当期目录

2015年 第53卷 第9期 刊出日期：2015-09-10

  

前沿进展

去势抵抗性前列腺癌的发生发展机制及药物治疗新进展

韩博, 戚美, 谭薇薇, 杨木易

2015, 53(9):  1-7.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.2.2015.002

摘要 ( 1555 )   PDF (1225KB) ( 449 )   收藏

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去势抵抗性前列腺癌(CRPC)患者预后极差。CRPC的发生和进展机制极为复杂,迄今尚未被完全阐明,因此治疗策略的选择仍是临床上极具挑战性的问题。近年来,治疗CRPC的新药不断涌现,包括雄激素合成抑制药物(阿比特龙)、雄激素受体(AR)抑制药物(恩杂鲁胺)、免疫治疗剂(sipuleucel-T)、放射剂(镭-223)和化疗药物(卡巴他赛)等。因而,针对CRPC的治疗有了更多选择,系统治疗亦发生了很大变化。简要综述近年来人们对CRPC发生发展机制的最新理解和最有前途的药物在CRPC治疗中获得的新进展。

基础医学

小鼠胚胎干细胞分泌因子对前列腺癌细胞作用的体外研究

翟红运, 张登禄, 王光杰, 孔峰, 程广辉, 赵升田

2015, 53(9):  8-12.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.219

摘要 ( 1057 )   PDF (4638KB) ( 302 )   收藏

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目的 研究小鼠胚胎干细胞(ESC)分泌因子对前列腺癌细胞RM-1生物学特性的影响,并探讨其作用机制。方法 采用Transwell小室在体外建立ESC联合小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)与RM-1细胞的非接触式共培养体系作为实验干预(实验组),同时建立MEF与RM-1细胞的共培养体系作为阴性对照(对照组)。共培养72 h后,检测实验组与对照组RM-1细胞的增殖水平,比较两组细胞的形态学、细胞周期、凋亡水平、迁移与侵袭能力的差异。结果 与对照组比较,实验组RM-1细胞的形态表现为排布稀疏,分裂减少,死亡增多,部分细胞呈现凋亡迹象;实验组RM-1细胞增殖减慢(P<0.01),细胞周期存在G₁→S期阻滞且凋亡增加,以晚期凋亡为主(P均<0.01);实验组RM-1细胞的迁移和侵袭能力减弱(P均<0.05)。结论 ESC分泌因子可通过阻滞RM-1细胞周期、促进其凋亡使RM-1细胞的增殖减慢,同时减弱其迁移与侵袭能力而发挥抗肿瘤作用。

氯化两面针碱对前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响

程翔宇, 邢锐, 邢召全, 郭兆新, 郭晓宇, 苏静, 孟力维, 刘照旭

2015, 53(9):  13-18.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.281

摘要 ( 1063 )   PDF (6076KB) ( 451 )   收藏

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目的 探讨氯化两面针碱对前列腺癌细胞PC-3增殖及凋亡的影响作用。方法 采用MTT、细胞划痕和Transwell侵袭实验评估氯化两面针碱对人前列腺癌细胞PC-3增殖与侵袭的影响;流式细胞术检测氯化两面针碱对PC-3细胞凋亡的影响;免疫印迹检测AKT/mTOR及细胞凋亡蛋白B细胞淋巴瘤基因-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)的表达,应用PI3K通路抑制剂LY294002探讨抑制AKT通路对前列腺癌细胞PC-3的影响。结果 氯化两面针碱能抑制PC-3细胞的增殖与侵袭,且具有剂量依赖性(P<0.01)。氯化两面针碱可下调Bcl-2、而上调Bax的蛋白表达,Bax/Bcl-2比例明显上升(P<0.01),抑制AKT和mTOR通路的磷酸化,诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡。联合应用LY294002发现,抑制AKT通路可增强氯化两面针碱对前列腺癌细胞PC-3增殖和侵袭的抑制作用。结论 氯化两面针碱能够抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖与侵袭,诱导其凋亡,并通过抑制AKT/mTOR磷酸化发挥其抗前列腺癌作用,可作为一种潜在治疗前列腺癌的药物。

