山东大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 47 ›› Issue (10): 28-31.
李志会,岳盈盈,李鹏,宋楠楠,沈琮,赵元昊,孟红
LI Zhihui, YUE Yingying, LI Peng, SONG Nannan, SHEN Cong, ZHAO Yuanhao, MENG Hong
摘要:
目的构建金黄色葡萄球菌蛋白A (SPA)基因片段的表达载体,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,探讨该重组蛋白与不同来源IgG结合的生物学特性。方法利用PCR法扩增SPA基因片段,将该段基因克隆到pET30a(+)表达载体,转化感受态BL21大肠杆菌细胞,IPTG诱导表达,利用SDSPAGE及Westenblot鉴定目的蛋白。His亲和层析纯化后分别与人、小鼠、兔、猪及山羊血清反应,分析其与不同来源IgG的亲和关系。结果构建的pET30a(+)SPA表达载体在大肠杆菌BL21中可表达SPA蛋白,且发现其与人及小鼠源IgG具有较高亲和性,与兔及猪源IgG亲和性较低。结论该重组蛋白SPA与人及小鼠源免疫球蛋白IgG具有较高亲和性,为下一步应用于SPAELISA打下基础。
中图分类号:
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