸收、牙周膜间隙增宽及根尖区牙槽骨密度减低；骨计量参数比较提示根尖区骨小梁破坏最少、骨小梁离散度低。 结论    通过Micro CT观测，可推断在犬自体牙移植术后第4周、第8周进行正畸加载，牙周愈合情况较好并可预防骨粘连的发生。

蝎毒多肽提取物对肿瘤微环境中树突状细胞成熟表型的影响

张月英，张维东，武利存，王朝霞，王兆朋，贾青，徐林，张俊平

2010, 48(10):  34-38. 

摘要 ( 1016 )   PDF (1125KB) ( 375 )   收藏

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目的     探讨蝎毒多肽提取物诱导肿瘤微环境中树突状细胞成熟的分子机制。方法    建立小鼠Lewis肺癌皮下荷瘤模型，随机分为荷瘤对照组、化疗组（CTX组）和实验组（CTX+PESV组），每组8只。实验组在常规化疗的间隔期给予蝎毒多肽提取物干预，连续治疗21d，记录肿瘤生长曲线，观察蝎毒多肽提取物对肿瘤浸润性树突状细胞成熟表型的影响，并采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学检测肿瘤微环境中血管内皮生长因子（VEGF）和肿瘤生长转化因子β1（TGFβ1）的表达变化，从肿瘤组织微环境的角度探讨其作用机制。结果    常规化疗的间隔期给予蝎毒多肽提取物连续治疗21d后，实验组中Lewis肺癌移植瘤的生长明显受到抑制（P＜0.05）；肿瘤浸润性树突状细胞数量以及CD80表达均较模型组升高（P＜0.05）；与荷瘤对照组比较，化疗组和实验组肿瘤微环境中VEGF mRNA的相对表达量降低，分别为荷瘤对照组的32%和12%；TGF-β1 mRNA表达量也降低，分别是荷瘤对照组的42%和21%（P＜0.05）。结论    蝎毒多肽提取物在化疗间期通过抑制肿瘤微环境中VEGF和TGFβ1的表达，促进树突状细胞的成熟，恢复其功能表型。

胆总管结扎所致肝损伤中Nrf2对细胞信号传导和基因表达的影响

许伟华1， Tobias A Beyer2， 杨法林3，王洪波1

2010, 48(10):  39. 

摘要 ( 1268 )   PDF (2381KB) ( 337 )   收藏

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目的    研究核因子相关因子2（Nrf2）在胆汁淤积中的作用。方法    野生鼠（WT）和Nrf2基因敲除小鼠(KO)给予胆总管结扎手术,应用蛋白杂交技术观察丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号传导途径的变化；应用RNA酶保护测定（RPA）技术测定基因变化。结果    在BDL组血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）显著升高；纤维粘连蛋白的表达在KO鼠明显增多；p-JNK、p-stat3、p-AKT、p-p38在WT鼠的BDL组的活化强度较大。Nrf2的靶基因NQO1，谷胱甘肽S转移酶(GST)的同工酶（GST-Ya,GST-pa）在WT鼠的BDL组明显上调，而在KO鼠中则被抑制。TGF-β1、TIMP-1、胶原蛋白1在KO鼠的BDL组上调幅度较大。结论    在胆总管结扎后胆汁淤积所致肝损伤中，Nrf2对MAPK信号传导和炎症、纤维化过程均有影响，部分通过上调抗氧化基因的表达起到细胞保护作用。

兔SAH后p38MAPK、NF-κB、ICAM-1在基底动脉的表达

冀勇，王志刚，王成伟，张庆林

2010, 48(10):  44-47. 

