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山东大学学报(医学版)

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蠕形螨全蛋白提取及相对分子量鉴定

朱晓丽1,郭淑玲1,苏磊1,冯玉新2,袁方曙1   

  1. 山东大学医学院 1.病原生物学研究所; 2.细胞生物学研究所, 山东 济南 250012
  • 收稿日期:2013-11-25 出版日期:2014-05-10 发布日期:2014-05-10
  • 通讯作者: 袁方曙 E-mail:yuanfangshu@126.com
  • 基金资助:
    山东省自然科学基金(Y2008C111)

Extraction of total proteins from demodex and qualification of their molecular weights

ZHU Xiaoli1, GUO Shuling1, SU Lei1, FENG Yuxin2, YUAN Fangshu1   

  1. 1. Institute of Pathogenic Biology; 2. Institute of Cell Biology, School of Medicine,
    Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China
  • Received:2013-11-25 Online:2014-05-10 Published:2014-05-10

摘要: 目的  探讨蠕形螨全蛋白提取方法  ,初步分析蠕形螨蛋白组分。方法  采用自制裂解液和RIPA裂解液分别提取蠕形螨全蛋白,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离比较蛋白提取效果,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定部分蛋白质条带,Mascot检索软件查询NCBInr数据库,对蠕形螨蛋白组分进行初步分析。结果  自制裂解液提取蠕形螨蛋白的效果优于RIPA裂解液。经数据库检索比对出21种可信蛋白,其中170kD条带比对出的蛋白为肌动蛋白和胞质肌动蛋白,130kD条带比对出的蛋白为谷氨酰胺连接酶和腺苷酰转移酶;15kD以下条带比对出的蛋白大部分为组蛋白。结论  自制裂解液液氮研磨法可提取到较高质量的蠕形螨全蛋白,实验提取并分析了蠕形螨的蛋白质组成,为蠕形螨蛋白组学研究奠定基础。

关键词: 蛋白质组学, 蠕形螨, 分子量, 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳

Abstract: Objective  To establish the optimal extraction method of demodex protein and to analyze its components. Methods  Demodex proteins were extracted by self-made lysate and RIPA lysate, and the extraction effects were evaluated by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Partial protein stripes were identified with matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). The NCBInr database was searched by Mascot software to analyze the components of demodex protein. Results  The extraction effect of self-made lysate was better than that of RIPA protein lysate. A total of 21 proteins were primarily identified. Conclusion  The protein components of demodex were extracted in our experiment, which is helpful for the future study on demodex proteomics.

Key words: Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, Molecular weight, Demodex, Proteomics

中图分类号: 

  • R384.4
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