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山东大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 47 ›› Issue (6): 88-.

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人脐带间充质干细胞的无动物血清培养及向肝细胞诱导分化

张辉 时庆 侯怀水 李栋   

  1. 1. 中国农村技术开发中心,  北京 100045; 2. 山东大学齐鲁医院低温医学研究室, 济南 250012
  • 收稿日期:2008-11-25 发布日期:2009-06-16
  • 通讯作者: 李栋(1973- ),男,博士,副教授,主要从事儿科血液学专业研究。
  • 作者简介:张辉(1981- ),男,博士,主要从事发育生物学专业研究。
  • 基金资助:

    山东省自然科学基金资助项目(Q2005C03和Y2005C27)和国家自然科学基金项目(30700163)资助。

Culture of human cord mesenchymal stem cells using animal serum-free medium and hepatogenic differentiation

 ZHANG Hui, SHI Qing, HOU Huai-Shui, LI Dong   

  1. 1. China Rural Technology Development Center, Beijing 100045, China;2. Cryomedicine Lab, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, China
  • Received:2008-11-25 Published:2009-06-16

摘要:

目的 探索从脐带组织中分离培养间充质干细胞的无动物血清方法,并将其向肝细胞诱导分化。方法 分离自体脐血清用于后续细胞培养,利用酶消化法从脐带组织中分离培养间充质干细胞,检测其形态和免疫表型,并采用两步法诱导其向肝细胞诱导分化。结果  流式细胞术检测结果表明,自体脐血清培养得到的贴壁细胞表型符合间充质干细胞特征,且在合适诱导条件下能肝样细胞分化,经过4周处理,能表达肝细胞特异性基因,部分细胞具有吞噬低密度脂蛋白的能力。结论  采用自体脐血清有效地培养脐带间充质干细胞,具备向肝细胞的分化能力。

关键词: 脐带, 干细胞, 脐血清, 细胞培养

Abstract:

Objective To investigate the protocols of isolating mesenchymal stem cells from the cord using an animal serum-free method and to evaluate their differentiation ability to hepatocytes. Methods Autologous cord blood serum was used to culture cord mesenchymal stem cells. An enzyme digesting method was used to isolate mesenchymal stem cells from the cord. Morphology, immunotyping and hepatogenic differentiation of these cells were assayed. Results FACS experiments showed that immunotyping of adherent cells cultured using autologous cord blood serum matched with the characters of mesenchymal stem cells and could differentiate into hepatocytes under the appropriate induction condition. After treatment for 4 weeks, differentiated cells could express hepatocytespecific markers. Some hepatocyte-like cells could uptake lipoprotein. Conclusion   The autologous cord blood serum method could effectively culture mesenchymal stem cells with hepatogenic differentiation ability.

Key words:  Stem cells; Cord blood serum; Cell culture

中图分类号: 

  • R329
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