山东大学学报 (医学版)

ACE2基因过表达对糖尿病心肌病大鼠心功能的影响

于庆涛,高燕燕,张蕾,戴红艳,杨亚培,董秋立,刘斌,张永欢,董波

2008, 46(4): 331-334.

摘要 ( 1271 )

PDF (439KB) ( 666 )

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目的研究腺病毒为载体的血管紧张素转换酶-2(ACE2)基因转染对大鼠糖尿病心肌病(DCM)的治疗作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型，12周后分别将生理盐水、EGFP基因、ACE2基因注入对照组、EGFP组、ACE2组大鼠心脏。转染后10d，实时荧光定量PCR比较各组大鼠ACE2mRNA的表达，转染后30d，超声检测各组大鼠的心脏功能,Masson染色测定心肌胶原含量，酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的水平。结果ACE2组分别与对照组和EGFP组比较，ACE2mRNA的表达明显升高(P<0.05)，心脏收缩和舒张功能明显改善(P<0.05)，心肌胶原和AngⅡ含量明显减少(P<0.01)。结论ACE2基因过表达可以改善糖尿病心肌病大鼠的心功能。

RSV感染哮喘小鼠气道炎症及重构与激素抵抗性的研究

杨艳娜,陈方方,李洧,王艳,王星光,姜淑娟

2008, 46(4): 335-339.

摘要 ( 1172 )

PDF (486KB) ( 469 )

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目的观察小鼠哮喘模型感染呼吸道合胞病毒（respiratary syncytial virus，RSV）气道炎症及重构与哮喘治疗激素敏感性之间的联系。方法50只BALB/c小鼠随机分对照组，单纯卵蛋白 (OVA)致敏哮喘组（A组）、OVA致敏哮喘+地塞米松（DEX）组（B组）、OVA致敏哮喘+RSV感染组（C组）、OVA致敏哮喘+RSV感染+ DEX组（D组），每组10只；酶联免疫吸附法（ELISA）检测白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、转化生长因子β₁（TGF-β₁）及γ干扰素（IFN-γ）浓度;病理切片行HE染色、Van Gieson 氏染色，显微镜下观察气管外周炎性分级和气道胶原沉积情况。结果A、C、D组与对照组比较IL-4、IL-5及TGF-β₁浓度升高，气道胶原沉积、炎症浸润加重，差异有统计学意义（P＜0.05）；D组与C组比较，C组与A组比较，TGF-β₁浓度升高，差异有统计学意义（P＜0.05），气道炎症及气道胶原沉积加重。结论RSV感染哮喘小鼠可引起明显的Th2细胞炎性反应及气道重构；应用激素干预治疗后，气道炎症及重构进一步加重，表明RSV感染哮喘小鼠对激素治疗敏感性差。

RRMS疾病潜在生物标记物关系探讨

柏淑美,刘师莲,杨银荣,郭绪晓,秦延江,邓小梅

2008, 46(4): 340-343.

摘要 ( 1071 )

PDF (418KB) ( 400 )

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目的通过对复发-缓解型多发性硬化(RRMS)患者脑脊液进行比较蛋白质组学及生物信号网络分析,探索其潜在生物标记物之间以及生物标记物与该疾病间的关系。方法分别收集RRMS组和对照组脑脊液进行双向凝胶电泳,ImageMaster 2D图像分析软件筛选出表达有显著差异的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离／飞行时间质谱对其进行鉴定,ELISA进行定量验证,MetaCore集成软件对所鉴定蛋白质进行相关分析。结果8个蛋白质点在两组凝胶图谱上存在明显差异,4个点在RRMS组显著上调,4个点下调,其中Cystatin C 的ELISA结果为，RRMS组(4.36±1.22)mg／L，对照组(6.00±1.68)mg／L,两组比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。结果表明，对所鉴定蛋白质成功构建了信号网络图谱。结论蛋白质点的差异表达及其生物信号网络图谱在分子水平上对RRMS疾病的发病机理、鉴别诊断及药物靶点的探索提供了依据。

没药倍半萜成分的分离鉴定及抗肿瘤活性

吉恺,孔峰,沈涛,王小玲,许爱辉,苑辉卿,张秀田

2008, 46(4): 344-348.

