山东大学学报(医学版) ›› 2011, Vol. 49 ›› Issue (7): 39-43.
陈洁1,宋永红2,王淑荣2,韩振龙3,姜学兵1,李国盛1,郭春1,张利宁1,石永玉1
CHEN Jie1, SONG Yong-hong2, WANG Shu-rong2, HAN Zhen-long3, JIANG Xue-bing1, LI Guo-sheng1, GUO Chun1, ZHANG Li-ning1, SHI Yong-yu1
摘要:
目的 克隆人TIPE2基因启动子区及一系列5′截短片段,并鉴定其DNA表达调控区域。方法 采用PCR技术从人基因组DNA中克隆扩增TIPE2基因5′上游1252bp启动子序列并对该片段5′端的截短,分别瞬时转染人卵巢癌来源细胞系SKOV3,通过双萤光素酶活性的检测鉴定其启动子活性及表达调控区域。结果 克隆扩增的8个TIPE2基因启动子截短片段经测序证明无误;TIPE2-pGL4-F1重组质粒双萤光素酶活性检测显示其具有明显的启动子活性,约为pGL4Basic的7.9倍;5′系列截短片段重组质粒的启动子活性检测显示,与1252bp片段相比,TIPE2上游-965~-593bp、-501~-390bp缺失,启动子活性分别升高6.38、 7.82倍;-593~-501bp的缺失,使-501~+79bp片段相对于-593~+79bp片段的启动子活性降低2.04倍。结论 人TIPE2基因上游1252bp区域有明显的启动子活性,该片段内存在2个潜在的负性调控区和1个潜在的正性调控区。
中图分类号:
No related articles found! |
|