当期目录

2014年 第52卷 第4期 刊出日期：2014-04-10

  

基础医学

嘌呤霉素敏感的氨肽酶对TauP301L诱导细胞凋亡的影响

王苗苗1，刁雪芹2，庄云龙3，许刚4，周楠1，贾阳磊1，李萌萌1，任桂杰1

2014, 52(4):  1-7.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.618

摘要 ( 1096 )   PDF (5897KB) ( 363 )   收藏

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目的  探讨嘌呤霉素敏感的氨肽酶(PSA)对TauP301L诱导的细胞凋亡的影响。方法  将TauP301L表达载体转入SH-SY5Y和PC12细胞24、48和72h后，采用MTT法检测两种细胞增殖率的变化，Hoechst33342染色检测细胞核形态学的变化，确定TauP301L的最佳作用时间；在PC12细胞中转染TauP301L和PSA载体，在SH-SY5Y细胞中转染TauP301L和PSA-siRNA载体，Western blotting法检测Caspase-3的表达，酶标仪检测Caspase-3的活性变化，流式细胞法检测细胞凋亡率。结果  TauP301L诱导细胞凋亡具有时间依赖性。TauP301L转染细胞48h后，PC12细胞、SH-SY5Y细胞存活率明显下降(P<0.01)，细胞核出现凋亡的形态学变化；流式检测细胞凋亡率增加(P<0.01)。在PC12细胞中，与TauP301L组相比，PSA和TauP301L共同作用组Caspase-3的活性形式表达量及酶活性明显下降(P<0.01)，细胞凋亡率显著下降(P<0.01)；而在SH-SY5Y细胞中，与TauP301L组相比，TauP301L和PSA-siRNA共同作用组的细胞凋亡率显著升高(P<0.05)，Caspase-3的活性形式表达量和活性均升高(P<0.01)。结论  TauP301L能够诱导细胞凋亡，而PSA能够下调TauP301L所诱导的这种凋亡，对神经细胞起到保护作用。

 

肿瘤相关巨噬细胞在肝癌上皮细胞间质转型中的作用

王皓1，李霞2，王超3，李国盛1，郭春1，朱法良1，张利宁1，石永玉1

2014, 52(4):  8-12.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.554

摘要 ( 1147 )   PDF (4317KB) ( 269 )   收藏

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目的  检测肿瘤相关巨噬细胞对肝癌细胞迁移能力的作用及机制。方法  将肝癌细胞与THP-1细胞来源的巨噬细胞共培养，利用Transwell细胞迁移实验与细胞划痕实验检测肝癌细胞迁移能力的变化情况，观察肝癌细胞形态变化，并用RT-PCR检测上皮细胞间充质转化相关分子E-cadherin与N-cadherin的变化。结果  与THP-1细胞来源的巨噬细胞共培养后，肝癌细胞的迁移能力明显增强，由上皮细胞形态向间质细胞形态转变，E-cadherin表达降低，而N-cadherin表达则升高。结论  在肝癌中，肿瘤相关巨噬细胞可能通过EMT增强肝癌细胞的迁移能力。

重组腺病毒介导的RbAp48基因表达对人宫颈癌细胞生长、增殖的影响

张雯1，冯婷婷1，郑琳1，王红1，卢翌2，齐眉1，于修平1，唐伟1，赵蔚明1

2014, 52(4):  13-17.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.762

摘要 ( 807 )   PDF (1739KB) ( 194 )   收藏

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目的  构建携带RbAp48基因序列的重组腺病毒，检测其对宫颈癌细胞系SiHa肿瘤细胞行为的影响。方法  构建穿梭质粒pDC316-RbAp48，与骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染HEK293细胞，获得复制缺陷型重组腺病毒Ad5-RbAp48，Ad5-RbAp48感染人宫颈癌细胞SiHa，采用免疫印迹法检测RbAp48表达，使用WST-8、细胞计数及软琼脂克隆形成实验，研究Ad5-RbAp48介导RbAp48高表达对SiHa细胞增殖与非锚定依赖性生长的影响。结果  成功构建并鉴定重组腺病毒Ad5-RbAp48，Ad5-RbAp48感染SiHa细胞导致RbAp48高效表达，并有效抑制SiHa细胞增殖能力与非锚定依赖性生长能力。结论  RbAp48重组腺病毒可介导RbAp48高效表达，具有抑制宫颈癌细胞肿瘤细胞行为的作用。

