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崔亚洲1,贾 青2,王兆朋2,王朝霞2,田 美1,张月英2,张维东2,韩金祥1
1. 山东省医药生物技术研究中心, 卫生部生物技术药物重点实验室, 山东省现代医用药物与技术重点实验室, 济南 250062; 2. 山东省医学科学院基础医学研究所, 济南 250062
CUI Ya-zhou1, JIA Qing2, WANG Zhao-peng2, WANG Zhao-xia2, TIAN Mei1, ZHANG Yue-ying2, ZHANG Wei-dong2, HAN Jin-xiang1
1. Shandong Medicinal Biotechnology Center, Key Laboratory for Biotech-Drugs Ministry of Health, Key Laboratory for Modern Medicine and Technology of Shandong Province, Jinan 250062, China; 2. Institute of Basic Medicine, Shandong Academy of Medical Sciences, Jinan 250062, China
摘要:
目的〓〖HTK〗建立高肝转移率的胰腺癌转移裸鼠模型,为抗胰腺癌肝转移药物的筛选和机理研究提供基础。〖HTW〗方法〓〖HTK〗人胰腺癌MIA-PaCa2细胞株脾内接种形成肝转移病灶,经反复体外原代培养和体内接种后筛选出高转移亚型MIA-PaCa2-3,MIA-PaCa2-3细胞DAPI荧光标记后尾静脉注射建立裸鼠胰腺癌模型,小动物光学分子成像系统动态观察肝脏转移肿瘤的生长变化,荧光显微镜观察肝脏肿瘤细胞转移情况。采用Western-blot的方法比较MIA-PaCa2-3细胞及其源细胞MIA-PaCa2细胞转移部分相关基因的蛋白表达水平。〖HTW〗结果〓〖HTK〗MIA-PaCa2-3细胞尾静脉注射裸鼠6~8周后,裸鼠活体肝脏区域及肝脏冰冻切片均可见明显弥漫性的荧光影像,肝脏转移率为80%(8/10),明显高于其源细胞MIA-PaCa2(2/10);MIA-PaCa2-3细胞转移相关基因基质金属蛋白酶2(matrix metallo proteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metallo proteinase-9,MMP-9)、血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平明显高于MIA-PaCa2细胞。〖HTW〗结论〓〖HTK〗MIA-PaCa2-3细胞尾静脉注射可建立高肝转移率的裸鼠胰腺癌模型,借助荧光示踪可以简便、可靠地观察肝脏转移肿瘤的生长情况,适于胰腺癌肝转移机制研究和抗肝转移药物的筛选。
中图分类号:
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