泌尿系结石化学成分对超声声影强弱的影响

刘青, 商蒙蒙, 孙霄, 李杰, 杨杰, 时丹丹, 宁松

2015, 53(9):  19-23.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2014.931

摘要 ( 1156 )   PDF (2614KB) ( 132 )   收藏

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目的 定量研究结石化学成分与超声声影的关系。方法 制备一水草酸钙、羟基磷灰石、胱氨酸和尿酸结石模型,包埋于猪肾中进行超声扫查及CT扫描,记录各结石模型所产生声影的对比噪声比(C/N)及CT值,并行统计分析。结果 所有结石均表现为强回声伴后方声影征象,声影C/N值大小为1.01~3.74,平均为2.17;以结石化学成分分组,超声声影C/N值及CT值由大到小排列依次为羟基磷灰石、一水草酸钙、胱氨酸、尿酸,差异有统计学意义(P均<0.001);声影C/N值与CT值呈正相关(r=0.942, P<0.001)。结论 结石所产生的声影强弱程度与其化学成分密切相关,且声影的强弱趋势与CT值大小趋势一致;可通过声影的强弱程度对结石化学成分进行初步预测。

CXCL16在阿霉素肾病小鼠中的表达及辛伐他汀对其的影响

王聪, 孙书珍, 甄军晖, 李倩, 许艺怀

2015, 53(9):  24-29.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2014.908

摘要 ( 948 )   PDF (3535KB) ( 326 )   收藏

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目的 观察CXC趋化因子配体16(CXCL16)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在阿霉素肾病小鼠中表达的变化及其与肾组织形态学的关系,探讨辛伐他汀对阿霉素肾病肾脏保护作用的机制。方法 将15只雄性Balb/c小鼠分为正常对照组、阿霉素肾病组、辛伐他汀治疗组,每组5只,分别进行相应处理。5周后留取血液、24 h尿液,进行一般生化指标及血清ox-LDL的检测;此后处死小鼠,摘取肾脏组织,采用光镜、电镜和双重免疫荧光技术分别观察肾组织形态结构、超微结构和CXCL16、ox-LDL的表达。结果 与正常对照组相比,阿霉素肾病组与辛伐他汀治疗组小鼠血清总胆固醇和ox-LDL水平升高,肾组织CXCL16、ox-LDL表达增强(P均<0.05)。与阿霉素肾病组相比,辛伐他汀治疗组小鼠肾组织CXCL16、ox-LDL表达均有不同程度的降低(P均<0.05),但血清总胆固醇和ox-LDL水平没有明显下降。相关分析显示,肾组织CXCL16表达水平与肾组织病理学慢性指数、肾组织ox-LDL水平呈明显正相关(rPrP<0.01)。结论 辛伐他汀可能通过抑制肾小球足细胞CXCL16的表达,进而减少足细胞对ox-LDL的摄取而发挥肾脏保护作用。

