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山东大学学报（医学版）

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siRNA沉默Pokemon基因抑制人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的增殖

董珂1，蒲业迪2，刘琼1，代广霞1，李丽珍1，李颢1，王玲玲1，王鲁群1   

  1. 1. 山东大学齐鲁医院血液科，  山东 济南 250012； 2. 天津市第一中心医院血液科，天津 300020
  • 收稿日期:2013-12-10 出版日期:2014-05-10 发布日期:2014-05-10
  • 通讯作者: 王鲁群 E-mail：Wanglq@sdu.edu.cn
  • 基金资助:
    山东省科技攻关计划（2008GG10002049）；山东省优秀中青年科研奖励基金（BS2009YY049）

Inhibition of proliferation of human non-Hodgkins lymphoma Raji cells by small interference RNA silencing Pokemon gene

DONG Ke1, PU Yedi2, LIU Qiong1, DAI Guangxia1, LI Lizhen1, LI Hao1, WANG Lingling1, WANG Luqun1   

  1. 1. Department of Hematology, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China;
    2. Department of Hematology, Tianjin First Genter Hospital, Tianjin 300020, China
  • Received:2013-12-10 Online:2014-05-10 Published:2014-05-10

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202

摘要： 目的  采用siRNA干扰技术沉默人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞中Pokemon基因，观察Raji细胞增殖活性的变化，并探讨其可能的分子机制。方法  构建靶向Pokemon基因的siRNA重组慢病毒载体并转染Raji细胞。采用实时定量PCR法和Western blotting法检测Raji细胞Pokemon基因的沉默效果，在Raji细胞中沉默Pokemon基因的表达后采用实时定量PCR法和Western  blotting法检测bcl-6和突变型p53表达水平的变化；采用流式细胞术检测Pokemon基因沉默后Raji细胞凋亡的情况。结果  利用Pokemon靶向siRNA重组慢病毒载体感染Raji细胞有效沉默Raji细胞Pokemon基因表达（P<0.05）。沉默Pokemon基因后，bcl-6和突变型p53基因和蛋白表达均显著降低（P<0.05），细胞凋亡率增高（P<0.05）。结论  siRNA沉默Pokemon基因有效降低了人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的bcl-6和突变型p53基因和蛋白表达，促进细胞凋亡，抑制其增殖。Pokemon基因有望成为非霍奇金淋巴瘤治疗的新靶点。

关键词: bcl-6, 细胞凋亡, 非霍奇金淋巴瘤, Pokemon, p53

Abstract: Objective  Small interference RNA (siRNA) was used to silence Pokemon gene in human non-Hodgkins lymphoma Raji cells, then to observe the change of proliferation of Raji cells and explore its possible molecular mechanisms. Methods  Pokemon-targeted siRNA was constructed with lentivirus vector and transfected to Raji cells. RT-PCR and Western blotting were adopted to confirm the silence effect of Pokemon gene in Raji cells, which were then used to determine the mRNA and protein expressions of bcl-6 and mutant p53. Flow cytometry was used to detect the cell apoptosis of each group. Results  Pokemon-siRNA constructed with lentivirus vector could efficiently silence the expression of Pokemon gene in Raji cell (P<0.05). After that, the mRNA and protein expressions of bcl-6 and mutant p53 were significantly decreased (P<0.05) and the cell apoptosis rate was markedly elevated compared with the controls. Conclusion  The siRNA Pokemon gene silencing promotes human non-Hodgkins lymphoma Raji cells apoptosis by lowering the expressions of bcl-6 and mutant p53 gene and protein and inhibiting the proliferation. Pokemon gene is expected to become a new target for non-Hodgkins lymphoma treatment.

Key words: bcl-6, Cell apoptosis, NHL, p53, Pokemon

中图分类号: 

  • R574
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