山东大学学报(医学版) ›› 2016, Vol. 54 ›› Issue (8): 12-16.doi: 10.6040/j.issn.1671-7554.0.2015.1223
王晓琳1,周元丽2,孙伟3,李莉1
WANG Xiaolin1, ZHOU Yuanli2, SUN Wei3, LI Li1
摘要: 目的 探讨p38 MAPK对人主动脉平滑肌细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响。 方法 分别使用药理学抑制剂和siRNA干预细胞。药理学抑制剂试验细胞分为:(1) 正常对照组,平滑肌细胞完全培养基正常培养;(2) DMSO(p38 MAPK抑制剂溶剂)对照组,0.01% DMSO处理;(3) p38 MAPK抑制剂组,0.01% p38 MAPK抑制剂(20 mg/mL)处理。基因沉默试验细胞分为:(1) 静态对照组,平滑肌细胞完全培养基正常培养; (2) 阴性对照siRNA组,MACSfectin试剂转染阴性对照siRNA 48 h; (3) p38 MAPK siRNA组,MACSfectin试剂转染p38 MAPK siRNA 48 h。采用qRT-PCR法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA表达;采用Western blotting法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达以及p38 MAPK转染效率;荧光显微镜观察siRNA转染效率。 结果 与正常对照组相比,DMSO对照组细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05),p38 MAPK抑制剂组细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。与静态对照组相比,阴性对照siRNA组细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05),p38 MAPK siRNA组细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。 结论 p38 MAPK信号通路调控人主动脉平滑肌细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达。
中图分类号:
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