糖尿病大鼠尿道α1肾上腺素能受体与神经生长因子表达的改变及其对尿道功能的影响

张东青, 王勇, 陈守臻, 朱耀丰, 史本康

2015, 53(9):  30-34.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.581

摘要 ( 958 )   PDF (2413KB) ( 213 )   收藏

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目的 探讨糖尿病大鼠尿道α1肾上腺素能受体与神经生长因子(NGF)表达的改变及其对尿道功能的影响。方法 20只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组(10只)和糖尿病组(10只)。采用尿流动力学方法检测大鼠膀胱与尿道压力;RT-qPCR与Western blotting测定两组大鼠尿道中α1肾上腺素能受体的表达;RT-qPCR与ELISA法测定两组大鼠尿道中NGF的表达。Western blotting测定两组大鼠尿道中NGF前体(proNGF)、P75神经营养因子受体(P75^NTR)及 Sortilin的表达水平。结果 与对照组比较,糖尿病组大鼠尿道舒张时的最低尿道灌注压增高;静脉注射α1肾上腺素能受体拮抗剂(盐酸坦索罗辛)可降低糖尿病大鼠的最低尿道灌注压以及尿道灌注压的基线水平。RT-qPCR与Western blotting结果显示,糖尿病组大鼠尿道α1a 和α1d受体表达水平升高(P<0.05)。RT-qPCR与ELISA结果显示,糖尿病组大鼠尿道NGF的表达明显减少。Western blotting结果显示,糖尿病组大鼠proNGF的表达升高(P<0.05)、大鼠尿道中P75^NTR表达减少(P<0.05),两组比较Sortilin的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 糖尿病大鼠尿道中α1肾上腺能受体表达水平的升高以及NGF/proNGF通路的改变可能是导致糖尿病尿道功能紊乱的机制。

肠道病毒71型微复制子的构建

马英伟, 孙乐乐, 李静, 乔乔, 庄志超, 赵丽, 于学杰, 王志玉, 温红玲, 孙妍琳

2015, 53(9):  35-40.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.096

摘要 ( 1301 )   PDF (1667KB) ( 353 )   收藏

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目的 构建EV71非结构蛋白及EV71 3C蛋白酶微复制子体系,研究微复制子的复制及表达情况。方法 聚合酶链式反应扩增绿色荧光蛋白(EGFP),利用特定酶切位点及连接酶,将目的基因片段连接至pMD19-T载体,分别构建EV71非结构蛋白及EV71 3C蛋白酶微复制子体系。荧光显微镜下观察微复制子表达情况,实时荧光定量PCR观察微复制子复制情况。结果 EV71非结构蛋白微复制子及EV71 3C蛋白酶微复制子表达后,均可观察到特异性绿色荧光,荧光强度有明显差异;转染后12~72 h取样所测RNA含量几乎不变。结论 非结构蛋白全长及3C蛋白酶启动微复制子转录强度不同,所构建微复制子不具备复制功能,提示结构蛋白编码区对病毒RNA复制有重要意义。

葡萄籽原花青素对小鼠脂肪肝模型缺血再灌注造成的急性肝损伤的保护作用

李少伟, 刘宗正, 刘春霞, 张焱如, 周欢敏

2015, 53(9):  41-46.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2014.716

摘要 ( 1198 )   PDF (3591KB) ( 114 )   收藏

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目的 探讨葡萄籽原花青素对脂肪肝缺血再灌注(IR)损伤小鼠模型的保护作用。方法 将30只C57BL/6小鼠随机分为3组。喂食蛋氨酸胆碱缺乏高脂饲料3周后进行非酒精性脂肪肝造模,实验分3组:假手术组、对照组(肝脏缺血再灌注前灌服蒸馏水)、花青素缺血再灌注组(肝脏缺血再灌注前灌服原花青素)。再灌注6 h后处死小鼠,检测血清中丙氨酸转氨酶(AST)和天冬氨酸转氨酶(ALT)含量,观察肝脏组织形态学变化,分析肝脏组织损伤程度,巨噬细胞浸润程度,炎性因子TNF-α、IL-6、iNOS、INFγmRNA表达水平和肝脏组织内p38蛋白表达水平。结果 与对照组相比较,花青素组血清ALT和AST水平较低(P<0.05),巨噬细胞浸润和凋亡细胞明显减少,炎性因子mRNA的表达明显降低。蛋白水平p38基本无变化,磷酸化的p38表达显著升高。结论 花青素能够减轻脂肪肝小鼠肝脏IR损伤,其机制可能与抑制肝脏再灌注后氧化应激反应和炎症反应,促进p-p38的表达升高有关。