摘要 ( 1185 )

PDF (546KB) ( 377 )

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目的从没药提取物中分离纯化倍半萜单体成分，并探讨其抑制肿瘤细胞增殖的生物活性。方法没药石油醚提取部分经硅胶柱层析分离得到二十多个倍半萜类化合物。其中化合物1和2的结晶分别经熔点测定、薄层层析、1H-NMR和13C-NMR数据分析以及与已知化合物比较，确定其化学结构。利用MTT法检测化合物1和2对大肠癌细胞HT-29和激素非依赖型前列腺癌细胞PC-3、PC-3M、DU-145及正常肝的永生化细胞LO2细胞增殖的影响。结果经理化性质鉴定、波谱分析，确定化合物1的结构为［1(10)E,2R,4R]-2-甲氧基-8,12-环氧吉玛-1(10),7,11-三烯-6-酮；化合物2的结构为2-甲氧基-5-乙酰基-4-呋喃吉玛-1(10)-烯-6-酮，二者同属没药吉玛烷型倍半萜类化合物。MTT结果表明，化合物1和2对大肠癌细胞增殖的抑制作用较弱。而对三种激素非依赖型前列腺癌细胞的增殖有非常显著的抑制作用（P＜0.01），且呈剂量依赖性。另外，化合物对正常肝永生化细胞的增殖无明显影响。结论经分离纯化、理化性质鉴定和波谱分析，确定了没药吉玛型倍半萜化合物1和2的结构，该化合物对前列腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用。

短发夹RNA干扰表达质粒逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的研究

魏军民,候明,李丽珍,孔峰,卞继峰

2008, 46(4): 349-352.

摘要 ( 1076 )

PDF (339KB) ( 565 )

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目的构建靶向多药耐药基因（MDR-1）的短发夹RNA（short hairpin loop RNA shRNA）干扰表达质粒，并探讨其逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的作用效果。方法根据MDR-1基因表达序列设计有效的RNA干扰片断，构建并获得MDR-1基因特异的shRNA质粒表达载体pRNAT-U6.1/Neo－mdr1，采用lipofectin2000分别转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR，利用G418筛选稳定表达的细胞克隆。利用RT-PCR检测MDR-1-RNA的表达，Western Blotting检测MDR-1蛋白质的表达，MTT法检测耐药逆转效果，罗丹明123外排实验检测p-gp的转运功能。结果成功构建表达siRNA的质粒载体pRNAT-U6.1/Neo－mdr1，转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR后48h及G418筛选后1、2月，mdr1-RNA及蛋白质表达均呈明显下降，p-gp的转运功能明显提高，对阿霉素的敏感性增强，与耐药细胞及转入空白载体的细胞比较，差异有统计学意义（P均＜0.05）。筛选后1、2月与转入48h比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论shRNA干扰表达质粒pRNAT-U6.1/Neo-mdr1能够稳定、持久的抑制MDR-1基因，逆转乳腺癌细胞MCF-7/ADR对阿霉素的耐药性。

益肾活血胶囊对同型半胱氨酸致兔动脉粥样硬化MCP-1mRNA表达及NF-κB活化的影响

刘粉叶,张继东,胡连海,来丽萍,杨发林

2008, 46(4): 353-356.

摘要 ( 949 )

PDF (395KB) ( 314 )

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目的探讨益肾活血胶囊对同型半胱氨酸（Hcy）致兔动脉粥样硬化（AS）单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）基因表达及核因子-κB（NF-κB）活化的影响。方法将40只新西兰兔随机分为正常组、模型组、益肾活血胶囊小剂量组、益肾活血胶囊大剂量组及西药（叶酸、维生素B₆、维生素B₁₂）组，除正常组外，其他组建立高Hcy血症及AS动物模型，然后分别给予相应的药物治疗。采用高效液相色谱技术检测血浆Hcy浓度、HE染色观察血管形态学变化、实时定量PCR检测动脉壁MCP-1基因表达、Western blot分析核因子-κB抑制因子α（IκBα）蛋白含量。结果益肾活血胶囊和叶酸等维生素均可明显降低血浆Hcy水平（P＜0.01），抑制血管内膜增厚，下调腹主动脉MCP-1基因表达（P＜0.01），增加IκBα蛋白含量（P＜0.01）。益肾活血胶囊大剂量组疗效明显优于小剂量组和西药组（P＜0.05）。结论益肾活血胶囊可明显降低血浆Hcy水平，抑制Hcy诱导的动脉粥样硬化的形成，其机制可能与下调MCP-1基因表达，抑制NF-κB活化有关。

SS-GAG对高糖状态下血管内皮细胞NO释放及ET-1分泌的影响

王瑞鑫,王春波,罗世滨,李裕强

2008, 46(4): 357-361.

摘要 ( 1112 )

PDF (554KB) ( 361 )