RNA干扰PDCD4基因表达对巨噬细胞脂质沉积的影响

董兆静，尚倩雯，郭春，张利宁，王群

2014, 52(4):  18-21.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.399

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目的  探讨程序性细胞死亡4（PDCD4）对巨噬细胞脂质沉积的影响及机制。方法  实验分为PDCD4 siRNA组和阴性对照siRNA组。用PDCD4 siRNA和阴性对照siRNA干扰小鼠腹腔巨噬细胞中PDCD4的表达，RT-PCR法和Western blotting法检测干扰效率；经ox-LDL刺激后，油红O染色检测巨噬细胞内油脂含量变化；Real-Time PCR法检测胆固醇流出相关基因肝X受体α（LXR-α）、三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）及三磷酸腺苷结合盒转运体G1（ABCG1）表达的变化。结果  PDCD4 siRNA可有效降低巨噬细胞中PDCD4的mRNA及蛋白表达水平。与阴性对照siRNA组相比， PDCD4 siRNA组巨噬细胞内油脂含量明显减少（P＜0.001），并且显著上调细胞内LXR-α（P＜0.05）、ABCA1（P＜0.01）及ABCG1（P＜0.001）的表达。结论  可通过促进胆固醇流出而减少巨噬细胞内的脂质沉积干扰PDCD4 基因表达。

瑞舒伐他汀改善大量饮酒对急性心肌梗死大鼠血管新生的影响

屈福超，王爱红，孙永乐，王勇，苑海涛，张玉英

2014, 52(4):  22-25.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.552

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目的  探讨大量饮酒对急性心肌梗死后血管新生的影响以及瑞舒伐他汀的干预作用。方法  取雄性SD大鼠24只，随机分成3组：空白对照组、大量饮酒组［50%食用乙醇，5g/（kg·d）］和瑞舒伐他汀预处理组［瑞舒伐他汀20mg/（kg·d）+大量饮酒组50%食用乙醇，5g/（kg·d）］。喂养4周后制做心肌梗死模型，于术后第3天处死，采用免疫组织化学SP法检测梗死边缘区心肌内微血管密度（MVD），应用ELISA法测定心肌组织中血管内皮生长因子（VEGF）及内皮抑素的表达。结果  与空白对照组相比，大量饮酒组MVD明显减少（P＜0.01），VEGF表达无明显差异，内皮抑素表达明显增加（P＜0.01）；与大量饮酒组相比，瑞舒伐他汀预处理组MVD明显升高（P＜0.01），VEGF和内皮抑素水平均无明显差异(P＞0.05)。结论  大量饮酒抑制心肌梗死大鼠缺血心肌的血管新生，可能与增加内皮抑素的表达有关；瑞舒伐他汀能够减轻大量饮酒对缺血心肌血管新生的抑制作用。

玻璃化冷冻对人体外成熟卵母细胞微丝分布及发育潜能的影响

慈倩倩，李梅，吴克良，马水英，王苗苗，刘辉，高芹，石玉华，陈子江

2014, 52(4):  26-29.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.619

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目的  通过对比分析人体外成熟卵母细胞玻璃化冷冻前后的微丝分布和发育潜能，探讨冷冻对卵母细胞发育潜能的影响及相关的细胞学机制。方法  收集人未成熟卵母细胞，体外培养为成熟卵母细胞。获得的成熟卵母细胞随机分为新鲜组和玻璃化冷冻组，分别行受精和免疫荧光染色分析。受精后观察2PN数、囊胚数及优质囊胚数等指标，染色后用激光共聚焦显微镜观察微丝分布形态。结果  玻璃化冷冻复苏后卵母细胞成活率为83.74%。新鲜组2PN数、囊胚数及优质囊胚数均高于玻璃化冷冻组(P<0.05)。新鲜组微丝正常率为71.67%，玻璃化冷冻组为67.50%，两组间差异无统计学意义(P=0.71)。结论  适当的玻璃化冷冻复苏方案未改变人体外成熟卵母细胞的微丝分布。但是，冷冻后卵母细胞的发育潜能降低，因此单纯观察微丝分布不能作为冷冻对卵母细胞发育潜能的评价指标。