摘要 ( 999 )   PDF (826KB) ( 252 )   收藏

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目的    探讨兔蛛网膜下腔出血（SAH）后丝裂原活化蛋白激酶p38（p38MAPK）、核转录因子-κB（NF-κB）及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在脑血管痉挛（CVS）发病机制中的作用及其相互间内在关系。方法    将新西兰纯种健康级大白兔92只分为正常组（n=10）、对照组（n=10）、SAH组（n=72），SAH组又分为SAH后1、3、5、7、9、11d 6个亚组。枕大池二次注血制作兔SAH后CVS模型。分离兔基底动脉（BA），应用形态学观察、免疫组化和原位杂交等方法，观察兔BA管径、血管壁上p38MAPK、NF-κB及ICAM-1表达的动态变化及其与CVS的关系。结果    在SAH后第3天， BA管腔出现狭窄，第5天时狭窄明显，第7天狭窄最为明显。伴随着血管腔管径的变化，血管壁上ICAM-1的表达逐渐增强，第7天时表达最为强烈；p38MAPK、NF-κB的表达也呈逐渐增强的趋势，但在第5天时表达最为强烈，之后逐渐降低。p38MAPK、NF-κB与ICAM-1在蛋白质和mRNA水平上的强烈表达有时程上的差别。结论    在CVS的早期即出现的p38MAPK、NF-κB高表达以及之后出现的ICAM-1高表达，均提示存在由p38MAPK、NF-κB调控的ICAM-1介导的痉挛血管壁的炎症反应，这一级联反应在CVS的发生和发展过程中起了重要作用。

药物干预对哮喘小鼠模型Th1/Th2细胞因子表达的影响

王岷1,2，陈文靖1，杨琳红1，刘磊1, 吴大玮2，刘俊丽1

2010, 48(10):  48-50. 

摘要 ( 972 )   PDF (349KB) ( 365 )   收藏

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目的    探讨胸腺素-α和地塞米松对辅助型T淋巴细胞1型/辅助型T淋巴细胞2型（Th1/Th2）细胞因子在哮喘发病过程中的干预作用及其临床应用价值。方法    将小鼠分为对照组、哮喘模型组、胸腺素干预组、地塞米松干预组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法，测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）和干扰素γ（IFNγ）的水平。结果    与对照组相比，哮喘组的嗜酸性粒细胞（EOS）、淋巴细胞、IL4、IL5升高, IFNγ下降（P<0.05）。与哮喘组相比，胸腺素组和地塞米松组的EOS、IL-4、IL-5减少，胸腺素组IFN-γ增加（P<0.05）。对照组与哮喘组、哮喘组与胸腺素组、哮喘组与地塞米松组之间的IL4/IFNγ相比，差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论    Th2优势反应在哮喘的发病机制中起重要作用，胸腺素-α可明显提高IFN-γ、Th1的水平，地塞米松可以降低IL-4、IL-5及Th2水平。

免疫共沉淀检测人p65和SMRT蛋白间相互作用

王春美1， 盛光耀1， 卢洁2， 邹湘1， 方营旗1， 白松婷1，谢垒1

2010, 48(10):  51-55. 

摘要 ( 1154 )   PDF (856KB) ( 472 )   收藏

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目的    使用免疫共沉淀技术法检测人p65和SMRT蛋白在儿童急性髓细胞白血病（AML）细胞株THP-1中相互作用。方法    体外人工合成p65基因CDS区碱基序列和SMRT-C 645bp对应的基因片段，分别克隆至pUC57载体，经酶切、测序正确后，PCR扩增目的基因片段，酶切后亚克隆至带有HA标签和Myc标签的真核表达载体pCMV-HA和pCMV-Myc，测序、酶切鉴定正确后，共转染THP-1细胞，免疫共沉淀法检测二者间相互作用。结果    成功构建了人p65和SMRT蛋白真核表达载体pCMV-HA-p65和pCMV-Myc-SMRT，共转染THP1细胞，抗HA和Myc多克隆抗体分别沉淀细胞裂解液，用抗Myc和HA单克隆抗体分别进行Western  Blotting检测，可以检测到HA-p65和Myc-SMRT蛋白的表达。结论     成功构建了人p65和SMRT蛋白重组真核表达载体，在THP-1细胞株中表达后，免疫共沉淀证实p65和SMRT蛋白间存在相互作用，为进一步探讨儿童AML发病机制和白血病的靶向治疗提供理论依据。

磁共振波谱成像在食蟹猴脑研究中的应用

徐惠1，李传福1，厉保秋2，任庆国1，张晓明1，于红鸾3

2010, 48(10):  56-59. 