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目的观察高糖状态下扇贝裙边糖胺聚糖(scallop skirtglycosaminoglycan, SS-GAG)对体外培养的血管内皮细胞(ECV-304)一氧化氮(NO)释放及内皮素-1(ET-1)分泌的影响。方法在体外培养生长良好的ECV-304分别加入不同浓度葡萄糖，建立高糖损伤细胞模型，选择葡萄糖终浓度为55.5mmoL/L的培养液作为高糖环境,加入不同浓度SS-GAG继续培养至12、24、36、48h，倒置显微镜下观察细胞生长状态，特异性硝酸还原酶法检测细胞内NO，放射免疫法测定ET-1。结果① 高糖能抑制ECV-304细胞生长,细胞形态发生改变。 SS-GAG减轻高糖对ECV-304损伤，SS-GAG保护组细胞形态基本完好；② 高浓度葡萄糖促进ET-1的分泌，与正常对照比较差异有统计学意义（P＜0．01)。而NO含量则随作用时间的延长表现出先升高后下降的动态变化过程，与正常对照比较差异有统计学意义（P＜0．01)。SS-GAG对高糖状态下ECV-304细胞分泌ET1、NO具有调节作用，使其趋于正常，与正常对照比较差异无统计学意义（P＞0．05)，与高糖比较差异有统计学意义（P＜0．01)。结论高浓度葡萄糖对ECV-304具有明显的损伤作用，可直接导致ECV-304形态和功能异常,引起ET-1分泌增多以及损伤内皮NO系统使NO分泌失调。SS-GAG可减轻高糖对ECV-304细胞的损伤，通过调节 ET和NO平衡，起到保护ECV-304作用。

氯沙坦及A779对糖尿病心肌病大鼠心肌间质纤维化的影响

胡圣,张绪洪,董波,朱梅,张月辉,于庆涛

2008, 46(4): 362-365.

摘要 ( 1110 )

PDF (410KB) ( 391 )

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目的观察氯沙坦对糖尿病心肌病大鼠心肌间质纤维化的影响并探讨其机制。方法将39只雄性Wistar大鼠给予链脲佐菌素（STZ）55mg/kg一次性腹腔注射12周后，将血糖＞16.7mol/L且具有多饮、多食、多尿现象的36只大鼠纳入实验。实验大鼠随机分为糖尿病心肌病 (DCM)组、氯沙坦组和A779+氯沙坦组，每组12只。给予氯沙坦组大鼠氯沙坦10mg/(kg·d)灌胃，给予A779+氯沙坦组大鼠氯沙坦10mg/(kg·d)灌胃和血管紧张素-（1-7）受体拮抗剂A779 100ng/(kg·d)尾静脉注射，给予DCM组大鼠等量生理盐水灌胃，治疗持续4周。第16周末采用心脏超声、Masson染色及RT-PCR的方法测定大鼠的左室舒张末期内径（LVIDd）、左室收缩末期内径（LVIDs）、短轴缩短率（FS）、左室射血分数（LVEF）、E/A（E峰/A峰）、左室心肌胶原含量、ACE2 mRNA的表达。结果与DCM组比较，氯沙坦组和A779+氯沙坦组大鼠的LVIDs、LVIDd降低（P＜0.01），E/A、FS、LVEF升高（P＜0.01），左室胶原含量减轻（P＜0.01），ACE2 mRNA表达增高（P＜0.01）；与氯沙坦组比较，A779+氯沙坦组大鼠LVIDs、LVIDd升高（P＜0.05），E/A、FS、LVEF降低（P＜0.05），左室胶原含量升高（P＜0.05），ACE2 mRNA表达无明显差异。结论氯沙坦通过Ang(1.7)途径减少纤维化及改善心功能。

西洛他唑对全脑缺血大鼠学习记忆功能及半胱氨酸天冬酶-3表达的影响

李云,袁晓东,欧阳和中,张轶超,朱美蓉

2008, 46(4): 366-369.

摘要 ( 1050 )

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目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠学习记忆功能及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)表达的影响。方法采用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组（n=8×1）、缺血模型组(n=8×7)和治疗组(n=8×7)。治疗组于缺血前6h和2h各灌胃给予西洛他唑(30mg/kg)，以后每隔24h重复给药，其他各组灌胃给予30%二甲基亚砜(30mg/kg)。缺血模型组和治疗组于缺血10min再灌注，6、12、24、48、72h、5d和7d 7个亚组灌注后断头取脑, 采用免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区caspase-3表达水平的变化。另取24只大鼠随机分为假手术组、缺血模型组及治疗组，每个亚组8只。应用Morris水迷宫对全脑缺血再灌注7d的大鼠进行缺血后学习记忆功能的测定。结果caspase-3在假手术组极少见阳性表达；缺血模型组caspase-3的表达于再灌注6h增加，72h达高峰，7d接近正常；治疗组48h、72h、5d和7d亚组caspase-3平均阳性细胞数明显低于缺血模型组(P＜0.05)；与假手术组比较，5d之中缺血模型组和治疗组平均逃避潜伏期明显延长（P＜0.01)；与缺血模型组比较，前4d治疗组平均逃避潜伏期明显缩短（P＜0.01)，第5天两组大鼠的平均逃避潜伏期差异无统计学意义（P＞0.05）。结论西洛他唑可以有效地抑制caspase-3升高，这可能是西洛他唑改善缺血大鼠学习记忆功能的机制之一。

绞谷蓝皂苷含药血清对谷氨酸氧化性神经损伤的保护作用

刘鲁华,逯素梅,孙涛,张道来,冯玉新,辛华

2008, 46(4): 370-373.