自噬在ox-LDL诱导炎症反应中的保护作用

郝凤成1,2，苏中华1,3

2014, 52(4):  30-34.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.698

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目的  探讨自噬对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导炎症反应的影响。方法  将THP1细胞分为空白对照组、ox-LDL刺激组、3-甲基腺苷（3-MA）组和3-MA+ox-LDL组。采用Western blotting检测LC3蛋白的表达，免疫荧光检测细胞内自噬体的形成，MDC染色检测细胞内的酸性囊泡，ELISA法检测培养细胞上清液中的炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α)、白细胞介素-1（IL-1）和白细胞介素-6（IL-6）的分泌。结果  ox-LDL可以诱导单核细胞THP1产生自噬，抑制自噬后ox-LDL诱导的炎症反应增强(P<0.05)。结论  自噬对ox-LDL诱导的炎症反应起到一定的保护作用。

缺氧对人胃癌细胞HIF-1α及DEC1表达的影响

胡瑞1,郏雁飞2，郑燕2，马晓丽2，孔毅1，黎娉1,汪运山2

2014, 52(4):  35-38.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.519

摘要 ( 1011 )   PDF (1634KB) ( 92 )   收藏

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目的  研究缺氧对人胃癌细胞株BGC823缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及分化型胚胎软骨发育基因1（DEC1）表达的影响。方法  将细胞株BGC823分为实验组（缺氧24h组、缺氧48h组）、对照组（常氧24h组、常氧48h组）和阴性对照组（PBS作为一抗）。实验组置于5%CO2、0.5%O2缺氧培养箱培养，对照组于37℃、5%CO2的培养箱中培养。用RT-PCR及Western blotting的方法  检测两组细胞HIF-1α与DEC1各水平的表达。另外，用免疫细胞化学的方法  进一步检测HIF-1α与DEC1的表达并进行相关性分析。结果  缺氧处理后，HIF-1α和DEC1的mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组（P<0.05）。HIF- 1α及DEC1 mRNA表达水平随缺氧时间增加而上升，HIF-1α及DEC1蛋白表达水平随缺氧时间增加而下降。实验组HIF-1α及DEC1阳性率明显高于对照组（P<0.05）。结论  缺氧条件下，胃癌细胞株BGC823 中HIF-1α、DEC1各水平的表达增加，二者具有显著相关性。缺氧可能通过诱导HIF-1α的大量表达，转录激活DEC1的表达。DEC1作为HIF-1α的下游靶基因，在胃癌细胞适应缺氧环境中发挥重要作用。

利拉鲁肽对2型糖尿病大鼠NF-κB及VCAM-1表达的影响

綦才辉1，金勇君1，杨美子2，徐鑫淼1，张凌云1，曹鹏娟1

2014, 52(4):  39-42.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.589

摘要 ( 808 )   PDF (2406KB) ( 91 )   收藏

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目的  观察利拉鲁肽对2型糖尿病大鼠主动脉核因子-κB（NF-κB）及血管细胞间黏附因子（VCAM-1）表达的影响及可能机制。方法  高脂高糖饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射，建立2型糖尿病大鼠模型。40只8周龄雄性SD大鼠分为4组：正常对照组（NC组）、糖尿病对照组（DM组）、格列本脲对照组（DMG组）及利拉鲁肽干预治疗组（DML组）。DMG组及DML组分别给予格列本脲及利拉鲁肽干预治疗8周。12周末腹主动脉取血分离血清，测空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FIns）、甘油三酯（TG)、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）及高密度脂蛋白（HDL-C）；分离大鼠主动脉，石蜡切片HE染色观察大鼠主动脉形态学变化；免疫组化方法  （SP法）测大鼠主动脉NF-κB及VCAM-1的表达。结果  与DM组相比，DMG组及DML组大鼠FIns及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)明显降低（P均<0.01）；与DMG组相比，DML组大鼠FIns、HOMA-IR、TG及LDL-C明显降低（P均<0.05)，主动脉NF-κB和VCAM-1的表达降低（P<0.05）。结论  利拉鲁肽可下调糖尿病大鼠主动脉NF-κB和VCAM-1的表达，调节糖脂代谢。此过程可改善大血管并发症。