摘要 ( 1007 )   PDF (736KB) ( 507 )   收藏

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目的    研究磁共振波谱成像（MRS）在正常非人灵长类动物实验研究中的应用，为病理状态下的MRS研究提供对照。方法    选取健康食蟹猴6只，采用GE公司产Signa Excite HD 3.0 T MR扫描仪，正交膝关节线圈，动物麻醉后进行MRS扫描。采用single voxel PROBE-PRESS点解析波谱成像序列，分别选取纹状体、额叶、丘脑、小脑感兴趣区，感兴趣区大小为15mm×15mm×10mm，每个部位扫描3次。通过MR系统测量各感兴趣区的N-天门冬氨酸/肌酸（NAA/Cr）、肌酸/胆碱（Cho/Cr）比值。使用方差分析进行统计分析。结果      NAA/Cr比值从高到低依次为丘脑、小脑、额叶、纹状体，其中，丘脑与其他三类组织均有统计学差异（P＜0.05），小脑与纹状体之间有统计学差异（P＜0.05）。Cho/Cr比值从高到低依次为额叶、小脑、丘脑、纹状体，其中，纹状体与额叶、纹状体与小脑之间有统计学差异（P＜0.05）。结论     食蟹猴脑内不同组织结构NAA/Cr、Cho/Cr含量不同。可以在临床使用的MR设备上对非人灵长类动物进行脑MRS的检测研究，其数据准确反映了脑组织的结构异同和代谢物含量的变化，能够作为生理、病理改变研究的依据之一。

非CO2依赖型细胞培养系统对膀胱癌T-24细胞增殖的影响

高漓1，张天禹1，谭宁2，张琳刚1

2010, 48(10):  60-64. 

摘要 ( 1021 )   PDF (881KB) ( 333 )   收藏

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目的    探讨非CO₂依赖型细胞培养系统对膀胱癌T-24细胞增殖的影响。方法     对膀胱癌T-24细胞采取非CO₂依赖型细胞培养系统在（37℃ 、大气环境) 培养箱（大气-B组）和（37℃、5%CO₂）培养箱（CO₂-B组）条件下，及CO₂依赖型细胞培养系统在（37℃、大气环境) 培养箱（大气-A组）和（37℃、5%CO₂）培养箱（CO₂-A组）条件下进行培养，检测分析两种体系培养基连续7d pH的比较结果；采用细胞增殖曲线及克隆形成实验检测细胞生长差异情况；采用流式细胞术检测分析两种系统对细胞周期及凋亡率影响的比较结果； RT-PCR、Western blot技术检测分析两种系统下的膀胱癌细胞中survivin、caspase-3基因及蛋白的表达情况。结果    两种培养系统条件下，细胞培养基pH变化趋势一致；两种培养系统下T-24细胞生长增殖未见差异；RT-PCR 法及Western bolt法检测显示,两种培养系统下表达survivin、caspase-3因子及蛋白未见差异。结论     膀胱癌非CO₂依赖型细胞培养系统对细胞增殖、基因表达等方面与膀胱癌CO₂依赖型细胞培养系统无明显区别。

DMSO、地塞米松对于HBV感染HepCHLine-4细胞能力的影响

关彦彦1，姚永远1，王刚1，邵丽华2，赛林涛1，马立宪1

2010, 48(10):  65. 

摘要 ( 1051 )   PDF (972KB) ( 319 )   收藏

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目的    评价二甲基亚砜（DMSO）、地塞米松对于乙型肝炎病毒（HBV）感染HepCHLine-4细胞能力的影响。方法    HBV感染前将HepCHLine4细胞分为DMSO处理组（A组）、地塞米松处理组(B组)、DMSO及地塞米松处理组(C组)和对照组(D组)。含胎牛血清100mL/L 的细胞培养基中，A组添加20mL/L DMSO，B组添加5×10-5 mol/L 地塞米松，C组添加20mL/L DMSO及5×10-5 mol/L地塞米松，D组不添加上述两种试剂。用相应培养基培养各组细胞4d以备病毒感染。将HBV病毒颗粒加入各组细胞中于37℃中孵育24h。电化学发光法检测感染后各组细胞培养上清中HBsAg和HBeAg的滴度；荧光定量PCR检测感染后各组细胞培养上清的HBV DNA。结果     DMSO处理组HBsAg和HBeAg的滴度相对较高；地塞米松处理组HBV DNA值相对较高；DMSO及地塞米松处理组HBsAg和HBeAg的滴度及HBV DNA值均较高，其最高值分别是125.790 IU/mL, 4.784 S/Co, 5.930×105 copies/ mL；对照组HBsAg和HBeAg的滴度及HBV DNA值均较低，其最高值分别是85.490 IU/mL，1.896 S/Co，3.729×104 copies/mL。 结论    DMSO、地塞米松有提高HepCHLine4细胞被HBV自然感染能力的趋势。

多巴药物对帕金森病患者神经细胞的毒性作用及相关保护因素的研究

常铮1，2，许继平1

2010, 48(10):  69-72. 