伯氏疏螺旋体诱导大鼠类风湿关节炎模型的建立

王威严, 杨清锐, 师健民, 赵璐莲, 张源潮

2015, 53(9):  47-52.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.019

摘要 ( 1121 )   PDF (2979KB) ( 196 )   收藏

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目的 应用伯氏疏螺旋体全菌蛋白首次皮内注射,再次腹腔注射加强免疫诱导Lewis大鼠类风湿关节炎(RA)模型并通过检测血清细胞因子探讨该模型发病机制。 方法 将雄性Lewis大鼠54只随机分为螺旋体低剂量组、螺旋体中剂量组、螺旋体高剂量组、完全弗氏佐剂组、不完全弗氏佐剂组及PBS组,每组9只。采用关节炎指数和组织病理学方法观察大鼠的发病程度和病理特点。采用双抗体夹心ELISA法检测血清RF、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17含量。 结果 螺旋体高剂量组大鼠关节炎发病率为66.7%。病变关节病理显示关节滑膜组织增生,炎性细胞浸润,软骨及骨质侵蚀,呈典型的关节炎改变。螺旋体高剂量组与完全弗氏佐剂组相比关节炎指数、组织病理学评分及血清RF、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17水平的差异无统计学意义(P>0.05)。螺旋体高剂量组与PBS组相比关节炎指数、组织病理学评分及血清RF、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显升高(P<0.05)。结论 伯氏疏螺旋体全菌蛋白成功诱导大鼠关节炎,与人类RA的发病及病理特点极为相似,是研究RA较理想的模型之一。

Lipin1过表达对糖尿病大鼠周围神经病变的影响

徐懿, 庄向华, 刘元涛, 孙爱丽, 李晓博, 姜冬青, 张亮, 徐敏, 闫姮, 陈诗鸿

2015, 53(9):  53-57.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.296

摘要 ( 1070 )   PDF (2500KB) ( 224 )   收藏

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目的 探讨脂素(Lipin1)对糖尿病(DM)大鼠周围神经早期病变的影响。方法 应用高糖高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素构建2型糖尿病(T2DM)动物模型,36 只8周龄Wistar大鼠,随机分为空载体(LV-control)组、Lipin1过表达(LV-Lipin1)组,正常对照(NC)组。LV-Lipin1、LV-control组分别通过尾静脉注射Lipin1慢病毒载体与空慢病毒载体。8周后观察各组大鼠空腹血糖(FBG)、体质量(BW);测定坐骨神经传导速度(MNCV);观察坐骨神经病理形态学改变;应用免疫组化法测定Lipin1表达。结果 DM大鼠成模后8周时,LV-control组较NC组Lipin1表达减少,且神经纤维直径、密度、面积均减少(P<0.05);LV-Lipin1组神经纤维直径、密度、面积均较LV-control组改善(P<0.05);LV-Lipin1组较LV-control组坐骨神经神经传导速度明显改善(P<0.05)。结论 DM周围神经病变大鼠坐骨神经中Lipin1表达降低,上调Lipin1表达后DM大鼠坐骨神经神经传导速度改善,病理学观察可见神经髓鞘结构和轴突形态的改善。

临床医学

乌苯美司诱导肾癌细胞死亡的作用及机制

黄智龙, 刘帅, 王建伟, 韩立平, 王晓庆, 李新, 毕东滨, 解放, 牛志宏

2015, 53(9):  58-64.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.415

摘要 ( 918 )   PDF (3715KB) ( 190 )   收藏

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目的 观察乌苯美司对肾癌细胞增殖及死亡的影响并探讨其可能机制。方法 利用WST-8细胞增殖实验及细胞生长曲线检测乌苯美司对肾癌细胞增殖能力的影响;LDH释放实验检测乌苯美司对肾癌细胞死亡的影响;酶活性测定法及Western blotting研究乌苯美司诱导肾癌细胞APN活性及表达;Western blotting及免疫组化染色观察乌苯美司的作用靶点氨肽酶N(APN)/CD13在肾癌组织及正常组织中的表达。结果 乌苯美司不能降低肾癌细胞中APN的表达但是可以抑制其活性;乌苯美司可抑制肾癌细胞增殖及活力,诱导细胞自噬性死亡。结论 乌苯美司可抑制肾癌细胞增殖,并可通过诱导自噬引发肾癌细胞死亡。