SIRT3 siRNA对ox-LDL刺激的人主动脉内皮细胞ICAM-1、E-selectin表达的影响

丁玲1,2， 巩会平1，杜贻萌1，王欣1，张岩3，王旭平2，鹿庆华1

2014, 52(4):  43-48.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.532

摘要 ( 1053 )   PDF (3169KB) ( 243 )   收藏

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目的  探讨SIRT3基因对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL)刺激的人主动脉内皮细胞（HAEC)炎性因子细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、E-选择素（E-selectin）表达的影响。方法  将生长状态良好的细胞随机分为空白对照组、转染试剂对照组、阴性对照组及SIRT3 siRNA（1、2、3、4）组。筛选出最佳序列后，细胞分为空白对照组、siRNA组、（20、30、40μg/mL）ox-LDL组、siRNA+（20、30、40μg/mL）ox-LDL组。转染24h、ox-LDL刺激6h。qRT-PCR检测SIRT3 mRNA水平，Western blotting检测SIRT3蛋白表达，流式细胞术检测E-selectin、ICAM-1抗体的平均荧光强度值(MFI)。结果  SIRT3 siRNA2序列在mRNA水平的干扰效率为88.62%，蛋白水平为80.37%，干扰效果明显。与空白对照组相比，ox-LDL各组的SIRT3 mRNA相对表达量差异有统计学意义（P均＜0.05）；随ox-LDL浓度增加，SIRT3 mRNA相对表达量逐渐降低（P均＜0.05）。与siRNA组相比，siRNA+ox-LDL各组ICAM-1、E-selectin的MFI差异有统计学意义（P均＜0.05）；随ox-LDL浓度增加，MFI逐渐升高（P均＜0.05）。与空白对照组相比，siRNA组ICAM-1、E-selectin 的MFI无统计学差异（P均＞0.05）。结论  SIRT3基因与ox-LDL刺激的人主动脉内皮细胞ICAM-1、E-selectin表达升高相关，可能参与并调控动脉内皮细胞损伤的炎症反应。

高剂量法诱导胃癌铂类耐药细胞株的建立及其生物学特性

延冰1，刘国勤2，姜永胜2，沈海玉2，孙少川2

2014, 52(4):  49-52.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.556

摘要 ( 1236 )   PDF (1159KB) ( 322 )   收藏

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目的  探讨利用高剂量(0.8μg/mL)顺铂(cDDP)诱导胃癌顺铂耐药细胞株的建立及其生物学特性。方法  采用大剂量冲击法诱导人胃癌耐顺铂细胞株BGC823/cDDP建立。观察BGC823/cDDP细胞形态，CCK-8法检测细胞的耐药指数，CCK-8绘制生长曲线，流式细胞仪检测细胞的生长周期，Transwell法检测细胞侵袭能力的变化，免疫发光法测定细胞培养液中肿瘤标志物CEA、CA-199含量。结果  采用大剂量cDDP冲击方法  诱导后，BGC823/cDDP细胞较BGC823细胞体积略增大，细胞核增大，形状不规则，并可见散在的多核巨细胞，其对顺铂的耐药指数为4.54，耐药细胞系的倍增时间较正常BGC823细胞延长，BGC823/cDDP细胞G1期细胞增多，而S、G2期细胞减少，耐药细胞株侵袭力增强(P＜0.05)，耐药细胞培养液中肿瘤标志物CEA、CA-199含量与正常胃癌细胞无明显差别。结论  通过大剂量cDDP冲击方法  建立了顺铂耐药胃癌细胞株BGC823/cDDP，耐药细胞与正常细胞的生物学特性不同。

