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山东大学学报(医学版) ›› 2010, Vol. 48 ›› Issue (9): 44-48.

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低氧对体外培养的神经干细胞中Wnt/β-catenin 信号通路相关分子表达的影响

崔晓萍1,林航1,陈建梅2,穆军山1,叶建新1,殷红兵1,应大君3   

  1. 1.南京军区福州总医院神经内科, 福建医科大学附属教学医院, 福州 350025;
     2.南京军区福州总医院骨一科, 福州 350025; 3.第三军医大学解剖学教研室,  重庆 400038
  • 收稿日期:2010-01-20 出版日期:2010-09-16 发布日期:2010-09-16
  • 通讯作者: 林航(1954- ),男,主任医师,主要从事神经损伤的研究。 E-mail:fzzylinhang@126.com
  • 作者简介:崔晓萍(1977- ),女,博士,主治医师,主要从事神经损伤的研究。 E-mail: xpcuitmmu@yahoo.com.cn
  • 基金资助:

    南京军区医学科技创新资助项目(08MA101);福建省青年人才基金资助项目(2008F3085)

Influence of hypoxia on expressions of relative factors of the Wnt/β-catenin signal pathway in neural stem cells in vitro

CUI Xiao-ping1, LIN Hang1, CHEN Jian-mei2, MU Jun-shan1, YE Jian-xin1, YIN Hong-bing1, YING Da-jun3   

  1. 1. Department of Neurology, Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Area, Clinical Medical College of
    Fujian Medical University, Fuzhou 350025, China;
    2. Department of First Orthopaedics, Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Area, Fuzhou 350025, China;
    3. Department of Anatomy, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China
  • Received:2010-01-20 Online:2010-09-16 Published:2010-09-16

摘要:

目的     观察常氧(20%O2)和低氧[(3%±2%)O2]条件下体外培养的神经干细胞(NSCs)中Wnt/β-catenin信号通路相关分子的表达,探讨低氧促进NSCs增殖的机制。方法    体外分离培养新生小鼠海马NSCs,分别置于常氧和低氧条件下进行培养,采用RT-PCR法检测NSCs中Wnt/β-catenin通路关键分子的表达情况,通过电穿孔转染荧光素酶报告基因质粒检测NSCs内Wnt/β-catenin信号通路对低氧的反应性,采用Western blot法检测低氧对β-catenin和CyclinD1表达的影响。结果    NSCs表达Wnt/βcatenin信号通路的主要分子,且该通路对低氧具有明显的反应;经低氧培养后NSCs表达β-catenin、CyclinD1较常氧组明显增加(P<0.05)。结论    Wnt/β-catenin通路可能通过增加β-catenin及CyclinD1的表达促进体外低氧条件下NSCs的增殖。

关键词: 细胞低氧;干细胞;信号传导

Abstract:

 Objective    To observe expressions of relative factors of the Wnt/β-catenin signal pathway in neural stem cells (NSCs) cultured in vitro in normoxia(20%O2) and hypoxia (3±2%O2) and explore the mechanism of proliferation of NSCs in hypoxia. Methods    NSCs obtained from the hippocampus of a neonatal mouse were cultured in normoxia and hypoxia, then expressions of major factors of the Wnt/β-catenin pathway were detected by RT-PCR. After the luciferase reporter gene plasmid was transfected into NSCs by electroporation, responsive ability of the Wnt/β-catenin pathway to hypoxia was detected, and expressions of β-catenin and CyclinD1 in NSCs were detected by Western blot.  Results    The major factors in the Wnt/β-catenin signal pathway were detected in NSCs and the Wnt/β-catenin signal pathway was obviously responsive to hypoxia. The β-catenin and CyclinD1 protein levels were increased after hypoxia treatment compared with those in normoxia(P<0.05). Conclusion    The Wnt/β-catenin signal pathway may promote the proliferation of NSCs in hypoxia by increasing expressions of β-catenin and CyclinD1 in vitro.

Key words: Cell hypoxia; Stem cells; Signal transduction

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