摘要 ( 1247 )

PDF (504KB) ( 448 )

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目的研究绞股蓝皂苷（gypenosides,GP)含药血清对谷氨酸(glutamic acid ,Glu)诱导的氧化性神经损伤的保护作用。方法采用中药血清药理学方法，收集GP含药血清，以体外培养的胎鼠大脑皮层神经元为研究对象，采用倒置相差显微镜观察细胞形态；MTT法测定细胞存活率；Ho33342/PI荧光双染法鉴定细胞死亡方式；生化法检测细胞内超氧化物歧化酶（Super Oxide Dismutase，SOD）活性和谷胱甘肽（L-Glutathione，GSH）含量；流式细胞仪测细胞内游离Ca²⁺变化，综合评价GP含药血清对谷氨酸氧化性神经损伤的保护作用。结果谷氨酸可导致神经细胞发生凋亡和坏死；GP含药血清能明显拮抗谷氨酸的细胞损伤作用，提高细胞的存活率，维持细胞内较高GSH含量和SOD活性，抑制细胞内游离Ca²⁺浓度的升高。结论GP含药血清能明显拮抗Glu诱导的氧化性神经毒性，以400mg· kg^-1·d^-1GP灌胃含药血清作用最显著。

HBV适应性杂交细胞株的建立和初步研究

王爱华,马立宪,江渊,邵丽华,王刚,陈丰哲,王旭平

2008, 46(4): 374-378.

摘要 ( 1141 )

PDF (491KB) ( 362 )

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目的方法诱导HepG₂细胞产生HGPRT基因突变,将筛选出的HGPRT阴性的HepG2细胞与携带HBV的人原代肝细胞进行融合得杂交细胞,用HAT培养基筛选出异核体杂交细胞,再利用有限稀释法进行克隆,通过核型分析方法鉴定所得细胞。对所得杂交细胞及培养上清液进行HBV DNA和HBsAg、HBeAg的检测。实验同时,用未杂交的HepG2和人原代肝细胞作对照。结果经筛选后,有一杂交细胞株(HepCHLine3)克隆成功。HepCHLine3在形态学上与HGPRT^-HepG₂细胞相似,能体外传代培养,染色体核型分析示HepCHLine3杂交细胞染色体众数为99条,证明为融合细胞株,含所有来自HepG₂和人原代肝细胞的基因数。传代培养的HepCHLine3和其培养上清液用巢式PCR分别可检测到HBV DNA,培养上清液内检测到HBsAg和HBeAg。对照组的HepG₂和人原代肝细胞相应结果为阴性。提示该细胞携带并分泌HBV DNA。结论该杂交细胞兼具HepG₂细胞体外传代和人原代肝细胞对HBV易感的特性,是一新型杂交细胞系,为进一步建立新型HBV感染细胞模型奠定了基础。

牙周膜牵张成骨快速移动牙牙髓中IL-8表达的变化

张勇,叶静,郭新星,肖水清

2008, 46(4): 379-381.

摘要 ( 1040 )

PDF (267KB) ( 249 )

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目的探讨牙周膜牵张成骨后实验动物移动牙牙髓中白细胞介素8( interlukin8, IL-8)表达的变化。方法山东本地健康杂种犬15只，随机分为5组，每组3只。4个实验组，分别为加力2周组（A组）,加力后保持1周组（B组），加力后保持2周组（C组），加力后保持4周组（D组），一个对照组（E组）。拔除下颌双侧第二前磨牙，以单根的第一前磨牙作为移动牙，双根的第三前磨牙作为支抗牙，实验动物通过牙周膜牵张成骨快速移动牙齿，并分别在加力2周及加力后保持1、2、4周时结束实验，局麻下拔除移动牙，取出牙髓组织标本，采用ELISA夹心法测定移动牙牙髓中IL-8的含量及其在矫治过程中的变化。结果A组实验犬移动牙牙髓中IL-8含量与E组相比显著增高，差异具有统计学意义（P<0.05）。B组IL-8含量略有下降。C组IL-8含量显著降低,与A组比较差异具有统计学意义（P<0.05），但与E组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论牙周膜牵张成骨后IL-8含量升高，加力停止2周后即恢复到正常水平，提示牙周膜可以快速牵张成骨,加快牙齿移动速度。

解毒化瘀方对脓毒症大鼠蛋白C-mRNA表达及血浆蛋白C活性的影响

吴玉生,张道杰,李建军,付崇健

2008, 46(4): 382-384.