深Ⅱ度烧伤皮肤构建复合皮移植模型的初步研究

朱绪国1,2,3，于冠英3，李耀南1,2,3，刘磊1，张基勋1，刘振中1，姜笃银1,2,3

2014, 52(4):  53-57.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.615

摘要 ( 909 )   PDF (17531KB) ( 61 )   收藏

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目的  探讨利用深Ⅱ度烧伤皮肤（DBS）作为真皮替代物构建复合皮移植模型进行修复创面的可行性。方法  20只雄性Wistar大鼠随机分为深Ⅱ度烧伤真皮基质（DBDM）移植组（实验组）和无细胞真皮基质（ADM）移植组（对照组），每组10只。采用酶消化法，实验组取2只大鼠烫伤24h后皮肤进行脱细胞等处理，制备DBDM；取新生24h内乳鼠背部完整皮肤，修薄后与网状DBDM一次性重叠移植到大鼠背部约2cm×2cm全层皮肤缺损创面，14d后观察复合皮生长情况。对照组采用Wistar大鼠正常皮肤制备的ADM替代DBDM，其他实验步骤同实验组。结果  新鲜制备的DBDM呈浅黄白色，质地较柔软，有一定的韧性和伸展性，较ADM弱。镜下胶原纤维增粗和透明样变，排列紊乱、疏松，无细胞、血管和毛囊等成分存在。大鼠复合皮移植术后14d，两组大鼠及移植物的成活率差异有统计学意义（P<0.05），双层复合皮与皮下组织紧密连接，深层DBDM或ADM呈粉红色，未见明显肿胀及炎性反应。与ADM相比，DBDM组移植物较早出现炎性细胞浸润和成纤维细胞、毛细血管长入；炎性细胞以中性粒细胞和巨噬细胞为主，新生胶原蛋白沉积较快，纤维排列规则、致密。结论  DBDM来源广泛、制备方法  简单，移植物生物相容性好，无皮肤烧伤毒素样反应，可充当自体刃厚皮片的真皮替代物。本研究可为今后临床改造和利用烧伤皮肤提供新的思路。

临床医学

2型糖尿病男性患者血清睾酮与血脂关系的探讨

张楠1，袁中尚2，张栩1，张祎坤1，于春晓1，高聆3，赵家军1，管庆波1，管理英4

2014, 52(4):  58-61.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.770

摘要 ( 1178 )   PDF (1147KB) ( 103 )   收藏

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目的  测定2型糖尿病(T2DM)男性患者血清睾酮和血脂水平，并校正传统混杂因素及甲状腺功能，以探讨睾酮与血脂之间的相关性。方法  检测125例T2DM男性患者总睾酮(TT)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平，并计算TT/LH(TSI)比值。通过简单相关、偏相关及多元线性回归分析探讨睾酮与血脂之间的相关性。根据TT四分位数将T2DM男性患者分为4组(A组：TT < 3.93ng/mL；B组：TT 3.93~5.09ng/mL；C组：TT 5.10~6.58ng/mL；D组：TT > 6.58ng/mL)，应用单因素方差分析比较组间血脂水平。结果  相关及多元线性回归分析显示，TT与TG呈显著负相关(P<0.05)，与HDL-C呈显著正相关(P<0.05)；TSI与TG呈显著负相关(P<0.05)。ANOVA结果  显示，与最低TT水平A组相比，B、C、D组的TG水平均显著降低(P<0.05)，C、D组HDL-C水平则显著升高(P<0.05)。结论  T2DM男性患者血清睾酮与TG呈负相关，与HDL-C呈正相关，提示雄性激素可能对T2DM男性患者的血脂代谢异常具有保护作用。

K562细胞TMS1基因去甲基化后NF-κB表达的变化

李洪丽，王焱，徐文伟，董琳，郭燕，朱传升，毕可红

2014, 52(4):  62-66.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.630

摘要 ( 946 )   PDF (1210KB) ( 441 )   收藏

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目的  探讨甲基化诱导静止基因(TMS1)在慢性髓性白血病细胞系K562细胞中的甲基化程度及其与NF-κB的关系。方法  选取6例正常人及非恶性血液病患者骨髓细胞作为骨髓细胞对照组，提取RNA，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TMS1 mRNA表达；体外培养K562细胞，设空白对照组、0.5μmol/L地西他滨(DCA)实验组、1μmol/L DCA实验组。采用甲基化特异性聚合酶链反应 (MS-PCR) 检测各组K562细胞TMS1基因甲基化程度； 采用RT-PCR和Western blotting法检测各组K562细胞TMS1基因与NF-κB在mRNA及蛋白水平的表达变化；采用CCK-8法检测细胞增殖抑制作用，光学显微镜下观察细胞形态变化。结果  骨髓细胞对照组均可检测到TMS1 mRNA的表达，而 K562细胞系中无 TMS1 mRNA 表达。MSP检测结果  显示，空白对照组TMS1基因呈完全甲基化；TMS1基因去甲基化后NF-κB的表达下调，与空白对照组相比，其他两组细胞TMS1mRNA及蛋白表达均增高，而NF-κB表达均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度的DCA对K562细胞均有一定的增殖抑制作用，且呈量效和时效关系。结论  TMS1基因在K562细胞中呈完全甲基化，其沉默表达可能会异常激活NF-κB途径，部分参与白血病的发生发展。

