RNA干扰靶向沉默FLIP基因对卵巢癌细胞A2780生物学特性的影响及生长抑制作用

山东大学学报(医学版)

RNA干扰靶向沉默FLIP基因对卵巢癌细胞A2780生物学特性的影响及生长抑制作用

王毓¹，刘培淑¹，毛洪鸾¹，周黎光¹，孙玉兰²，姜虹³，王荣³

1. 山东大学齐鲁医院妇产科，济南 250012；2. 新泰市人民医院产科，山东泰安 271200；3. 教育部和卫生部心血管重构与功能研究重点实验室，济南 250012

收稿日期:2007-11-03 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-02-16 发布日期:2008-02-16
通讯作者: 刘培淑

Effect of FLIP-siRNA-mediated gene silencing on bionomics and growth inhibition in the ovarian cancer cell line A2780

WANG Yu¹，LIU Pei-shu¹，MAO Hong-luan¹，ZHOU Li-guang¹，SUN Yu-lan²，JIANG Hong³，WANG Rong³

1. Department of Gynecology and Obstetrics, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, China;2. Department of Obstetrics, Xintai People′s Hospital, Tai′an 271200, Shandong， China

Received:2007-11-03 Revised:1900-01-01 Online:2008-02-16 Published:2008-02-16
Contact: LIU Pei-shu

摘要/Abstract

摘要： 目的探讨靶向FLIP基因的小干扰RNA（siRNA）对人卵巢癌细胞A2780生物学特性的影响及生长抑制作用。方法设计并体外化学合成FLIP序列特异性双链RNA，在脂质体（LipofectamineTM2000）介导下转染人卵巢癌细胞株A2780。采用半定量RT-PCR和Western blot法检测FLIPsiRNAs转染前后A2780细胞FLIP基因mRNA和蛋白表达的变化,并筛选出抑制作用最强的FLIP-siRNA。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法、Annexin-V-PI双染法流式细胞术（FCM）分别检测FLIP-siRNA转染对A2780细胞的生长抑制作用和对凋亡的影响。结果特异性FLIP-siRNAs片段能有效降低A2780细胞中FLIP的 mRNA和蛋白水平（P＜0.01）,最大抑制率分别为77.4％和66.1％；转染FLIP-siRNA后，A2780细胞的生长活力明显下降（P＜0.05），RNA干扰组的细胞凋亡也显著增加（P＜0.05）。结论靶向FLIP基因的siRNAs可在转录和翻译水平抑制FLIP基因表达；并可抑制卵巢癌A2780细胞生长，促进其凋亡。

Abstract: To investigate the effects of FLIP-siRNA-mediated gene silencing on bionomics and growth inhibition in the ovarian cancer cell line A2780. Methods Based on the sequence of FLIP mRNA, three siRNAs were designed and chemically synthesized. They were transfected into the ovarian cancer cell line A2780 with LipofectamineTM2000. The FLIP mRNA and protein levels were determined by reverse transcriptionpolymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot. The FLIP-siRNA having the most powerful inhibition was selected. Cell growth inhibition and apoptosis were determined by MTT assay and flow cytometry. Results Short siRNAs targeting FLIP down-regulated the mRNA and the protein level of the FLIP oncogene（P＜0.01），　and the inhibition rate reached to 77.4％ and 66.1％, respectively. The proliferation of the ovarian cancer cell line A2780 was inhibited（P＜0.05）and the ratio of apoptosis significantly increased after transfection（P＜0.05）. Conclusion FLIP-siRNAs can significantly downregulate FLIP expression in transcriptional and translational levels, inhibit cell growth and induce cell apoptosis in the ovarian cancer cell line A2780．

Key words: RNA interference, Doublestranded RNA, Genes, FLIP, Ovarian neoplasms

中图分类号:

R737.31

王毓,刘培淑,毛洪鸾,周黎光,孙玉兰,姜虹,王荣 . RNA干扰靶向沉默FLIP基因对卵巢癌细胞A2780生物学特性的影响及生长抑制作用[J]. 山东大学学报(医学版), 2008, 46(2): 154-158.

WANG Yu,LIU Pei-shu,MAO Hong-luan,ZHOU Li-guang,SUN Yu-lan,JIANG Hong,WANG Rong. Effect of FLIP-siRNA-mediated gene silencing on bionomics and growth inhibition in the ovarian cancer cell line A2780[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (HEALTH SCIENCES), 2008, 46(2): 154-158.

参考文献

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[1]	王谋龙,陈永坤,邢德广,曲良锁,王成伟. 经颅多普勒超声早期预测动脉瘤夹闭术后迟发性脑缺血的临床分析[J]. 山东大学学报（医学版）, 2017, 55(11): 38-41.
[2]	陆衡,刘延国,李曙光,陈晓康,田琦,衣翠华,王秀问. YKL-40对卵巢癌SKOV-3细胞迁移能力的影响[J]. 山东大学学报（医学版）, 2017, 55(1): 33-38.
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[4]	赵云霞,宋静,张灿灿,林雪艳,尉蔚,田永杰. CXXC4增强上皮性卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性[J]. 山东大学学报（医学版）, 2016, 54(3): 24-29.
[5]	徐志宏,吴小华,姚铁柱,王晓翔,段晓阳,史健. mir-99a的表达与上皮性卵巢癌患者预后的关系[J]. 山东大学学报（医学版）, 2016, 54(3): 77-80.
[6]	张春霞,邹存华,宋冬冬,余江. P38MAPK信号通路对卵巢癌中尿激酶型纤维蛋白酶原激活剂的影响[J]. 山东大学学报（医学版）, 2016, 54(2): 68-74.
[7]	吕树卿, 尉蔚, 张灿灿, 田永杰. HGF/PARP-1信号通路调控卵巢癌细胞侵袭转移的作用[J]. 山东大学学报（医学版）, 2015, 53(7): 1-7.
[8]	付伟1，高文娟2，张志勉1，曲迅2，赵玉霞3. 罗勒多糖对卵巢癌SKOV3细胞VEGF受体表达的调控作用及对其侵袭能力的影响[J]. 山东大学学报（医学版）, 2014, 52(5): 39-43.
[9]	李燕，尉蔚，吕树卿，田永杰. PARP-1对卵巢癌血管生成的影响[J]. 山东大学学报（医学版）, 2014, 52(4): 97-101.
[10]	贾宗洋,张向宁,靳艳慧,魏美玲. PD98059联合顺铂对卵巢癌细胞增殖的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2013, 51(2): 27-32.
[11]	丁佰娟，张友忠，吕昌帅，姜侃，刘洪丽. TMPyP4-PDT对人宫颈癌细胞的杀伤效应[J]. 山东大学学报(医学版), 2012, 50(11): 53-57.
[12]	张敬敬1，王哲1，田永杰1，张捷2. PJ34对卵巢癌C13*细胞生长活性及耐药性的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2012, 50(1): 46-50.
[13]	刘敏1,2，王莉2，周婷2，荣风年2. PR/AR基因多态性与上皮性卵巢癌易感性的研究[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(9): 144-148.
[14]	康马飞，卜庆，刘瑛，骆梅青，廖漓漓，涂江江. 培美曲塞单药或联合奈达铂治疗对卡铂及紫杉醇耐药的复发晚期上皮性卵巢癌[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(5): 122-124.
[15]	阚艳艳1，张敬敬1，王哲1，田永杰1，戚晓霞2，张捷3. RNA干扰抑制PARP-1基因表达对卵巢癌细胞增殖及耐药性的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(4): 52-56.

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