摘要 ( 1171 )   PDF (373KB) ( 341 )   收藏

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目的     检测帕金森病（PD）患者血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平的变化，探讨多巴胺药物对PD患者神经细胞的作用。方法     根据改良Webster将117例PD患者分为轻、中度症状组。轻度组随机分4组，给予不同剂量美多巴（SI～SIII组）及安慰剂（SIV对照组）；中度组随机分6组，3组给予不同剂量美多巴（MI～MIII组），另3组在使用多巴药物基础上加用保护剂司来吉兰（MIV组）、溴隐亭（MV组）、吡贝地尔（MVI组）。在SI～SIII组和MI～MIII组停药3d以及加用美多巴后、SIV组停药3d以及加用安慰剂后、MIV～MVI组加用保护剂前后，分别测定空腹血清NSE浓度进行对比分析。结果     轻度组血清NSE差异不明显（P﹥0.05），中度组在多巴胺达一定剂量后差异显著（P﹤0.05），不同保护剂在防止神经细胞损伤方面无显著性差异（P﹥0.05）。结论     多巴胺对PD患者神经细胞的毒性作用可能与药物剂量有关。

微创血肿清除术患者纤溶活性动态变化的研究

田敏，袁倩，崔元孝，张清华，唐茜茜

2010, 48(10):  73-76. 

摘要 ( 1007 )   PDF (369KB) ( 378 )   收藏

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目的    观察高血压性脑出血患者微创血肿清除术后纤溶活性的动态变化。方法     采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法，测定高血压性脑出血微创术患者46例（手术组）、非手术患者43例（非手术组）发病后1、3、7、14d血清组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）的含量，将48名同期健康查体者作为正常对照组，对各组的tPA、PAI-1水平进行比较。结果     高血压性脑出血手术组1、3、7d血清t-PA及3、7d血清PAI-1水平显著高于正常对照组（P<0.05），至14d与正常对照组差异无统计学意义; 手术组3、7d血清t-PA水平明显低于非手术组（P<0.05），PAI-1水平明显高于非手术组（P<0.05）；手术组1、3、7d血清tPA及PAI-1的含量均与当天美国国立卫生院（NIHSS）评分相关。结论     高血压性脑出血患者微创术后血液纤溶活性存在一定变化规律，血清t-PA、PAI-1可作为判断微创术临床疗效的生物学指标。

ADAM33基因F+1 位点单核苷酸多态性与支气管哮喘的相关性研究

迟翔宇1，李青1，王来城2，王静1

2010, 48(10):  77-80. 

摘要 ( 1056 )   PDF (804KB) ( 331 )   收藏

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目的    检测裂解素-金属蛋白酶33基因 （ADAM33）F+1位点单核甘酸多态性在支气管哮喘患者中的分布频率, 并探讨其与支气管哮喘的相关性。 方法     采用等位基因特异性聚合酶链反应(ASPCR)技术及 DNA 测序的方法, 对哮喘组 126 例患者及对照组 121 例健康者进行 ADAM33 基因 F+1 位点单核苷酸多态性分析。结果     ADAM 33基因F+1位点哮喘组和对照组基因型分布均符合HardyWeinburg定律；ADAM33 基因 F+1 位点 3 种基因型(CC、CT、TT)在哮喘组分布分别为 68(54.0%)、48( 38.1%)、10( 7.9%)，在对照组分布分别为 70(57.9%)、46(38.0%)、5( 4.1%)，无显著性差异（χ2=1.638, P>0.05）。哮喘组和对照组 ADAM33 基因 F+1 位点等位基因C和T的频率分别为 0.730、 0.270、0.769、 0.231，两组等位基因频率比较差异无显著性 (χ2 =0.970，P>0.05)。结论     ADAM33 基因 F+1 位点在支气管哮喘患者中存在CC、CT、TT 多态性，ADAM33 基因 F+1 位点基因多态性与支气管哮喘无明显相关性。

呼出气一氧化氮检测对支气管哮喘的诊断价值

柴静1，蒋萍2，钱雪娇1

2010, 48(10):  81-84. 