偏振光显微镜对诊断原发性气管支气管淀粉样变的价值并文献复习

应央央，马德东，肖伟

2014, 52(4):  67-69.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.431

摘要 ( 1248 )   PDF (1243KB) ( 137 )   收藏

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目的  探讨偏振光显微镜在诊断原发性气管支气管淀粉样变(PTBA)的价值，以减少误诊。方法  在偏振光显微镜下观察13例刚果红阳性患者的病理切片，并对1987年以来国内公开发表的104例临床资料完整、病理结果  确定的PTBA病例进行总结和分析。结果  偏振光显微镜下13例刚果红染色阳性患者病理切片只有8例显示黄绿色双折光体。单纯以刚果红阳性作为诊断标准的假阳性率为39.5%，照此比例国内报道的104例病例中有近40例存在误诊可能。结论  只有刚果红染色和偏振光显微镜观察均为阳性时，才能诊断PTBA。

首发未治精神分裂症患者IL-6、IL-10和IL-12水平及影响因素

赵燕1，王刚1，陈大方2，程宇航1，陈雪彦1

2014, 52(4):  70-73.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.272

摘要 ( 868 )   PDF (831KB) ( 91 )   收藏

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目的  研究首发未治精神分裂症患者白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）和白细胞介素-12（IL-12）水平及影响因素。方法  将137例研究对象分为患者组（n=67）和正常对照组（n=70）。采用夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测两组的血浆IL-6、IL-10和IL-12水平，用阳性和阴性症状评定量表（PANSS）评定精神症状严重性。结果   患者组血浆IL-6浓度高于正常对照组（P=0.028），IL-10浓度低于正常对照组（P=0.013），IL-12浓度与正常对照组比较无统计学差异（P=0.258）；PANSS阴性分与IL-10浓度呈正相关（β=1.9，P=0.011），吸烟量与IL-12浓度呈正相关（β=0.1，P=0.049）。结论  精神分裂症患者免疫功能紊乱，细胞因子网络受损。精神分裂症的不同亚型间及男女患者间可能存在不同形式的免疫异常。

黑素瘤缺乏因子2诱导的固有免疫在慢性乙型肝炎发病机制中的作用

潘家超1,2，张乐1,2， 徐琳琳3，单晓宇2，杜文军2，陈士俊2

2014, 52(4):  74-79.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.663

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目的  初步探讨黑素瘤缺乏因子2(AIM2)诱导的固有免疫在慢性乙型肝炎（CHB）发病机制中的作用。方法  47例慢性乙型肝炎患者为实验组，23例脂肪肝患者为对照组，采用免疫组织化学法分别测定两组患者肝组织中AIM2、Caspase-1、IL-1β及IL-18的表达，组间比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearman相关分析。结果  实验组患者肝组织中AIM2的表达阳性率(89.3%)明显高于对照组(43.5%)（χ2=15.655，P<0.01），实验组AIM2的表达强度与Caspase-1呈正相关(rs=0.738, P<0.01)，IL-1β和IL-18的表达强度与AIM2的表达强度呈正相关(rs=0.527, 0.642, P<0.01)。ALT和AST的水平与AIM2表达强度呈正相关(rs=0.325，0.362，P<0.01)。高病毒载量组（HBV-DNA≥1×105copies/mL）AIM2的表达强度高于低病毒载量组（HBV-DNA＜1×105copies/mL）（χ2=27.572，P<0.01）。结论  AIM2可以结合HBV-DNA，通过Caspase-1途径激活固有免疫，引起炎性因子IL-1β、IL-18的释放，导致慢性乙型肝炎炎症的发生。

