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山东大学学报(医学版) ›› 2011, Vol. 49 ›› Issue (7): 15-.

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硫氢化钠对高浓度葡萄糖环境下原代人脐静脉内皮细胞的影响

刘文1,高聆2,于春晓1,王佳3,范右飞1,张媛1,管庆波1,赵家军1   

  1. 1.山东大学附属省立医院内分泌科, 山东省临床医学研究院内分泌代谢研究所, 山东省内分泌代谢病临床医学中心;
    2.山东大学附属省立医院中心实验室; 3.山东大学附属省立医院妇产科, 济南 250021
  • 收稿日期:2010-12-29 出版日期:2011-07-10 发布日期:2011-07-10
  • 通讯作者: 管庆波(1962- ),男,主任医师,教授,博士生导师,主要从事糖尿病及其并发症的基础与临床研究。E-mail:guanqingbo@medmail.com.cn
  • 作者简介:刘文(1985- ),女,硕士研究生,主要从事糖尿病及其并发症的研究。 E-mail:liuwenfy@126.com
  • 基金资助:

    国家自然科学基金资助项目(30971408);山东省自然科学基金资助项目(Y2008C113)。

Effects of sodium hydrosulfide on primary human umbilical vein  endothelial cells cultured with high glucose

LIU Wen1, GAO Ling2, YU Chun-xiao1, WANG Jia3, FAN You-fei1, ZHANG Yuan1, GUAN Qing-bo1, ZAHO Jia-jun1   

  1. 1. Department of Endocrinology, Provincial Hospital affiliated to Shandong University, Institute of Endocrinology,
    Shandong Academy of Clinical Medicine, Shandong Endocrinology Center of Clinical Medicine;
    2. Department of Scientific Center, Provincial Hospital affiliated to Shandong University;
    3. Department of Obstetrics and gynecology, Provincial Hospital affiliated to Shandong University, Jinan 250021, China
  • Received:2010-12-29 Online:2011-07-10 Published:2011-07-10

摘要:

目的      观察硫氢化钠(NaHS,外源性的H2S供体)对高浓度葡萄糖环境下原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的作用。方法     以0.125%胰酶和0.01%EDTA灌注法获得HUVECs,分别用5.5mmol/L葡萄糖、25mmol/L葡萄糖、25mmol/L葡萄糖+50μmol/L NaHS及50μmol/L NaHS处理72h,采用MTT法检测各组细胞的存活率,Western blot法检测H2S生成酶胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-Iyase,CSE)的变化。结果      MTT检测表明,25mmol/L葡萄糖组的HUVECs存活率比5.5mmol/L葡萄糖组下降28.37%(P<0.05),而50μmol/L NaHS和25mmol/L葡萄糖共同处理组的细胞存活率比25mmol/L葡萄糖组上升30.3%(P<0.05),50μmol/L NaHS组与5.5mmol/L葡萄糖组无明显差异(P>0.05)。与5.5mmol/L葡萄糖组相比,以25mmol/L葡萄糖处理72h后能使CSE蛋白的表达下降(P<0.05),而25mmol/L葡萄糖+50μmol/L NaHS 则能改善这种损害作用(P<0.05),CSE蛋白的表达比25mmol/L葡萄糖组增强。结论      高浓度葡萄糖降低人原代脐静脉内皮细胞的生长和存活率,减少CSE蛋白的表达,而NaHS能够减轻高浓度葡萄糖对CSE的作用。

关键词: 硫氢化钠;高浓度葡萄糖;胱硫醚-γ-裂解酶;原代人脐静脉内皮细胞

Abstract:

Objective     To observe the effect of sodium hydrosulfide on primary human umbilical vein endothelial cells (HUVECs)  cultured with high glucose. Methods     The 0.125% trypsin and 0.01% EDTA perfusion method was used to isolate HUVECs. Then, the cells were treated for another 72h with 5.5mmol/L glucose, 25mmol/L glucose, 25mmol/L glucose plus 50μmol/L NaHS or 50μmol/L NaHS. The MTT method was used for cells viability. The protein level of cystathionine gamma-lyase (CSE), a key synthase to produce H2S, was measured by Western blot. Results     MTT showed that compared to 5.5mmol/L glucose, cell viability of 25mmol/L glucose group decreased 28.37%(P<0.05). The 25mmol/L glucose plus 50μmol/L NaHS group rose 30.3% (P<0.05) compared to the 25mmol/L glucose group. There was no significant difference between the 50μmol/L NaHS  and the 5.5mmol/Lglucose group(P>0.05). Western blot showed that 25mmol/L glucose could reduce protein expression of CSE(P<0.05), compared to 5.5mmol/L glucose, and NaHS could ameliorate this phenomenon(P<0.05). Conclusion      High glucose can lower cells viability and decrease expression of CSE in HUVECs and NaHS can ameliorate such effects.

Key words: Sodium hydrosulfide; High glucose; Cystathionine gamma-lyase; Primary human umbilical vein endothelial cells

中图分类号: 

  • R587.1
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