摘要 ( 1176 )

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目的观察解毒化瘀方对脓毒症大鼠凝血调节蛋白C mRNA (PC mRNA)表达及血浆蛋白C(PC)活性的影响，并探讨中药解毒化瘀方治疗脓毒症的作用机制。方法将大鼠分为正常组、对照组（假手术处理）、模型组（脓毒症）、中药组（造脓毒症模型前后用解毒化瘀方治疗），动态观察术后12、24、48h及正常组肝脏组织PC mRNA表达及血浆PC活性、内毒素（LPS）水平。采用盲肠结扎穿刺法复制脓毒症模型、实时荧光定量PCR法检测PC mRNA表达、血凝仪法检测血浆PC活性，动态浊度鲎试验法检测LPS水平。且动态观察解毒化瘀方对脓毒症大鼠生存率的影响。结果在脓毒症形成过程中，模型组PC-mRNA表达水平和血浆PC活性均显著低于正常组及对照组（P＜0.01），而血浆LPS水平则显著高于正常组与对照组（P＜0.01）；经解毒化瘀方治疗的脓毒症大鼠，其PC mRNA表达及血浆PC活性均显著高于模型组（P＜0.01），血浆LPS水平则显著低于模型组（P＜0.01）；经解毒化瘀方治疗的脓毒症大鼠，其生存率亦高于未治疗的脓毒症大鼠（P＜0.05）。结论解毒化瘀方能增强脓毒症大鼠PC mRNA表达，提高血浆PC活性，降低血浆LPS水平，提高了脓毒症大鼠的生存率。

急性白血病M4Eo型患者ETV6基因重排及其意义

高娜,李志红,丁卜同,陈昀,汪运山,郭农建

2008, 46(4): 385-388.

摘要 ( 1292 )

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目的探讨在急性髓细胞白血病（AML）M4Eo型患者中检测到ETV6基因重排的临床意义。方法对3例AML-M4Eo患者骨髓标本进行细胞培养，制备染色体，分析核型，Split-signal FISH技术分析12p13染色体易位，RT-PCR检测ETV6/ARG融合基因产物。结果核型分析显示3例患者均有inv(16)，Split-signal FISH检出12p13染色体易位1例，RT-PCR证实患者ETV6/ARG融合基因产物阳性。这是国际上第2例报道ETV6/ARG融合基因在AML-M4Eo中表达。结论伴有ETV6/ARG融合基因的患者对化疗不敏感，预后较ETV6/ARG融合基因阴性者差。Split-signal FISH是检测ETV6基因重排准确可靠的手段。

血脂康对心肌梗死患者多个动脉弹性指标的作用

杜孝芝,黎莉,王秀荣,蒋桂花,王媛媛,周风华,孟晓

2008, 46(4): 389-391.

摘要 ( 1255 )

PDF (259KB) ( 479 )

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目的探讨长期（3～6年）服用血脂康对陈旧性心肌梗死患者多个动脉弹性指标的影响。方法选取25例长期服用血脂康的陈旧性心肌梗死患者作为血脂康组，选取25例从未用过调脂药物的陈旧性心肌梗死患者作为未用血脂康组，20例健康人作对照组，利用高频超声检测肱动脉内膜-中层厚度(IMT)，平均血管壁紧张度（MCWT），平均血流速度（Vm），平均剪切率（MSR），内皮依赖性血管舒张功能（FMD），利用动脉硬化诊断仪检测脉搏波速度（PWV）。结果与未服用血脂康组相比,血脂康组治疗后肱动脉IMT、MCWT、PWV明显减低；Vm、MSR、FMD明显增加(P＜0.05)。结论陈旧性心肌梗死患者长期应用血脂康可以改善动脉内皮舒张功能，改善动脉弹性。

趋化因子受体CCR7在胃癌患者外周血淋巴细胞中的表达及其意义

刘君,胡三元,杨美香,高文娟,张岩,曲迅

2008, 46(4): 392-394.

摘要 ( 1043 )

PDF (211KB) ( 401 )

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目的研究趋化因子受体CCR7在胃癌患者外周血淋巴细胞各亚群的表达，并与健康人进行比较，探讨其与临床病理分期之间的相关性。方法分别收集健康人组、胃癌患者术前和术后外周血，进行荧光标记和红细胞裂解后，流式细胞仪检测CCR7在外周血淋巴细胞各亚群的表达，并分析其与临床病理分期之间的相关性。结果与健康人组相比，术前胃癌患者外周血T细胞各亚群中CCR7的表达明显下降，术后CCR7在外周血T细胞各亚群的表达明显升高。CCR7在胃癌患者外周血淋巴细胞中的表达与临床病理分期密切相关，Ⅰ、Ⅱ期患者外周血淋巴细胞中CCR7的表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者（P＜0.05）。结论趋化因子受体CCR7在胃癌患者外周血淋巴细胞中的表达明显降低，其表达水平与胃癌的临床病理分期相关。

乳腺癌患者外周血EMA、EGP-2和CK19的检测及其临床意义

孙善平,臧益秀,王晓,陈连胜,田斌,孙涛,金广超

2008, 46(4): 395-398.

