培养基对兔骨髓间充质干细胞体外扩增的影响

山东大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 47 ›› Issue (10): 50-53.

培养基对兔骨髓间充质干细胞体外扩增的影响

辛林伟,魏凌云,李强,唐际存

桂林医学院附属医院骨科，广西桂林 541001

收稿日期:2009-05-05 出版日期:2009-10-16 发布日期:2009-10-16
通讯作者: 李强(1970- )，男，硕士，副主任医师，副教授，主要从事骨与软骨组织工程的研究。Email:li.q12251970@163.com, Tel:15977330608
作者简介:辛林伟(1973- )，男，主治医师，主要从事创伤骨科及相关基础研究。

Proliferation in vitro of bone marrowderived mesenchymal stem 
cells in different culture meeia in rabbits

XIN Linwei, WEI Lingyun, LI Qiang, TANG Jicun 

Department of Orthopaedics, Affiliated Hospital of Guilin Medical University, Guilin 541001, China

Received:2009-05-05 Online:2009-10-16 Published:2009-10-16

摘要/Abstract

摘要：

目的考察含10％胎牛血清的高糖DMEM培养基(DMEMHG, 10％FBS)、10％胎牛血清的低糖DMEM培养基(DMEMLG，10％FBS)、15％胎牛血清的低糖DMEM培养基(DMEMLG, 15％FBS)、20％胎牛血清的低糖DMEM培养基(DMEMLG, 20％FBS)对兔骨髓间充质干细胞体外贴壁、扩增的影响。方法① 选2月龄的新西兰大白兔，股骨转子间区抽取骨髓利用密度梯度离心贴壁法分离纯化细胞，体外培养。选取传代第一代骨髓间充质干细胞 (passenger one, P1)分别用以上4种细胞培养基培养，测细胞扩增倍数；② 选取传代第二代骨髓间充质干细胞(passenger two, P2)分别将以上4种细胞培养基混悬液接种于24孔板中，观察细胞生长状态并测生长曲线；③ 选取4种培养基中培养效果最好的一组细胞，以密度0.5×104/mL接种于24孔板中，成骨诱导，茜素红染色测其矿化能力。结果DMEMLG(15％FBS) 组中细胞扩增倍数为(16.20±1.60)倍，细胞集落形成数为6.11±1.17,与其它组比较差异有统计学意义（P＜0.05），并矿化能力最强。结论DMEMLG (15%FBS)培养基较其他3种培养基更符合兔骨髓间充质干细胞体外扩增培养的条件，且更好的保持了细胞的正常形态和生物活性。

关键词: 骨髓间充质干细胞, 培养基, 细胞扩增

Abstract:

To investigate the effects of different culture media on the proliferation in vitro of bone marrowderived mesenchymal stem cells. MethodsBone marrow was abstracted from the intertrochanter of the femur of 2month New Zealand rabbits and purification of mesenchymal stem cells was determined by a density gradient centrifugation method. The cells were cultured in 4 kinds of culture media: DMEMhigh glucose(10％FBS), DMEMlow glucose(10％FBS), DMEMlow glucose(15％FBS) and DMEMlow glucose(20％FBS). Cells of passage one were detected the expansion multiple and cells of passage two measured the growth and mineralization of cells. ResultsThe expansion multiple was 16.20±1.60 and the colonyforming number(CFN) was 6.11±1.17 in the DMEMlow glucose(15％FBS) group, which were significantly higher than those in the other three groups. ConclusionDMEMlow glucose (15%FBS) is more suitable for cultivation of MSCs than the other three media.

Key words: Bone marrowderived mesenchymal stem cells; Culture medium; Proliferation

中图分类号:

R322

. 培养基对兔骨髓间充质干细胞体外扩增的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(10): 50-53.

参考文献

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