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目的    评价呼出气一氧化氮（FeNO）检测在支气管哮喘诊断中的意义。方法    哮喘非特异症状患者118例，其中支气管哮喘患者71例为A组，首次诊断为支气管哮喘患者52例为Ⅰ组，规律应用吸入性糖皮质激素达4周以上的支气管哮喘患者19例为Ⅱ组，其余47例非哮喘患者为B组。采用NIOX NO 测定仪测定FeNO水平，以2006年GINA标准为诊断支气管哮喘的金标准，绘制受试者工作曲线 ( ROC)，评价FeNO对支气管哮喘鉴别诊断的价值，明确FeNO的诊断临界点。结果    Ⅰ组FeNO高于Ⅱ组［（72.92±50.26）ppb比（35.74±27.53）ppb, P﹤0.05］ 和B组［（72.92±50.26）ppb比（17.62±9.77）ppb, P﹤0.05］。排除糖皮质激素对FeNO的影响，以Ⅰ组和B组患者为观察对象，ROC曲线下面积为0.90，最佳临界点为32.50ppb，以该点为阈值，诊断哮喘的敏感度为82.70%，特异度为87.90%。结论     FeNO对哮喘的诊断具有较高的敏感性和特异性。

轻度认知功能障碍与阿尔茨海默病患者小脑的MRI定量分析

陈丽，张成琪，王新怡，杨志强

2010, 48(10):  85. 

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目的    探讨轻度认知功能障碍(MCI)和阿尔茨海默病(AD)患者的认知功能与小脑体积的相关关系。方法    MCI、AD患者及健康对照者各18例，分别进行颅脑磁共振成像（MRI）扫描，所得图像使用BRAINS2软件处理，小脑被手绘分割成4部分（前叶、后叶上部、后叶下部和髓体），比较各组患者小脑总体积及各亚区体积之间的差异，采用简易认知状态检查表（MMSE）评分，分析其相关性。结果     AD患者的小脑后叶较健康对照组明显萎缩，并且小脑后叶下部的萎缩程度与其认知功能减退程度呈正相关，MCI组的小脑总体积及各亚区体积较健康对照组差异不明显。结论    小脑体积的MRI测量有助于AD的明确诊断，小脑后叶体积萎缩是AD患者认知功能下降的关联因素。

3.0 T磁共振动态增强扫描对富血供肝肿瘤的诊断价值

郭卫华1，李传福2，尉从新2，侯金文2

2010, 48(10):  88-91. 

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目的      探讨3.0 T磁共振动态增强扫描对富血供肝肿瘤的鉴别诊断价值。方法      对40例富血供肝肿瘤（肝细胞癌26例，海绵状血管瘤12例，富血供转移瘤2例）相继进行MR平扫及3D FAME序列多期动态增强扫描，包括肝动脉期、门静脉期、平衡期及延迟期，观察病灶各期的强化特征。并利用动态强化自动分析软件及时间-信号强度曲线分析各种病变的曲线类型。结果      富血供肝细胞癌的时间-信号强度曲线分为两种类型：Ⅰ型（速升速降）、Ⅱ型(速升缓降)。26例肝细胞癌中69%（18/26)表现为Ⅰ型曲线类型， 31%（8/26）表现Ⅱ型曲线类型。肝血管瘤的动态增强曲线分为两种类型：Ⅰ型（缓升平坦型）、Ⅱ型（速升平坦型）。12例血管瘤中67%（8/12）表现为Ⅰ型曲线类型，33%(4/12)表现Ⅱ型曲线类型。2例富血供转移瘤表现为早期周边环状强化。结论      3.0 T磁共振动态增强扫描有助于富血供肝肿瘤的诊断及鉴别诊断。

重组人脑利钠肽治疗老年急性心肌梗死合并心衰的疗效和安全性

蔡卫东,李晓鲁,毕延萍

2010, 48(10):  92-94. 

