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山东大学学报(医学版) ›› 2010, Vol. 48 ›› Issue (5): 36-39.

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沉默驱动蛋白KIF4A的表达对卵巢癌细胞SKOV3迁移的影响

高杰1,王东秋2,田明忠2,朱长军2   

  1. 山东大学医学院 1. 免疫学研究所; 2. 细胞生物学研究所, 济南 250012
  • 收稿日期:2010-01-14 出版日期:2010-05-16 发布日期:2010-05-16
  • 通讯作者: 朱长军(1972- ),男,教授、博士生导师,主要从事细胞周期研究。 E-mail:zhucj@sdu.edu.cn
  • 作者简介:高杰(1984- ),女,硕士研究生,主要从事细胞分子免疫学研究。
  • 基金资助:

    国家自然科学基金青年科学基金资助课题(30700396);山东省科技攻关资助课题(2008GG10002019)

Inhibition of migration in ovarian cancer cell SKOV3    by gene-silence of kinesin KIF4A

GAO Jie1, WANG Dongqiu2, TIAN Mingzhong2, ZHU Changjun2   

  1. 1. Institute of Immunology; 2. Institute of Cell Biology, School of Medicine, Shandong University,     Jinan 250012, China
  • Received:2010-01-14 Online:2010-05-16 Published:2010-05-16

摘要:

目的  研究沉默KIF4A基因对人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力的影响。方法  检索针对KIF4A基因的小干扰RNA(siRNA),构建shRNA表达质粒,转染人卵巢癌细胞SKOV3,通过G418筛选建立稳定低表达KIF4A的SKOV3细胞株。采用蛋白质免疫印记(Western blot)法检测shRNA对KIF4A蛋白分子的敲除效率。并通过细胞迁移实验评价低表达KIF4A对SKOV3细胞迁移能力的影响。结果  成功筛选出稳定低表达KIF4A的细胞株,选择干扰效率较高的细胞株进行实验。Transwell细胞迁移实验显示,低表达KIF4A的细胞株的迁移率较阴性对照组增长近3倍(P<0.05)。结论   KIF4A低表达,可增强人卵巢癌细胞SKOV3的迁移能力。

关键词: 驱动蛋白;KIF4A蛋白;小片段发夹状干扰RNA;迁移

Abstract:

Objective  To study the effect  of silencing expression of kinesin KIF4A on migration of ovarian cancer cell SKOV3. Methods  Construct shRNA expression vector targeting KIF4A, and then transfect the plasmid into human ovarian cancer cell SKOV3. Generate the cell lines that stably expressed KIF4A shRNA and confirm KIF4A gene-silence in cells by Western Blotting assay. Employ the Transwell assay to evaluate the impact on migration in SKOV3 when silencing KIF4A. Results  KIF4A shRNA stably expressed cell lines were generated and Transwell assay showed that the migrated cells with expressing KIF4A shRNA we threefold faster than the Negative Control cells. Conclusion  Silencing KIF4A in human ovarian cancer cell SKOV3 increases its migration capability.

Key words: Kinesin; KIF4A protein; Short hairpin RNA; Migration

中图分类号: 

  • Q28
[1] 王东秋1,高杰1,田明忠1,朱长军2. 驱动蛋白分子驱动蛋白分子Kif18A各功能域细胞定位的研究驱动蛋白分子Kif18A各功能域细胞定位的研究[J]. 山东大学学报(医学版), 2010, 48(5): 40-43.
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