偏头痛患者皮肤异常性痛觉现象的危险因素及普瑞巴林对其的干预效果

郁飞宇，张娜，陈春富

2014, 52(4):  80-84.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.584

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目的  分析偏头痛患者皮肤异常性痛觉（CA）现象及其危险因素，观察普瑞巴林对CA的治疗效果。 方法  选择符合偏头痛诊断标准的63例患者， 根据异常性痛觉症状自评量表（ASC量表）分为CA组（41例）和非CA组（22例）， 记录患者的CA类型、严重程度及头痛情况， 分析CA发生的危险因素。 CA组普瑞巴林（150～300mg/d）治疗12周，治疗后1个月和3个月记录头痛和CA的变化，分析普瑞巴林对CA的干预效果。 结果  65.1％偏头痛患者存在CA，其中温度相关性、静态及动态机械性CA分别占85.4％、29.4％和22.0％。女性、病程长及药物过度使用者易出现CA。与基线相比，普瑞巴林治疗1个月和3个月后，ASC量表评分和CA人数均明显下降（P＜0.05），头痛程度、MIDAS和HIT-6量表评分均显著下降（P＜0.05）。药物治疗总有效率85.4%。结论  65.1％的偏头痛患者存在CA，CA的发生与患者性别、病程及药物过度使用有密切关系。普瑞巴林治疗偏头痛患者中枢敏感化可能有效。

老年冠心病心衰患者运动康复治疗中心理干预的临床意义

姜红梅1，2，陈文强1

2014, 52(4):  85-88.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.586

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目的  探讨老年冠心病心衰患者运动康复治疗中的心理干预作用。方法  82例老年冠心病心衰患者随机分为对照组和心理干预组，均给予正规的心衰药物治疗及专业康复运动训练，干预组同时接受正规的心理治疗。采用HAMD、HAMA进行评定，监测血压、心率、血糖、血脂、左室射血分数(LVEF)及6min步行距离等，于治疗4周及6个月后分别予以评定。结果  入组时两组肯定抑郁者为53例(64.6%)，肯定焦虑者为36例(43.9%)；4周及6个月后干预组HAMD评分均低于对照组(P＜0.05)；4周后两组患者的心率、血脂、6min步行距离以及LVEF较治疗前均显著改善；6个月后干预组上述指标改善更为明显，与对照组比较有统计学差异。结论  心理治疗能有效改善老年冠心病心衰患者运动康复治疗中的负性情绪，改善心功能。

凋亡抑制因子Survivin在口腔鳞癌中的表达及其意义

吴金华1，杨细虎1，刘振中2，丁晓军1，许建辉1

2014, 52(4):  89-92.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.394

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目的  探讨Survivin蛋白在口腔鳞癌中的表达及其临床相关性。方法  采用免疫组织化学方法  检测46例口腔鳞癌标本中Survivin蛋白的表达情况。结果  46例临床标本中Survivin阳性表达28例(60.8%)。Survivin表达与口腔鳞癌转移、临床分期密切相关，并且与患者预后显著相关。结论  Survivin蛋白可能在口腔鳞癌的发生发展中起重要作用，有可能作为判断口腔鳞癌的因素。

风湿性心房颤动患者左心房组织中钙蛋白酶-2的表达

韩波1，2，王建春2，张涛2，朱小龙2，李丛2，王正军2，赵勇2，邹承伟2

2014, 52(4):  93-96.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.676

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目的  观察风湿性心房颤动(AF)患者左心房中钙蛋白酶-2(calpain-2)的表达，探讨其在AF发病机制中的作用。方法  选取外科换瓣手术的风湿性心脏病患者39例，分为窦性心律组(n=16例)和心房颤动组(n=23例)。应用RT-PCR技术和免疫组化LSAB法半定量检测calpain-2的表达。结果  心房颤动组calpain-2 mRNA的deltaCt值高于窦性心律组［(0.091±0.035) vs (0.066±0.022)，P=0.017］；两组左心房心肌细胞中均有棕黄色颗粒沉着，心外膜和心内膜细胞均未见棕黄色颗粒；心房颤动组中calpain-2表达含量明显高于窦性心律组(P<0.001)，两者平均光密度值分别为0.92±0.17和0.65±0.01；calpain-2的含量与左心房收缩末期直径呈正相关(r=0.929， P<0．001)。结论  calpain-2在人类左心房心肌细胞中表达；AF时calpain-2的表达明显增加。

