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山东大学学报(医学版)

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人骨髓造血干细胞体外扩增培养及其生物学特性研究

张春华sup>1,温泽清1,朱勇2,陈秀玲2   

  1. 1. 山东大学山东省立医院妇产科, 山东 济南 250021; 2.山东中医药大学附属医院外科, 山东 济南 250011
  • 收稿日期:2006-03-29 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-10-24 发布日期:2006-10-24
  • 通讯作者: 张春华

Expansion of the human bone marrow hematopietic stem /progenitor cells ex vivo

ZHANG Chun-hua,WEN Ze-qing,ZHU Yong,CHEN Xiu-ling   

  1. 1. Department of Obstetrics and Gynecology, Shandong Provincial Hospital, Shandong University,Jinan 250021, Shandong, China; 2. Department of Surgery, Affiliated Hospital ofShandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250011
  • Received:2006-03-29 Revised:1900-01-01 Online:2006-10-24 Published:2006-10-24

摘要: 目的:探讨人骨髓单个核细胞(MNCs)、人骨髓AC133+富集细胞在不同的细胞因子组合刺激下的体外扩增潜能及不同细胞因子组合对其生物学特性的影响。方法: 常规分离人骨髓MNCs,富集AC133+细胞,将细胞因子分为6个组合,在不同细胞因子组合刺激下进行体外培养,观察人骨髓MNCs及AC133+富集细胞的扩增情况及AC133细胞表型的表达;应用甲基纤维素半固体培养法,观察在不同细胞因子刺激下的不同培养时间的人骨髓MNCs及AC133+富集细胞的集落形成。结果:相同条件下,人骨髓MNCs明显高于AC133+富集细胞扩增倍数(P<0.05);在细胞因子组合6刺激下人骨髓MNCs及AC133+富集细胞扩增倍数有明显优势(P<0.05),集落生成也高于其他组合(P<0.05),细胞表型AC133的表达与集落形成数目一致。结论:通过4周的体外短期培养, 人骨髓MNCs较AC133+富集细胞更有优势,细胞因子组合6为体外扩增的首选组合。

关键词: 体外 , 单个核细胞, AC133+富集细胞, 骨髓, 人, 造血干细胞

Abstract: To explore the potential ex vivo expansion ability of the human bone marrow mononuclear cells(MNCs) and AC133+ selection cells under different cell factor combination stimulation. Methods: This research utilizes the Ficoll to separate human bone marrow MNCs and MiniMACS to gather AC133+cells. The cell factors were divided into 6 groups. Through the ex vivo comparison cultivation under different cell factor combination stimulation, the expansion and AC133 phenotype of MNCs and AC133+ selection cells were observed, and the clone formation of the MNCs and AC133+ selection cells under different cell factor stimulation on different time was observed by using Halfsolid Methyl cellulose. Results: In the same condition, human bone marrow MNCs were expanding much more than AC133+ cells, and their clone density was more than AC133+ selection cells(P<0.05). In cell factor combination 6 stimulation, human bone marrow MNCs and AC133+ selection cells were expanding much more than other cell factor combinations (P<0.05), and the clone density generated by cell factor combination 6 highered than the clone density generated by other combination stimulations under the same conditions(P<0.05). Conclusion: Through the 4week shortterm cultivation, human MNCs are generating more stem cells. Cell factor combination 6 is the first choice for ex vivo expansion.

Key words: Hematopoietic stem cell, Bone marrow, Persons, Mononuclear cells, AC133+ selection cells,

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