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山东大学学报（医学版）

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重组腺病毒介导的RbAp48基因表达对人宫颈癌细胞生长、增殖的影响

张雯1，冯婷婷1，郑琳1，王红1，卢翌2，齐眉1，于修平1，唐伟1，赵蔚明1   

  1. 山东大学医学院 1.医学微生物学教研室； 2.生物化学与分子生物学系，山东 济南 250012
  • 收稿日期:2013-12-20 出版日期:2014-04-10 发布日期:2014-04-10
  • 通讯作者: 赵蔚明 E-mail：zhaowm@sdu.edu.cn;唐伟 E-mail：weitang@sdu.edu.cn
  • 基金资助:
    国家自然科学基金（81101980，81272209）；山东省自然科学基金（ZR2010HQ001，ZR2012HM031）

Effects of enhanced expression of RbAp48 mediated by recombinant adenovirus on proliferation and growth of cervical cancer cells

ZHANG Wen1, FENG Tingting1, ZHENG Lin1, WANG Hong1, LU Yi2, QI Mei1, YU Xiuping1, TANG Wei1, ZHAO Weiming1   

  1. 1. Department of Medical Microbiology;  2. Department of Biochemistry and Molecular Biology,
     School of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China
  • Received:2013-12-20 Online:2014-04-10 Published:2014-04-10

PDF (PC)

277

摘要： 目的  构建携带RbAp48基因序列的重组腺病毒，检测其对宫颈癌细胞系SiHa肿瘤细胞行为的影响。方法  构建穿梭质粒pDC316-RbAp48，与骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染HEK293细胞，获得复制缺陷型重组腺病毒Ad5-RbAp48，Ad5-RbAp48感染人宫颈癌细胞SiHa，采用免疫印迹法检测RbAp48表达，使用WST-8、细胞计数及软琼脂克隆形成实验，研究Ad5-RbAp48介导RbAp48高表达对SiHa细胞增殖与非锚定依赖性生长的影响。结果  成功构建并鉴定重组腺病毒Ad5-RbAp48，Ad5-RbAp48感染SiHa细胞导致RbAp48高效表达，并有效抑制SiHa细胞增殖能力与非锚定依赖性生长能力。结论  RbAp48重组腺病毒可介导RbAp48高效表达，具有抑制宫颈癌细胞肿瘤细胞行为的作用。

关键词: 基因表达, RbAp48, 腺病毒, 宫颈癌

Abstract: Objective  To construct the recombinant adenovirus carrying RbAp48 gene, and to study its effect on the behaviors of human cervical cancer cell line SiHa. Methods  The shuttle plasmid pDC316-RbAp48 was constructed and co-transfected into the HEK293 cells with genomic plasmids pBHGlox ΔE1, 3Cre to produce the replication-deficient recombinant adenovirus Ad5-RbAp48. Then the SiHa cells were infected with Ad5-RbAp48, and RbAp48 expression was examined by immunoblotting. WST-8, cell number counting, and soft agar assay were carried out to examine the effects of Ad5-RbAp48 infection on cell proliferation and anchorage-independent growth of SiHa cells. Results  Ad5-RbAp48 was successfully constructed. Ad5-RbAp48 infection significantly enhanced the expression of RbAp48 in SiHa cells, and effectively inhibited cell proliferation and anchorage-independent growth. Conclusion  Recombinant adenovirus carrying RbAp48 gene can mediate RbAp48 expression and inhibit behaviors of cervical cancer cells.

Key words: RbAp48, Cervical cancer, Adenovirus, Gene expression

中图分类号: 

  • R37
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