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目的    探讨重组人脑利钠肽治疗老年急性心肌梗死合并左心功能衰竭的疗效及安全性。方法     选取老年急性心肌梗死合并左心功能衰竭患者46例，随机分为两组，治疗组在常规治疗基础上静脉泵入重组人脑利钠肽（先以负荷剂量1.5～2.0μg/kg静推, 再予维持剂量0.007 5～0.01μg/kg·min持续泵入）；对照组在常规治疗基础上静点硝酸甘油（起始剂量为5～10μg/min，每隔5～10min增加5～10μg/min，直至获满意效果），共用3d。观察两组患者用药前后血压、心率、尿量及血氧饱和度变化，并测量左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（FS）、心脏指数（CI）、二尖瓣舒张期E峰和A峰的比值（E/A）。结果      在降低血压、心率，增加尿量方面两组差异有统计学意义(P＜0.05)；治疗组用药后左室收缩指标（EF、CI）和舒张功能指数（E/F）较对照组明显改善（P＜0.05）；治疗组药物不良反应发生率9.1%,对照组41.7% ,差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论     重组人脑利钠肽治疗老年急性心肌梗死合并左心功能衰竭疗效显著，安全性好，不良反应发生率低。

重症瓣膜病的外科治疗

董思远，谷天祥，喻磊

2010, 48(10):  95. 

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目的     为提高重症瓣膜病患者外科治疗的成功率, 总结及探讨其围手术期处理的特点。方法     回顾性分析2000年12月～2009年6月行外科手术治疗的276例重症瓣膜病患者资料，总结围手术期及随访情况。结果     62例术后出现并发症，术后住院期间死亡12例，死亡率为4.35%。失访12例，其余随访3个月～9年，死亡6例，其余患者恢复良好，心功能均恢复至Ⅰ～Ⅱ级232例，Ⅲ级8例，Ⅳ级6例。结论     充分的术前准备，围手术期营养支持，正确地选择好手术时机，加强术中处理，积极治疗术后并发症是提高手术疗效的关键。

肝移植后胆道并发症早期肝功能的变化

杨德君，张海斌，司马辉，朱楠，杨广顺

2010, 48(10):  98-100. 

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目的    探讨肝移植术后缺血性胆道并发症(ischemictype biliary complications, ITBC)早期肝功能变化特点。方法     随访分析肝移植术后BC患者的临床表现，对BC患者早期肝功指标变化进行统计学分析。结果     181例肝移植中发生BC 26例(14.36%)。其中缺血性BC 11例，9例（81.82%）治疗效果差；BC患者早期ALP、rGT与TBIL、ALT的增幅出现分离现象；缺血性BC同非缺血性BC早期的TBIL、ALP、rGT有统计学差异。结论     BC发病早期更高的TBIL、ALP、rGT血清浓度提示缺血性胆道并发症可能，预后不良。

咽鼓管薄层断层解剖及临床应用

李晓1，王启荣1，刘树伟2，韩飞1，古林涛1，梁辉1，崔朝阳1

2010, 48(10):  101-104. 

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目的    为咽鼓管周围区域手术提供解剖学资料。方法    通过冰冻铣切技术获得咽鼓管区域连续薄层断层解剖图像，观察、测量咽鼓管及周围重要毗邻结构。结果     咽鼓管两侧枕状黏膜间经测量，咽口宽度为（4.92±2.68）mm；于咽口所在平面，11侧未见下鼻甲，测量剩余19侧标本咽口到下鼻甲后端黏膜距离为（11.65±3.42）mm；咽鼓管骨部与颈动脉管间骨质厚度为（1.28±0.31）mm。结论      通过对咽鼓管区的薄层断层解剖测量，可获得较精确的相关数据，为手术提供解剖学指导。

窄谱中波紫外线联合干扰素α-2b治疗蕈样肉芽肿对血清趋化因子CCL27的影响

司晓青1,辛琳琳1,李文飞1,李承明1,李春阳2

2010, 48(10):  105-107. 

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目的      观察窄谱中波紫外线(NB UVB) 联合干扰素(IFN)-α-2b治疗蕈样肉芽肿（MF）的临床疗效，并比较治疗前后患者血清趋化因子CCL27水平。方法     对17例MF患者行重组人IFNα-2b肌肉注射联合NB-UVB照射治疗,于治疗前后分别采集患者血清,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测其血清CCL27浓度，以16例健康人血清为对照组。结果     治疗前MF患者CCL27血清水平高于健康对照组（P＜0.01），联合治疗后17 例患者完全缓解率(CCR)为64.71%,部分缓解率(PCR)为29.41%,有效率(CCR+PCR)为94.12%；其治疗后的血清CCL27水平较治疗前显著下降（P＜0.01）。结论     NB-UVB照射联合IFNα-2b肌肉注射治疗蕈样肉芽肿是一种安全有效的方法，可降低患者血清CCL27水平。

腹腔镜辅助小切口亲属活体供肾切除术

刘仰东，李香铁，刘少鸽，石岩，杨先振

2010, 48(10):  108-110. 