肾单位保留术和肾癌根治术治疗T1b期肾癌的Meta分析

苏静, 薛娇美, 孙菲菲, 郭兆新, 程翔宇, 孟力维, 刘照旭

2015, 53(9):  65-70.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2014.830

摘要 ( 1310 )   PDF (3665KB) ( 249 )   收藏

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目的 比较肾单位保留术(NSS)和肾癌根治术(RN)治疗对侧肾功能正常的T1b期原发性肾癌患者预后结局。方法 计算机检索PubMed、Elsevier ScienceDirect、Web of Science、Co-chrane Library、中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库、中文科技期刊数据库和万方数据库,查找所有比较NSS和 RN 治疗T1b期肾癌的队列研究,检索时限均为建库至 2014年 9月 30 日。同时手工检索纳入文献的参考文献。按纳入排除标准筛选文献、提取资料和评价质量后,采用Stata12.0软件进行Meta 分析。结果 共纳入11项研究,23939例患者。Meta分析结果显示,NSS和RN治疗T1b期肾癌的5年[RR=1.05, 95%CI(0.98, 1.13)]、7年[RR=1.02, 95%CI(0.94, 1.10)]、10年[RR=1.30, 95%CI(0.96, 1.77)]的生存率差异无统计学意义;NSS的5年肿瘤特异生存率高于RN[RR=1.11, 95%CI(1.06, 1.16)]; NSS的5年肿瘤特异死亡率低于RN[RR=0.70, 95%CI(0.55, 0.90)]; NSS的肿瘤转移率低于RN[RR=0.38, 95%CI(0.22, 0.66)]。结论 对于纳入本研究的患者,NSS和RN比较,患者的5、7、10年生存率相似,但NSS 5年肿瘤特异生存率高,5年肿瘤特异死亡率、转移率低。

中国人群中血清TK1对不同恶性肿瘤诊断价值的Meta分析

刘京生, 刘桂华, 杜昆, 赵倩, 翁韶波, 赵学英, 张喜庄, 金讯波

2015, 53(9):  71-79.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.514

摘要 ( 1472 )   PDF (6192KB) ( 323 )   收藏

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目的 系统评价核酸合成的关键酶——胸苷激酶1 (TK1) 在中国人群恶性肿瘤中的诊断价值。方法 在中国期刊全文数据库(CNKI)和万方数据库中检索2008年1月至2015年3月发表的相关临床研究,采用Revman 5.2和Meta Disc 1.4进行分析。结果 共检索到相关文献415篇,最终纳入45篇,包括2 976例肿瘤患者,并全部经“金标准”确诊。Meta分析结果显示,各亚组间均存在明显的异质性,血清TK1检测在中国人群不同类型恶性肿瘤中表现出中度敏感性,其中肺癌、乳腺癌、妇科恶性肿瘤、前列腺癌、胃癌、结直肠癌、食管癌亚组的合并诊断敏感性分别为0.508、0.638、0.524、0.656、0.583、0.546、0.681;相应诊断特异性分别为0.973、0.932、0.940、0.925、0.941、0.947、0.967。结论 血清TK1检测在中国人群不同类型恶性肿瘤的筛选及早期诊断中具有一定的临床应用价值,但尚不能单独作为肿瘤筛选和辅助的诊断标准。国内评估血清TK1诊断价值的诊断性试验质量不高,存在较大的异质性,需要更多高质量的研究进一步验证。