摘要 ( 1499 )

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目的检测乳腺癌患者外周血上皮膜抗原（EMA）、表皮糖蛋白基因（EGP-2）和细胞角蛋白19（CK19）的表达，探讨EMA、EGP-2和CK19作为乳腺癌微转移指标的应用价值。方法应用流式细胞术检测65例乳腺癌患者和37例乳腺良性疾病患者外周血EMA 、EGP-2和 CK19的表达情况，分析其与TNM分期、年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移以及ER和PR表达状态等临床病理学指标的关系。结果乳腺癌患者外周血EMA、EGP-2和CK19的阳性表达率均高于对照组（P＜0.05）；其阳性细胞表达率与TNM分期、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移情况明显相关(P＜0.05)。3指标联合检测相对于2项或单项检测敏感度及准确性升高(P＜0.05)。结论联合检测EMA、EGP-2和CK19可提高诊断正确率，有可能在乳腺癌预后预测和治疗中发挥作用。

醛糖还原酶基因多态性与2型糖尿病及视网膜病变的相关性

张继惠,王红艺,李曙远

2008, 46(4): 399-402.

摘要 ( 1124 )

PDF (323KB) ( 275 )

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目的探讨2型糖尿病醛糖还原酶（AR）基因5′端(AC)n多态性与2型糖尿病（DM）并发背景型视网膜病变（BDR）的关系。方法随机选取DM患者74例，其中并发BDR39例，无视网膜病变35例，正常对照组40例。经多聚酶链反应（PCR）琼脂糖凝胶电泳，检测AR基因5′端（AC)n多态性标记。结果① 在2型糖尿病患者和正常对照组中共检测出7种等位基因，其中以Z、Z＋2、Z-2三种等位基因最常见。② Z-2等位基因在BDR组高于NDR组和CON组；Z+2等位基因在BDR组低于NDR组和CON组。结论山东地区2型DM患者AR基因5′端 (AC)n存在7种等位基因，Z-2等位基因可能是BDR的易感基因，Z+2等位基因可能为其保护基因。

三维DSA与二维DSA在颅内动脉瘤诊疗中应用价值的比较

宁丹,李彩霞,李春海

2008, 46(4): 403-406.

摘要 ( 1088 )

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目的探讨三维数字减影血管造影（3D-DSA）在颅内动脉瘤诊疗中的价值及其与二维数字减影血管造影（2D-DSA）相比的优势。方法对53例因蛛网膜下腔出血(SAH)入院而CT疑诊为颅内动脉瘤的患者同时进行2D-DSA和3D-DSA检查，分别阅片并记录动脉瘤的检出情况、瘤颈显示情况、瘤体与载瘤动脉的关系及对比剂用量和X线照射剂量，对其结果进行比较分析。结果53例患者中2D-DSA诊断46例共49枚动脉瘤，占84.5％（49/58），诊断的阳性率为86.8％（46/53），灵敏度为92％，特异度为81.8％；3DDSA诊断50例共58枚动脉瘤，占100％(58/58)，诊断的阳性率为94.3％（50/53），灵敏度和特异度均为100%。2D-DSA检出的动脉瘤中，清楚显示瘤颈者23枚，清楚显示瘤体与载瘤动脉关系者22枚；3D-DSA组清楚显示瘤颈者58枚，清楚显示瘤体与载瘤动脉关系者56枚（P＜0.05）。53例患者行2DDSA检查平均所接受的辐射剂量及对比剂用量分别为(178.32±17.39) mGy和(74.57±11.95)mL,行3D-DSA检查则为(99.81±9.48)mGy和(54.15±7.05)mL（P＜0.05）。结论3D-DSA能更清晰地显示瘤颈及瘤体与载瘤动脉的关系，提供血管内治疗的最佳工作角度，并能明显减少造影剂的用量和X线辐射剂量，提高了放射防护的安全性。

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎过程中发生病毒突破患者的（HBV）P基因变异分析

刘峰,王磊,王丽娜,耿大影

2008, 46(4): 407-410.

摘要 ( 1117 )

PDF (316KB) ( 332 )

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目的观察阿德福韦酯（adefovir dipivoxil，ADV）单药治疗慢性乙型肝炎（慢乙肝）过程中发生病毒突破的患者乙型肝炎病毒（HBV）P基因区变异发生情况。方法选取51例阿德福韦酯单药治疗（10mg/d，疗程＞12月）发生病毒突破的慢乙肝患者作为研究对象，分别检测随访发现病毒突破时患者的血清ALT、HBV DNA水平，并采用PCR产物直接测序法分析HBV P区基因的变异发生情况。结果51例患者中有37例检测出阿德福韦酯耐药相关变异，且rt181位点变异多于rt236位点（分别为33例和8例，其中两位点联合变异4例，P＜0.001）。联合变异患者其血清HBV DNA水平高于单一变异患者［分别为（6.53±0.45）log10拷贝/mL、（5.37±1.08）log10拷贝/mL，P＝0.043］。结论在应用阿德福韦酯单药治疗的慢乙肝患者中可筛选出HBV P基因区的相关耐药变异，不同耐药位点患者的HBV DNA水平可有差异。

基质金属蛋白酶-14和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

程育宏,申家泉,唐侠

2008, 46(4): 411-414.

