山东大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 47 ›› Issue (5): 1-4.
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王金金 史伟 祁建妮 栾芳 赵地 郭春 马春红
WANG Jin-Jin, SHI Wei, QI Jian-Ni, LUAN Fang, ZHAO De, GUO Chun, MA Chun-hong
摘要:
目的 构建人ZHX2功能片段的真核融合表达载体。方法 以含有全长ZHX2基因的pcDNA3.0-ZHX2-HA质粒为模板,PCR扩增人ZHX2基因功能片段(242-501AA)经EcoRI,KpnI双酶切后克隆入pcDNA3.0,构建真核表达载体pZHX2(242501)HA,通过酶切及测序鉴定其正确性。利用脂质体将pcDNA3.0和含有ZHX2功能片段的真核表达载体分别转染肝癌细胞系HepG2.2.15和非洲绿猴肾细胞COS-7,Western blot检测人ZHX2功能片段融合蛋白的表达。结果 电泳结果显示:PCR扩增的ZHX2基因242-501AA片段大小与预期相符,重组质粒经双酶切和DNA测序,证明其与GenBank报道序列一致。Western blot结果显示,ZHX2功能片段的融合蛋白在肝癌细胞系HepG2.2.15和非洲绿猴肾细胞COS-7中均可有效表达。结论 成功构建含有ZHX2功能片段的真核融合表达载体,为进一步探讨ZHX2基因的功能机制及其应用奠定了基础。
中图分类号:
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