脂多糖诱导人角膜基质细胞核因子κB的活化表达及意义

山东大学学报(医学版)

脂多糖诱导人角膜基质细胞核因子κB的
活化表达及意义

陈国玲^1，2，陈双³，刘艳丽¹，巍璐婉¹，刘执玉¹

（1. 山东大学医学院解剖学教研室，济南 250012； 2. 山东大学眼科中心第二医院眼科，济南 250033；
3. 枣庄市山亭区人民医院，山东枣庄 277200）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-03-16 发布日期:2009-03-16
通讯作者: 刘执玉

Activation and significance of NFκB induced by lipopolysaccharide in cultured human corneal fibroblasts

CHEN Guoling^1，2，　　CHEN Shuang³，　LIU Yanli¹，　WEI Luwan¹, LIU Zhiyu¹

(1. Department of Anatomy, School of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, China;
2. Ophthalmic Center of Shandong University, Department of Ophthalmology, Second Hospital of Shandong University,
Jinan 250033, China; 3. People′s Hospital of Shanting District， Zaozhuang 277200, Shandong, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-03-16 Published:2009-03-16
Contact: LIU Zhiyu

摘要/Abstract

摘要： 目的研究脂多糖(LPS)诱导人角膜基质细胞核因子κBp65 (NFκBp65)和NFκB抑制因子α(IκBα)的表达及意义。方法原代培养人眼角膜基质细胞，用免疫细胞化学SABC方法进行细胞鉴定。采用绿脓杆菌LPS刺激角膜基质细胞，分别于刺激前（0?h），刺激后1、2、4、8?h收集细胞。Western blot检测胞浆内IκBα蛋白及胞核内NFκBp65蛋白的表达。结果与0?h相比，LPS刺激细胞1?h时，即可检测到胞核内NFκBp65蛋白表达增加，其电泳条带的光密度值随着刺激时间的延长而逐渐变亮，4?h表达最高。LPS刺激细胞后各时点的NFκBp65蛋白表达与0?h组比较，差异有统计学意义（P均＜0.01）。LPS刺激角膜基质细胞后，在各时间点均可引起胞浆IκBα表达下降，4?h?时表达最低（P均＜0.01）。结论LPS可引起人眼角膜基质细胞IκBα的降解，促进NFκB的核转位，在角膜炎的过程中可能起一定的抗炎作用。

关键词: 脂多糖, 角膜基质, NFκB, NFκB抑制因子α

Abstract: To investigate expressions and significance of nuclear factorkappaB(NFκB) and inhibitor of NFκB (IκB)αinduced by lipopolysaccharide(LPS) in cultured human corneal fibroblasts. MethodsHuman corneal fibroblasts were primarily cultured and identified by the SABC method. Immunocytochemical staining with an antibody against Vimentin was performed to identify these cells. Cells were collected before being challenged with LPS and 1,2,4 and 8h after LPS treated, then protein expressions of NFκBp65 and IκBα were assessed by Western Blot analysis. ResultsCompared with the 0?h group, NFκBp65 level was significantly enhanced in the nucleus of human corneal fibroblasts after LPS challenge of 1 to 8?h(P＜0.01), the peak expression of NFκBp65 was observed at 4?h. However， the protein of the IκBα level was significantly decreased after LPS treatment at each point(P＜0.01). ConclusionThese results suggest that LPS takes part in the degeneration of IκBα and mediates nuclear translocation of NFκB in cultured human corneal fibroblasts in vitro.

Key words: Lipopolysaccharide, Corneal stroma, Nuclear factorkappaB, Inhibitor of NFκB α

中图分类号:

R772.2

陈国玲1，2 ，陈双3 ，刘艳丽1 ，巍璐婉1 ，刘执玉1
. 脂多糖诱导人角膜基质细胞核因子κB的
活化表达及意义[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(03): 8-11.

CHEN Guoling^1，2，　　CHEN Shuang³，　LIU Yanli¹，　WEI Luwan¹, LIU Zhiyu¹
.

Activation and significance of NFκB induced by lipopolysaccharide in cultured human corneal fibroblasts

[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (HEALTH SCIENCES), 2009, 47(03): 8-11.

参考文献

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