P19细胞分化过程中激活型bHLH基因的表达

山东大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 47 ›› Issue (10): 19-22.

P19细胞分化过程中激活型bHLH基因的表达

王冲^1,2，安丽莎^1,2，马旭²

1. 北京协和医学院研究生院，北京 100730； 2. 国家人口计生委科学技术研究所遗传研究室，北京 100081

收稿日期:2009-06-17 出版日期:2009-10-16 发布日期:2009-10-16
通讯作者: 马旭，博导，教授，主要从事遗传学研究。Tel: 01062176870， Email: genetic@263.net.cn
作者简介:王冲（1982- ），女，博士研究生，主要从事遗传学研究。
基金资助:
国家重点基础研究发展计划资助课题（973计划，2007CB511905）。

Expression of bHLH genes in differentiation of P19 cells

WANGChong^1,2, AN Lisha^1,2, MA Xu²

1. School of Graduate, Peking Union Medical College, Beijing 100730, China; 
2. Department of Genetics, National Research Institute for Family Planning, Beijing 100081,China

Received:2009-06-17 Online:2009-10-16 Published:2009-10-16

摘要/Abstract

摘要：

目的检测P19细胞分化过程中激活型碱性螺旋-环-螺旋（bHLH）转录调控因子mRNA的表达，探讨其神经分化机制。方法用维甲酸（RA）诱导P19细胞分化，通过反转录聚合酶链反应（RTPCR）检测P19分化前以及分化后2、4?d时果蝇Asc的哺乳动物类似物（Mash1)、果蝇atonal的哺乳动物类似物(Math1)、Neurological stem cell leukemia2(Nscl2) mRNA的表达。采用免疫印迹方法(Western blot)检测Mash1蛋白的表达。结果Mash1 mRNA和Nscl2 mRNA 随分化表达升高，在分化后2?d到达顶峰后下降，Math1 mRNA在分化后期表达明显。Mash1蛋白的表达与mRNA的表达一致。结论P19细胞分化过程中bHLH转录因子mRNA的表达具有明显的时相性，为解释神经细胞分化调控机制提供实验基础。

关键词: bHLH转录因子, P19细胞, 维甲酸, 分化

Abstract:

To investigate the differentiation mechanisms of P19 cells by determining expression of the basic helixloophelix (bHLH) genes. MethodsP19 cells were primarily cultured and were induced to differentiate by retinoic acid(RA). Reverse transcriptasepolymerase chain reaction( RTPCR) was used to detect expression of Mash1, Math1 and Nscl2 mRNA in P19 cells before differentiation and at 2 and 4?d after differentiation. Western blot analysis was used to detect expression of Mash1. ResultsExpressions of Mash1 and Nscl2 mRNA increased with time, and at the 2?d after differentiation they reached a peak and then decreased. Math1 was highly expressed after differentiation. Protein expression of Mash1 was the as same as the mRNA expression of it. ConclusionThe expression pattern of mRNA of the bHLH genes was detected, which may contribute to explaining the mechanisms of neural differentiation.

Key words: P19 cells; Retinoic acid; Differentiation; bHLH genes

. P19细胞分化过程中激活型bHLH基因的表达[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(10): 19-22.

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