靶向HPV16-E5的siRNA对TRAIL诱导宫颈癌Caski细胞凋亡的影响

山东大学学报(医学版) ›› 2013, Vol. 51 ›› Issue (10): 24-28.

靶向HPV16-E5的siRNA对TRAIL诱导宫颈癌Caski细胞凋亡的影响

梁婷婷，张萍，马德美，朱琳

山东大学第二医院妇产科，济南 250033

收稿日期:2013-03-13 出版日期:2013-10-10 发布日期:2013-10-10
通讯作者: 朱琳， E-mail：zl-emtf@163.com
基金资助:
山东省自然科学基金(Y2006C44)

Effect on apoptosis mediated by TRAIL against Caski cells of HPV16-E5-targeted siRNA

LIANG Ting-ting， ZHANG Ping， MA De-mei， ZHU Lin

Department of Obstetrics and Gynecology, the Second Hospital of Shandong University, Jinan 250033， China

Received:2013-03-13 Online:2013-10-10 Published:2013-10-10

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨靶向人乳头瘤病毒16早期蛋白5（HPV16-E5）的siRNA对TRAIL蛋白诱导子宫颈癌Caski细胞株凋亡的调节作用。方法 HPV16-E5 特异性 siRNA转染48h后，RT-PCR检测HPV16-E5 mRNA的表达；流式细胞术及caspase-8活性检测试剂盒分别检测空白对照组、siRNA-E5单独作用组、TRAIL单独作用组、siRNA-E5+TRAIL作用组、无关序列RNA+TRAIL作用组细胞的凋亡率及caspase-8的活性水平；RT-PCR及Western blotting检测siRNA干扰后Caski细胞表面TRAIL死亡受体DR4、DR5的表达。结果 RT-PCR检测结果显示，转染48h后，siRNA-E5组HPV16-E5 mRNA的表达较空白对照组和无关序列对照组下调(P<0.05)； siRNA-E5+TRAIL作用组较TRAIL单独作用组相比细胞凋亡率明显增加(P<0.05)，而无关序列RNA+TRAIL作用组较TRAIL单独作用组细胞凋亡率无明显变化(P>0.05)；siRNA-E5组TRAIL受体DR4、DR5的表达较无关序列对照组、空白对照组无明显差异(P>0.05)；caspase-8活性水平在siRNA-E5+TRAIL作用组明显较TRAIL单独作用组高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向HPV16-E5的siRNA可增强TRAIL诱导宫颈癌Caski细胞的凋亡作用，其机制与增强caspase-8的活化有关。

关键词: 子宫颈肿瘤；TRAIL蛋白；siRNA；细胞凋亡；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8

Abstract:

Objective To discuss the effect of Human Papilloma Virus 16 early protein 5 （HPV16-E5）-targeted siRNA on Caski cells apoptosis induced by TNF-related apoptosis-inducing ligand(TRAIL)．Methods HPV16-E5-targeted siRNA was transfected into Caski cells by lipofectamine. Forty-eight hours after the transfection， the expression of E5 mRNA was detected by RT- PCR； Cell apoptosis and caspase-8 activities in the blank control group, siRNA-E5-treated group, TRAIL-treated group, siRNA-E5+TRAIL-treated group and negative RNA+TRAIL-treated group were determined by flow cytometry and caspase-8 Activity Assay Kit. The expressions of receptors DR4 and DR5 on cell surface after RNA interference were tested by Real-Time PCR and Western blotting. Results RT-PCR revealed that the expression of HPV16-E5 mRNA in the siRNA-E5 group was significantly lower than that in the blank and the negative control groups(P<0.05)； The cell apoptosis rate in siRNA-E5+TRAIL group was significantly higher than that in the TRAIL group (P<0.05). There was no significant difference in cell apoptosis rate between the negative RNA+TRAIL group and the TRAIL group(P>0.05)； There was no difference in the expressions of receptors DR4 and DR5 after RNA interference (P>0.05)； The activity of caspase-8 in siRNA-E5+TRAIL group was higher than that in TRAIL group， and the difference was statistical significant(P<0.05). Conclusion HPV16-E5-Targeted siRNA could enhance the apoptosis mediated by TRAIL against Caski cancer cells in vitro， and the mechanism may be related to the increase of caspase-8 activity.