Alport综合征iPSCs差异性表达新小核糖核苷酸的分析

陈文标, 喻祥琪, 戴勇

2015, 53(9):  80-85.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.307

摘要 ( 1154 )   PDF (904KB) ( 245 )   收藏

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目的 构建Alport综合征(AS)与正常对照者(NC)诱导多能干细胞(iPSCs)新核糖核苷酸(novel microRNA)差异性表达谱,分析其靶基因功能。方法 采用前期工作成功从尿肾状杆细胞诱导成的iPSCs,运用高通量测序平台获得AS与NC的差异性表达谱,使用靶基因预测软件TargetScan进行靶基因预测,靶基因与参考基因比较后,在候选靶基因找到显著富集的GO条目及KEGG通路。结果 在AS与NC中发现49个有意义的差异性表达novel microRNAs,其中33个表达上调,16个表达下调。在GO靶基因富集分析中,靶基因主要富集于生物调节、生物新陈代谢、细胞组成、细胞信号传导、酶催化反应、分子转运等过程。在KEGG通路分析中,靶基因主要参与代谢通路、嘌呤代谢、癌症转录调节等过程。结论 来源于AS与NC的iPSCs存在较大的差异性表达novel microRNA,其靶基因在分子功能、细胞组成、生物过程起着重要作用。这些差异性表达的novel mciroRNAs与靶基因可能是AS发病机制的潜在位点。

单侧外固定支架结合负压封闭引流技术治疗胫腓骨GustiloⅢ型骨折的疗效

董吴平

2015, 53(9):  86-89.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.1.2015.001

摘要 ( 1255 )   PDF (817KB) ( 211 )   收藏

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目的 研究单侧外固定支架结合负压封闭引流技术(VSD)治疗胫腓骨Gustilo Ⅲ型骨折的临床疗效。方法 从2010年7月至2015年4月我科收治的胫腓骨Gustilo Ⅲ型骨折患者中选取57例为观察组,行单侧外固定支架结合VSD治疗;选取2006年7月至2010年6月在我科行切开复位钢板内固定术的同类患者59例为对照组。观察两组平均骨性愈合时间、住院时间、术中出血量及术后并发症的发生情况。所有患者随访半年,观察两组的疗效。结果 观察组平均骨性愈合时间(180.65±30.36)d、住院时间(27.84±3.87)d、术中出血量(393.56±12.09)mL,分别低于对照组(340.00±40.51)d、(46.27±4.84)d、(545.36±50.40)mL,差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组骨髓炎发生率1.75%、浅表感染率5.26%、畸形愈合发生率0.00%,分别低于对照组11.86%、21.05%、8.47%,差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组疗效优者占比80.70%、优良率91.23%,均分别高于对照组的61.02%、77.97%,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 单侧外固定支架结合VSD治疗胫腓骨Gustilo Ⅲ型骨折,不仅有利于骨折愈合,而且可缩短患者住院时间并减少并发症的发生。

医学心理学

精神科护士人格特征与心理困扰的关系:心理弹性的中介作用

刘春琴, 李华芳, 田晓红, 邹桂元, 厉萍

2015, 53(9):  90-94.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2014.717

摘要 ( 1163 )   PDF (886KB) ( 300 )   收藏

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目的 探讨精神科护士人格特征与心理困扰的关系及心理弹性的中介作用。方法 采用大五人格问卷(BFI)、心理弹性量表(CD-RISC 10)和凯斯勒10量表(K10)对192名精神科护士进行问卷调查。 结果 精神科护士K10得分为20.66±5.91,80.7%的精神科护士存在不同程度的心理困扰(K10得分≥16)。K10总分与人格特征中的N维度呈显著正相关(P<0.01),与E维度、C维度、心理弹性呈显著负相关(均P<0.01),心理弹性与E维度、C维度呈显著正相关(均P<0.01),与N维度呈显著负相关(P<0.01)。心理弹性部分中介了神经质与心理困扰的关系,中介效应占总效应的25.4%。 结论 神经质人格与心理弹性是影响精神科护士心理困扰发生的重要因素,心理弹性部分中介了神经质人格对心理困扰的影响。

病例报道

左肾上腺血管瘤1例

王宝, 赵斌

2015, 53(9):  95-96.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.400

摘要 ( 984 )   PDF (1068KB) ( 186 )   收藏

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