摘要 ( 926 )

PDF (379KB) ( 335 )

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目的探讨基质金属蛋白酶-14（matrix metalloproteinase-14,MMP-14）和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN）在视网膜母细胞瘤（retinoblastoma, Rb）中的表达及其与临床病程的关系。方法用免疫组织化学SP法分别检测39例Rb中MMP-14及EMMPRIN的表达；用LEICA IM 50型全自动医学图像分析系统测量其平均灰度值，比较不同临床和病理阶段Rb中表达MMP-14和EMMPRIN的差异及二者阳性表达之间的关系。结果39例Rb中MMP-14阳性表达34例，占87.18%；EMMPRIN阳性表达33例，占84.62%；青光眼期Rb中MMP-14和EMMPRIN的表达明显高于眼内期（P＜0.01及P＜0.05），眼外期二者表达明显高于青光眼期（P＜0.01及P＜0.05）；视神经浸润组Rb中MMP-14和EMMPRIN的表达明显高于无视神经浸润组（P＜0.01及P＜0.05）；Rb中MMP-14和EMMPRIN的阳性表达水平呈密切相关（P＜0.01）。结论MMP-14及EMMPRIN的表达水平可能与Rb的浸润转移有关，二者共同促进Rb的浸润转移。

MMP-25在早孕绒毛和蜕膜中的表达及意义的研究

王莉,董白桦,苏士利,张岩,靳琼,高文娟,邵倩倩,曲迅

2008, 46(4): 415-419.

摘要 ( 1087 )

PDF (539KB) ( 344 )

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目的研究基质金属蛋白酶-25 (matrix metalloproteinase-25，MMP-25)在正常早期妊娠和自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达特点，探讨其在胚胎植入中的作用及其与自然流产的关系。方法采用半定量RT-PCR和免疫组化法检测60例正常早期妊娠和40例自然流产患者绒毛及蜕膜组织中MMP-25mRNA及蛋白的表达。结果① MMP-25mRNA在正常早期妊娠的绒毛及蜕膜组织中均有表达，且绒毛组织中MMP-25mRNA表达水平随妊娠周数的增加逐渐上升，各孕周组间相比差异有统计学意义(P＜0.05)。自然流产组绒毛及蜕膜组织中MMP-25mRNA的表达明显低于正常妊娠组(P＜0.05)。② 正常妊娠组的绒毛组织中，MMP-25主要定位于细胞滋养细胞和合体滋养细胞，并且随妊娠周数增加表达逐渐增强，与RT-PCR结果吻合；自然流产组仅在合体滋养细胞中有表达，两组平均光密度分别为0.21±0.02和0.13±0.04，差异有统计学意义(P＜0.05)。蜕膜组织中MMP-25主要在腺上皮细胞表达，自然流产组的表达微弱，两组平均光密度分别为0.25±0.13和0.21±0.12，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论MMP-25表达变化与滋养细胞浸润能力相吻合，且蜕膜组织中呈阳性表达，推测其参与胚胎植入及胎盘形成过程中滋养细胞浸润活性调控及子宫内膜组织重构；自然流产患者MMP-25表达水平降低，造成滋养细胞浸润能力下降，可能与自然流产的发生有关。

肝细胞生长因子及其受体在口腔鳞癌和颈淋巴结中的表达

张彦升,刘少华,魏奉才,孙善珍

2008, 46(4): 420-423.

摘要 ( 909 )

PDF (533KB) ( 452 )

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目的通过检测肝细胞生长因子(HGF)及其受体c—Met在口腔鳞癌中的表达水平，探讨HGF／c-Met系统对口腔鳞癌侵袭转移的影响。方法对50例确诊的原发、复发口腔鳞癌病例标本，采用免疫组织化学(SABC)法检测口腔鳞癌组织和颈部淋巴结中HGF和cMet的表达情况。将收集的病例按病理类型及临床资料分组，并比较各组间HGF和c-Met的表达差异。结果口腔鳞癌组织及有转移灶的淋巴结中，癌细胞HGF及c-Met蛋白的阳性表达率为100％，颈部淋巴结中HGF的阳性率为60％，淋巴细胞内均无c-Met蛋白的表达。癌细胞c-Met蛋白的表达水平和颈淋巴结内淋巴细胞HGF表达阳性与口腔鳞癌的局部淋巴结转移高度相关(P=0．0000)，癌细胞中HGF的高水平表达与肿瘤的侵袭（P=0.0020）、复发相关（P=0.0139）。结论口腔鳞癌中HGF和c-Met蛋白表达升高、颈部淋巴结中淋巴细胞HGF表达阳性可能促进肿瘤的侵袭、复发、局部淋巴结转移，提示患者预后不良。

外周血NK，IL-12，CRP在子痫前期中的测定及意义

王立俊,张立功,左常婷

2008, 46(4): 424-426.

