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山东大学学报(医学版)

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靶向survivin反义寡核苷酸对MCF-7乳腺癌细胞系Survivin mRNA及紫杉醇药物敏感性的影响

韩芳, 黎莉   

  1. 山东大学齐鲁医院化疗科, 济南 250012
  • 收稿日期:2007-10-18 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-12-24 发布日期:2007-12-24

HAN Fang, LI Li   

  1. Cancer Center, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, China
  • Received:2007-10-18 Revised:1900-01-01 Online:2007-12-24 Published:2007-12-24

摘要: 目的探讨靶向survivin基因的反义寡核苷酸(ASODN)对MCF-7细胞的增殖、凋亡及药物敏感性等生物学行为的影响。 方法采用脂质体介导survivin-ASODN转染MCF-7乳腺癌细胞系,RT-PCR检测survivin mRNA的表达,MTT法检测细胞增殖能力及对药物的敏感性,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。 结果survivin-ASODN可有效下调survivin表达水平,抑制细胞的生长,并呈时间剂量依赖关系;流式细胞术示,24h反义转染组细胞周期被阻滞于G2/M期,细胞凋亡率增加到15.23%。 紫杉醇作用早期(6h),survivin mRNA 表达增高,利于肿瘤细胞逃避紫杉醇诱导的细胞凋亡,增加肿瘤耐药的机会;反义转染组中细胞早期survivin mRNA表达上调受到抑制,对药物的敏感性增加。 结论survivin基因ASODN转染细胞后,下调survivin的表达,细胞凋亡增加,提高了对药物的敏感性。

关键词: 凋亡, 药物敏感性 , 反义, 增殖, survivin 寡核苷酸类, 乳腺肿瘤

Abstract: Objective To investigate the effects of surviving antisense oligonucleotide. (ASODN) on the cell proliferation,apoptosis and chemosensitivity to paclitaxel in human breast cancer cells MCF-7. Methods SurvivinASODN was transfected into MCF-7cells mediated by Lip reagent. The expression of survivin mRNA was determined by RT-PCR, the cell proliferation and chemosensitivity to paclitaxel in MCF-7 were determined by MTT assay, and the apoptosis and cell cycle were determined by flow cytometry. Results Antisense compound efficiently downregulated the survivin mRNA expression in a timedependent manner. The growth inhibition rate of MCF-7 was decreased in a dose- and time-independent manner. The cell cycle was arrested at G2/M phase; apoptosis was obviously found. Paclitaxel could enhance the expression of survivin at early time, and this effect might play a critical role in the escape of apoptosis induced by paclitaxel, which may promote the resistance of paclitaxel. The antisense compound efficiently down-regulated this induction by paclitaxel, and enhanced the chemosensitibity to paclitaxel in MCF-7. Conclusion Survivin antisense oligonucleotide effectively suppresses the expression of survivin mRNA, increases the apoptosis and enhances the chemosensitivity to paclitaxel in MCF-7.

Key words: Breast neoplasms, Survivin oligoribonucleotides, antisense, Cell proliferation, Apoptosis, Chemosensitivity

中图分类号: 

  • R737.9
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