PARP-1对卵巢癌血管生成的影响

李燕，尉蔚，吕树卿，田永杰

2014, 52(4):  97-101.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.721

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目的  观察上皮性卵巢癌中聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1（PARP-1）表达与血管内皮生长因子-A（VEGF-A）、微血管密度（MVD）的关系，探讨PARP-1对卵巢癌血管生成的影响。方法  采用免疫组织化学SP法检测60例上皮性卵巢癌原发灶中PARP-1、VEGF-A、MVD的表达以及30例正常卵巢对照组织中PARP-1的表达，根据组化结果  判定标准将卵巢癌组织分为PARP-1阳性组和PARP-1阴性组。RNA干扰沉默卵巢癌SKOV3细胞的PARP-1基因，将细胞分为转染阴性对照siRNA组（NC-siRNA组）、转染PARP-1 siRNA组（PARP1-siRNA组），观察对脐静脉内皮细胞（HUVEC）体外成管的影响，ELISA法检测转染后细胞VEGF-A的表达水平。 结果  卵巢癌组织中PARP-1阳性率为73.3%（44/60），正常卵巢对照组织中PARP-1阳性率为26.7%（8/30），差异有统计学意义（P＜0.05）。PARP-1表达与肿块大小、病理分级和淋巴结转移具有相关性；PARP-1表达与VEGF-A表达呈正相关（P＜0.05）；PARP-1阳性组MVD值显著高于PARP-1阴性组（P＜0.01）；体外成管数目NC-siRNA组（14.67±1.21）高于PARP1-siRNA组（8.83±1.47），差异有统计学意义（P＜0.01）；PARP1-siRNA组细胞VEGF-A的表达显著低于NC-siRNA组（P＜0.01）。结论  PARP-1通过调控VEGF-A的表达影响卵巢癌的血管生成。

乳腺MRI在预测导管内癌早期浸润中的价值

郝雯，赵斌，王翠艳，李慧华，邱秀玲

2014, 52(4):  102-106.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.671

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目的  比较单纯导管内癌(DCIS)和DCIS早期浸润的形态学及动态强化特点，探讨乳腺MRI在预测早期浸润中的价值。方法  对经手术病理证实、术前行乳腺MRI的82个单纯DCIS病灶(N1组)和51个DCIS早期浸润病灶(N2组)，结合美国放射学会乳腺影像报告与数据系统(ACR BI-RADS)，描述病变的形态学特征和时间信号强度曲线，采用单变量和多变量Logistic回归进行回顾性分析。结果  病灶大小和延迟期曲线具有预测早期浸润的潜力,≥1.9cm的病变出现早期浸润的可能性明显高于＜1.9cm的病变(OR=2.285，95%CI：1.119~4.663)；延迟期曲线呈平台型及流出型的病变出现早期浸润的可能性分别为流入型病变的2.657倍(95%CI：1.089~6.482)及4.773倍(95%CI：1.880~12.118)。非肿块样强化是DCIS及DCIS早期浸润最主要的强化方式。两组间各形态学特点的差异无统计学意义(P均＞0.05)。结论  乳腺MRI所显示的病灶大小及延迟期曲线具有预测DCIS早期浸润的潜力。

公共卫生与管理

妊娠期妇女宫颈人乳头瘤病毒感染率及型别分布

刘平1，许俐2，孙源1，王志萍1

2014, 52(4):  107-112.  doi:10.6040/j.issn.1671-7554.0.2013.633

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目的  探讨孕妇宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染率及分布特征。方法  检索中国期刊全文数据库、万方数据库、中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库及PubMed, Medline, Embase, Web of Science英文数据库。计算孕妇宫颈的HPV总感染率，并计算7种HPV（16、6、18、11、58、31、33）型别感染率。结果  共有28篇文献符合纳入标准，包含13640名孕妇，HPV阳性检出2294人，妊娠期妇女HPV总感染率为16.82%，其中我国孕妇宫颈HPV感染率为15.53%；孕早期、孕中期和孕晚期感染率分别为18.20%、14.38%和19.32%；孕妇年龄≤24岁时感染率较高（23.94%）。孕妇宫颈常见的HPV感染亚型及其感染率依次是16（3.86%）、6（2.45%）、18（1.80%）和11（1.76%）。结论  妊娠期妇女宫颈HPV感染率较高，尤其是24岁以下的孕妇。最常见的感染亚型是16型。