肿瘤坏死因子α在脊柱韧带细胞体外培养中的作用

山东大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 47 ›› Issue (9): 93-97.

肿瘤坏死因子α在脊柱韧带细胞体外培养中的作用

颜廷宾¹，刘海春¹，林琳²，张佐伦³

1. 山东大学齐鲁医院骨创科，济南 250012； 2. 山东省疾病预防控制中心，济南 250 014；3. 山东大学附属省立医院脊柱外科，济南 250021

收稿日期:2009-05-21 发布日期:2009-09-16
通讯作者: 刘海春。Email:liuhaichun@medmail.com.cn
作者简介:颜廷宾（1973- ），男，主治医师，医学博士，主要从事脊柱脊髓疾病的研究。
基金资助:
山东省科技攻关计划资助课题（2007GG30002019）。

Effects　of TNFα on cultured spinal ligament cells in vitro

YAN Tingbin^1, LIU Haichun^1, LIN Lin², ZHANG Zuolun³

1. Department of Orthopaedic Surgery, Qilu Hospital of Shandong Uni versity, Jinan 250012, China; 2. Shandong Center for Disease Control and Prevention, Jinan 2 50014, China; 3. Department of Spine Surgery, Shandong Provincial Hospital Aff iliated to Shandong University, Jinan 250021, China

Received:2009-05-21 Published:2009-09-16

摘要/Abstract

摘要：

目的检测肿瘤坏死因子α(TNFα)在后纵韧带骨化中的表达及对体外培养后纵韧带细胞生物学性状的影响。方法切取手术后纵韧带骨化患者和非后纵韧带骨化患者非骨化部位的脊柱韧带，进行体外培养建立8个后纵韧带骨化细胞系(OL1～OL8)和7个非后纵韧带骨化细胞系(NL1～NL7)。检测体外培养条件下各细胞系的形态学特征及成骨特性。采用免疫组织化学法检测TNFα在正常及退变后纵韧带组织中的表达；分析不同浓度的重组人TNFα（rhTNFα）对两类细胞系分化方向的作用。结果①只有4个OL细胞系表达成骨细胞表型，其余细胞系均表达成纤维细胞表型；②免疫组织化学染色显示，TNFα在退变及成熟的骨化区均有表达，在正常及软骨化后纵韧带组织中无表达；③rhTNFα对各细胞系的作用不同，它可增强各细胞系的碱性磷酸酶（ALP）活性、DNA及胶原合成，能诱导所有OL细胞系分泌骨钙素（OC），只有2个NL细胞系分泌较低水平OC。结论后纵韧带骨化患者脊柱韧带细胞体外培养可表达成骨细胞表型，TNFα在后纵韧带骨化发生中起着重要作用。

关键词: 后纵韧带, 骨化, 成纤维细胞, 成骨细胞, 肿瘤坏死因子&alpha

Abstract:

To observe expression of tumor necrosis factoralpha (TNFα) in ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine (OPLL) and to explore its effect on biological characteristics of ligament cells. MethodsSpinal ligament specimens were obtained from nonossified sites of OPLL patients and nonOPLL patients. Eight OPLL cell lines (OL1OL8) and seven nonOPLL cell lines (NL1NL7) were established. The morphological and osteogenetical characteristics of the ligament cells cultured in vitro were detected.　Expression of TNFαin spinal ligament tissues was determined by an immunohistochemistical (IHC) technique. The effects of rhTNFα in different concentrations on the differentiation of cell lines were also detected. ResultsFour of eight OL cell lines expressed osteoblast phenotypes and the other cell lines expressed fibroblast phenotypes. TNFαexpressed in degenerative and ossified ligament tissues but not in normal or chondrified ligament tissues. TNFαhad different effects on different cell lines, which enhanced the ALP activity, DNA and collagen synthesis of all the cell lines. TNFα also induced OC secretion of all OL cell lines, only two NL cell lines secreted a low level of OC. ConclusionsCultured ligament cells from OPLL patients can express osteoblast phenotypes in vitro. TNFα plays an important role in the formation of OPLL.

Key words: Ossification； Posterior longitudinal ligament； Fib roblast； Osteoblast； Tumor necrosis factorα

中图分类号:

R681.5

. 肿瘤坏死因子α在脊柱韧带细胞体外培养中的作用[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(9): 93-97.

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