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目的     探讨腹腔镜辅助小切口亲属活体供肾切取术手术方式的安全性及实用性。方法      回顾性分析济南军区总医院泌尿外科2007年12月至2009年6月，15例采用腹腔镜辅助小切口进行活体供肾切取的健康供肾者临床资料。结果     15例手术均成功，供肾热缺血时间(40±15)s，切取供肾平均手术时间65(50～85)min。术中出血(50±20)mL，移植肾开放血流后来尿时间平均为1min；移植肾功能恢复正常时间2～3d，血肌酐水平(110±30) μmol／L，供者切口引流管留置1～3d，术后住院时间5～6d。结论     腹腔镜辅助小切口活体供肾切取术不使用气腹，具有创伤小、手术时间短、恢复快、安全性和实用性较高特点，兼顾腹腔镜与开放手术的优势，并具有良好的经济性。

肝细胞生长因子和血管内皮生长因子C在非小细胞肺癌中的共表达及与淋巴管生成的相关性

林文俐1，张楠2，曲飞3，刘杰2，王婧男4，解田燕3，孙玉萍2

2010, 48(10):  111-115. 

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目的     检测肝细胞生长因子（HGF）和血管内皮生长因子C（VEGF-C）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达，分析两者的相关性及其与NSCLC淋巴管生成的关系。方法    应用免疫组织化学SP法,检测72例NSCLC患者及20例癌旁正常肺组织中HGF和VEGF-C的表达，用D2-40标记淋巴管,计数微淋巴管密度（LMVD），分析HGF和VEGF-C共表达情况及与LMVD和临床病理参数之间的关系。结果      HGF和VEGF-C在NSCLC中癌组织的表达明显高于癌旁正常肺组织（31.94% vs 15.00%、48.65% vs 25.00%, P均＜0.05），且两者存在明显正相关（ｒ＝0.170，Ｐ＜0.05）；HGF或VEGF-C阳性表达的LMVD显著增高［HGF:(16.98±4.31) vs (13.06±4.28), P＜0.05; VEGF-C:(19.43±3.24) vs (14.66±3.51), P＜0.05］，且与患者淋巴结转移成正相关（P均＜0.05）。结论    HGF和VEGF-C在NSCLC中存在共表达，且两者均与肿瘤淋巴管的生成及淋巴道的转移密切相关。

益气补肾中药脑神康胶囊的质量控制标准研究

钟丽红1，赵宇2，刘德山3

2010, 48(10):  116-119. 

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目的     建立脑神康胶囊多糖及主要活性成分黄芪甲苷、葛根素、淫羊藿苷、小檗碱以及熟地黄的限量成分5-羟甲基糠醛（5-HMF）的含量测定方法。方法      采用硫酸-苯酚法测定脑神康中多糖的含量；采用高效液相蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）测定黄芪甲苷的含量；采用高效液相色谱法(HPLC)测定葛根素、淫羊藿苷、小檗碱和5-羟甲基糠醛的含量。结果     脑神康胶囊中多糖、黄芪甲苷、葛根素、淫羊藿苷、小檗碱含量分别为5.01％、0.00796%、0.434%、0.0618%、0.108%；限量成分5-羟甲基糠醛含量为0.0219％。结论     初步建立了益气补肾中药脑神康胶囊的质量控制方法，为脑神康胶囊的进一步开发研究奠定了基础。

食管癌高发区食管炎影响因素的病例对照研究

张好1，周英智2，刁玉涛3，李会庆3，周瑞雪4，赵德利4，雷复华4

2010, 48(10):  120-124. 