Key words: Cervix neoplasms； TRAIL protein； siRNA； Cell apoptosis； Caspase-8

中图分类号:

R737.33

梁婷婷，张萍，马德美，朱琳. 靶向HPV16-E5的siRNA对TRAIL诱导宫颈癌Caski细胞凋亡的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2013, 51(10): 24-28.

LIANG Ting-ting， ZHANG Ping， MA De-mei， ZHU Lin. Effect on apoptosis mediated by TRAIL against Caski cells of HPV16-E5-targeted siRNA[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (HEALTH SCIENCES), 2013, 51(10): 24-28.

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[1]	冯文1,房瑜1,杨成喜2. ERCC1及C-erbB2在子宫内膜癌组织中的表达及其对中西医结合疗效的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2013, 51(10): 81-84.
[2]	刘洋1，李卫华1，吕清涛2，杨宁1，姜洁1. DACH1、FASN和SREBP1在子宫内膜癌中的表达[J]. 山东大学学报(医学版), 2013, 51(4): 71-76.
[3]	孙高英1，王小元2，张晓金1，郝秀玉1，郭元芳1，王晓1，毕文祥1. N-乙酰半胱氨酸对子宫颈癌细胞紫杉醇耐药性的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2013, 51(3): 42-47.
[4]	张炳珍，代炳芹，张兴亮，王志萍. 母亲甲硫氨酸合成酶A2756G及其还原酶A66G基因多态性与子代神经管缺陷易感性关系的Meta分析[J]. 山东大学学报(医学版), 2012, 50(7): 125-132.
[5]	张兴亮1,许俐2,王志萍1. [J]. 山东大学学报(医学版), 2012, 50(1): 155-160.
[6]	南芳芳1，魏双燕1，姜洁2，成磊3. cyclin D1蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(11): 151-155.
[7]	马本红1，张贵宇1，梁静1，祖增艳2，李越1 . 高迁移率族蛋白B1在子宫内膜腺癌中的表达及意义[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(6): 144-148.
[8]	栾力1，管尚慧1，杨圣思1，程欢欢2, 4，王娜娜1，董召刚3,4，程玉峰1. WCX纳米磁珠在子宫内膜癌血清蛋白质组中的应用[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(5): 85-89.
[9]	胡尔西旦·尼牙孜，赵化荣，忙尼沙·阿不都拉，包永星. 局部晚期子宫颈鳞状细胞癌不同组合放化疗疗效的前瞻性比较研究[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(5): 128-131.
[10]	尹海琴1，魏玉平2，王小元3，彭楠1，毕文祥2，孔峰2，张培海1. 子宫颈鳞癌及腺癌细胞抗氧化能力的比较[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(3): 55-.
[11]	尹海琴1，魏玉平2，王小元3，彭楠1，毕文祥2，孔峰2，张培海1. 子宫颈鳞癌及腺癌细胞抗氧化能力的比较[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(3): 55-.
[12]	祖增艳1，张贵宇1，马本红1，王红霞2. 罗格列酮联合顺铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用[J]. 山东大学学报(医学版), 2010, 48(5): 62-66.
[13]	郑妮1，王传新1，邓小梅2，张建1，阚士峰1，张欣1，李伟1，杜鲁涛1. HLA-G在宫颈癌组织中的表达及临床意义[J]. 山东大学学报(医学版), 2010, 48(2): 128-130.
[14]	丁宁毕文祥孔峰张培海. Ⅰ型与Ⅱ型子宫内膜癌细胞抗氧化能力的比较[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(5): 63-66.
[15]	张晓,王传新,李伟,郑桂喜,张建,阚士锋,王立水. 特异性siRNA抑制HPV16 E7基因表达的实验研究[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(11): 64-67.

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