摘要 ( 1148 )

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目的测定子痫前期孕妇外周血NK、IL-12、CRP水平的变化并探讨其意义。方法选择子痫前期患者42例，正常晚孕组20例，正常未孕育龄妇女20例，测定外周血NK细胞、IL-12及CRP水平并行统计学分析。结果子痫前期组NK细胞平均值及IL-12，CRP水平明显高于正常晚孕组和正常未孕组；各组血中NK细胞值与IL-12水平呈正相关关系，NK与CRP之间相关性不明显。结论NK细胞参与了子痫前期的发病，IL-12通过激活NK细胞，诱发免疫介导性血管内皮炎症、损伤引起子痫前期疾病；CRP水平在子痫前期时显著增加，可能成为临床早期发现子痫前期发病的一个灵敏指标。

卡培他滨增敏联合后程加速超分割放射治疗食管癌的疗效观察

韩春燕,盛巍,韩俊庆

2008, 46(4): 427-429.

摘要 ( 1222 )

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目的探讨口服卡培他滨增敏联合后程加速超分割(简称后超)放射治疗食管癌的近期疗效、生存期及毒副反应。方法将82例食管癌患者随机分为后超+卡培他滨组（治疗组）和单纯后超组（对照组）。放疗前2/3疗程常规分割，即2Gy/次，5次/周，共40Gy，后1/3疗程1.5Gy/次，2次/d，间隔6h或以上，5d/周，总剂量65～70Gy。治疗组自放疗第1d开始口服卡培他滨1000mg/m²，2次/d，连续服用14d，休息7d，治疗周期为21d,共治疗2个周期。结果82例患者全部完成治疗计划，治疗组和对照组近期疗效分别为89.7%和76.9%，差异有统计学意义（P＜0.05）,1年生存率分别为80.5%和73.2%(P＞0.05)，放射性食管炎和骨髓抑制的发生率，两组差异无统计学意义。结论口服卡培他滨增敏联合后程加速超分割放疗可提高食管癌的近期疗效，未增加毒副反应，耐受性良好，远期疗效仍需进一步观察。

定制肿瘤人工髋关节假体断裂三维有限元分析及套接式翻修假体的初步应用

刘文广,李建民,刘凯红,杨志平,李昕

2008, 46(4): 430-432.

摘要 ( 1155 )

PDF (353KB) ( 280 )

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目的分析断裂的定制肿瘤人工髋关节股骨假体生物力学特性，对其设计进行优化。同时探讨自行设计的套接式翻修假体的应用价值。方法将患者股骨的CT扫描图像用Mimics软件进行处理后连同假体的尺寸导入UG2.0软件造模。后模拟手术将假体、股骨装配，导入到三维有限元软件ABAQUS6.5中进行力学加载分析。针对无松动定制肿瘤人工髋关节的髓外部分发生意外断裂进行翻修而设计了一种套接式翻修假体，并初步应用。结果定制肿瘤人工髋关节假体的股骨颈与髓外柄连接部、髓内柄与髓外柄连接部、髓内柄的内外侧1/3部出现了应力集中，而髓外柄应力均较低。对本例患者进行了19个月的随访，Enneking评分翻修术前为1分，术后为26分。最近一次随访为25分。结论定制肿瘤人工髋关节假体需要在应力集中部位，如假体的尺寸、外形、材料等方面得到加强。套接式翻修假体在其适用范围内有较高的应用价值，近期效果良好，但需进一步随访。

地钱愈伤组织的诱导及其细胞培养条件的建立

尹德明,温学森,娄红祥

2008, 46(4): 433-437.

摘要 ( 1238 )

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目的探计对地钱愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养的条件。方法用MSK2和MS培养基对地钱配子体进行愈伤组织诱导，运用模糊评判对MSK-2培养基生长激素组合进行综合性状评价。结果MSK-2和Ms（2mg/L 6BA）均能诱导出地钱愈伤组织，其中MSK2的诱导效果较好。光照（3000～8000 lux）能有效地促进地钱愈伤组织生长。激素配比组合是0.5mg/L 2,4D+2mg/L NAA+2mg/L 6-BA适合于地钱细胞生长以及次生代谢生产。结论地钱愈伤组织的诱导成功和悬浮细胞培养条件的建立，为探索药用苔藓植物次生代谢产物生产提供新的途径以及对苔藓植物细胞规模化培养提供新的理论指导。

峡部裂性腰椎滑脱的后路手术治疗

祁磊,李牧,李玉华,蔡中续,孙元亮

2008, 46(4): 438-440.

摘要 ( 880 )

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手术治疗；腰椎滑脱；内固定

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