摘要 ( 1098 )   PDF (376KB) ( 262 )   收藏

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目的     探讨食管癌高发区肥城市食管炎的影响因素。方法    在肥城市一食管癌高发乡镇40~69岁队列人群中，采用染色内镜和活检病理诊断方法确诊食管炎357例，作为病例组，另选取内镜检查食管黏膜正常者500例作为对照组。分析食管癌家族史、吸烟、饮酒、营养成分等与食管炎的关联，以OR及95%CI作为评价关联强度的指标。结果     将性别、年龄作为调整因素，以无食管癌家族史为比较的基线水平（OR=1.0），一级亲属患食管癌的OR为1.830（95%CI ：1.183~2.833）；以吸烟指数=0为比较的基线水平，吸烟指数≥500的OR为1.852（95%CI ：1.142~3.005）；以饮酒指数=0为比较的基线水平，饮酒指数<130和≥130的OR分别为1.789（95%CI ：1.141~2.804）、1.642（95%CI ：1.029~2.621）；将吸烟（吸烟、不吸烟）、饮酒（饮酒、不饮酒）情况进行组合，以不吸烟+不饮酒为比较的基线水平，吸烟+饮酒的OR为1.889（95%CI ：1.143~3.122）；将各营养成分年摄入量划分为3个层次，以最低水平为比较的基线水平，发现脂肪、叶酸、铁的影响达到显著性水平（OR均小于1）。结论      食管癌家族史、吸烟、饮酒是食管炎的危险因素，营养成分对食管炎的影响不明显。在食管癌高发区，特别是在有食管癌家族史的人群中，提倡戒烟戒酒，对预防食管炎进而减少食管增生和食管癌的发生具有重要的作用。

济南铁路工人非酒精性脂肪肝病的患病率及影响因素分析

李顺平1，刘婷婷2，陈春辉1，李咏梅2

2010, 48(10):  125. 

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目的     分析铁路工人非酒精性脂肪肝病（NAFLD）的患病率及其影响因素。方法     选取济南铁路局在职铁路工人2008年的体检数据12094份，采用单因素和二分类Logistic回归进行统计分析。结果     济南铁路工人的NAFLD患病率为33.8%，不同年龄、性别人群的NAFLD患病率差异均具有统计学意义；单因素分析显示，吸烟、饮酒、高血压（BP）、空腹血糖（FPG）、高甘油三脂（TG）和高体质量指数（BMI）是NAFLD的危险因素；二分类Logistic回归分析显示，性别、年龄、吸烟、饮酒、高BP、FPG异常、高TG和高BMI是NAFLD的危险因素。结论     铁路工人NAFLD患病率处于较高水平，需重视铁路工人的NAFLD防治工作。

艾滋病痴呆综合症患者体内HIV-1 tat基因的克隆及原核表达

蒲双双1，闫玉芬1，高文花2，温红玲1，宋艳艳1，许洪芝1，赵丽1,3

2010, 48(10):  128-132. 

摘要 ( 1054 )   PDF (987KB) ( 325 )   收藏

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目的     探讨艾滋病痴呆综合症（AIDS dementia complex，ADC）患者体内外周和中枢不同组织部位的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）反式激活因子（tat）第一外显子基因序列的变异并对其进行表达，用于研究HIV-1 Tat变异对其神经毒性的影响。方法     从ADC病例尸检标本的脾脏（spleen，SPL）、脑膜（meninges， MG）和基底核（basal ganglia，BG）3个部位的组织中提取基因组DNA，用PCR方法扩增出tat第一外显子基因，并将其插入到pGEM-T克隆载体中，测序证实为HIV-1 tat基因，BioEdit软件对测序结果进行比对。将克隆载体双酶切，回收目的基因，并将其连接到pGEX-KG表达载体中，将重组表达质粒pGEX-KG-tat转化BL21大肠杆菌，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）进行诱导表达，表达产物用SDSPAGE和Western blot进行检验和鉴定。结果    成功克隆了HIV-1 tat第一外显子基因，序列比对发现外周和中枢部位的Tat氨基酸序列不同；构建了pGEXKG-tat重组表达载体，并在原核细胞中高效表达了谷胱甘肽巯基转移酶（GST）融合Tat蛋白，SDSPAGE和Western blot分析表明，所表达的蛋白为Tat蛋白。结论     ADC患者外周和中枢不同组织部位的HIV-1 tat第一外显子基因所编码的Tat蛋白氨基酸序列存在变异，在原核细胞中对其进行了高效表达，为Tat蛋白的神经毒性研究奠定了基础。