两种不同培养基对体外培养脊髓神经元的影响

山东大学学报(医学版)

两种不同培养基对体外培养脊髓神经元的影响

袁玉静，傅志俭，孙涛

（山东大学附属省立医院疼痛科，济南 250021）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 发布日期:2009-04-16
通讯作者: 傅志俭

Influence of two media on spinal neurons in vitro

YUAN Yujing, FU Zhijian, SUN Tao

(Department of Pain Management, Provincial Hospital Affiliated to Shandong University, Jinan 250021, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Published:2009-04-16
Contact: FU Zhijian

摘要/Abstract

摘要： 目的建立体外稳定获取大数量及高纯度脊髓神经元的培养方案，比较当前国内外最常用的无血清培养基（Neurobasal+B27，NCM）与传统含血清培养基（DMEM/F12+10%胎牛血清+5%马血清,SCM）对体外培养脊髓神经元生长状态的影响。方法取E1415?d Wistar大鼠的胚胎脊髓组织行胰酶消化获取脊髓神经元的单细胞悬液，分别用NCM与SCM进行培养，差速贴壁法及AraC干预纯化培养的神经元。于接种后第1、2、3、4、5、6、7?d倒置相差显微镜下观察细胞生长状态的变化，并用免疫荧光细胞化学法比较两种培养基培养下获取的神经元纯度。结果采用NCM培养的脊髓神经元生长良好，对环境变化如换液及加入AraC更为耐受；NCM培养的神经元的纯度为(87.70±8.70)%，SCM培养的神经元纯度为（78.61±7.00）%，前者纯度更高（P=0.019）。结论NCM较之SCM更加适合脊髓神经元的体外培养。

关键词: 细胞培养, 脊髓, 神经元, 培养基, 免疫荧光测定

Abstract: To establish a protocol for harvesting a large number of spinal cord neurons and to compare the effects of two media, NCM（Neurobasal+B27）and SCM (DMEM/F12+10% fetal bovium serum+5% donor equine serum) on spinal neurons cultured in vitro. MethodsEmbryonic spinal cords of the E Wistar rats on day 14 to 15 were extracted and digested with 0.05% trypsin. Neurons were cultured by the two media for 1 week in vitro. Both physical and pharmacological methods were used to purify the neurons. An inverted phase contrast microscope was used for morphological development observation and immunofluorescence staining was used to compare spinal neuron purity cultured by the two media. ResultsCells cultured by NCM had a higher purity and had less damage than by SCM. ConclusionNeurobasal+B27 is more supportive for neuron culture in vitro than the traditional serumcontaining medium.

Key words: Cell culture, Spinal cord, Neurons, Culture media, Immunofluorometic asscuy

中图分类号:

R311

袁玉静，傅志俭，孙涛
. 两种不同培养基对体外培养脊髓神经元的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(04): 65-68.

YUAN Yujing, FU Zhijian, SUN Tao. Influence of two media on spinal neurons in vitro[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (HEALTH SCIENCES), 2009, 47(04): 65-68.

参考文献

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[1]	张道来孙涛谢珊珊王玉卓赵玲冯玉新辛华. 体外原代培养胎鼠大脑皮层神经元NMDAR1亚基表达的发育性变化[J]. 山东大学学报(医学版), 2209, 47(6): 28-32.
[2]	张辉时庆侯怀水李栋. 人脐带间充质干细胞的无动物血清培养及向肝细胞诱导分化[J]. 山东大学学报(医学版), 2209, 47(6): 88-.
[3]	赵相瑞,阴勇成,方跃鹏,杨志杰,宁斌. 基质Gla蛋白在脊髓损伤后纤维瘢痕形成中的作用机制[J]. 山东大学学报 (医学版), 2026, 64(5): 50-60.
[4]	张洪嘉,姚文环,寇蕊蕊,程东,张天亮,赵秀兰. 镉与微塑料单独及联合暴露对小鼠认知功能的影响[J]. 山东大学学报 (医学版), 2025, 63(3): 44-54.
[5]	刘翔,高玮,王超,张晓艳. 基于Web of Science的脊髓损伤致截瘫患者康复研究可视化分析[J]. 山东大学学报 (医学版), 2025, 63(11): 75-86.
[6]	周永康,孙境,张帅,钱向阳. 胸腹主动脉瘤开放修复脊髓保护策略的研究进展[J]. 山东大学学报 (医学版), 2024, 62(9): 49-54.
[7]	孙境,张帅,齐红霞,李远,周永康,胡可鉴,钱向阳. 常温自身动脉转流内脏优先策略在胸腹主动脉置换手术中的脊髓保护作用[J]. 山东大学学报 (医学版), 2024, 62(9): 80-85.
[8]	甘琦晴,刘现虎,苟园,杨彬. 主动脉夹层合并截瘫诊断与治疗2例并文献复习[J]. 山东大学学报 (医学版), 2024, 62(8): 101-106.
[9]	刘海霞,皇甫莎莎,桑晓玉,崔东清,毕建忠,王萍. 间充质干细胞对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠铁死亡的影响[J]. 山东大学学报 (医学版), 2024, 62(6): 1-8.
[10]	刘文竹,刘付臣. 1例脊髓延髓肌萎缩症运动神经元分化及分子病理分析[J]. 山东大学学报 (医学版), 2024, 62(4): 92-100.
[11]	黎少莹,江子晴,王林,刘永瑞,左俊岭. 中间链球菌引起多发性脓肿、急性脊髓炎1例报道[J]. 山东大学学报 (医学版), 2023, 61(8): 101-105.
[12]	王蕾,向淇,刘学伍. 伴系统性硬化症、类风湿关节炎的副肿瘤神经综合征1例[J]. 山东大学学报 (医学版), 2023, 61(7): 118-120.
[13]	李晴,张安娜,杜艳圣,刁久洲,崔若瑾,付鹏蕊,岳欣毅,周庆博. 47例单个脊髓炎性脱髓鞘病灶转化的影响因素[J]. 山东大学学报 (医学版), 2023, 61(5): 37-43.
[14]	张忆朦,孙巧玲,杨向东. 过敏性紫癜合并视神经脊髓炎谱系疾病1例[J]. 山东大学学报 (医学版), 2023, 61(2): 137-140.
[15]	侯少瑾,王云凤,曹丽丽,刘学伍,赵秀鹤,王胜军. 视神经脊髓炎谱系疾病53例与多发性硬化11例的脑脊液检测比较[J]. 山东大学学报 (医学版), 2023, 61(1): 32-37.

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