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山东大学学报(医学版) ›› 2013, Vol. 51 ›› Issue (06): 49-52.

• 基础医学 • 上一篇    下一篇

miR-200c在CIK细胞诱导胃癌细胞凋亡中的作用

杜宪红1,邢召全2,焦晋山1   

  1. 1.山西医科大学第一医院输血科, 太原 030001; 2.山东大学齐鲁医院泌尿外科, 济南 250012
  • 收稿日期:2013-01-01 出版日期:2013-06-10 发布日期:2013-06-10
  • 通讯作者: 焦晋山,E-mail:jjs231@163.com
  • 基金资助:

    中国博士后科研基金(2012M521346);山东省博士后创新基金(201203041)。

The role of miR200c in the apoptosis of gastric cancer cell induced by CIK cells

DU Xian-hong1, XING Zhao-quan2, JIAO Jin-shan1   

  1. 1. Department of Blood Transfusion, The First Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China;
    2. Department of Urology, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, China
  • Received:2013-01-01 Online:2013-06-10 Published:2013-06-10

摘要:

目的   观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对胃癌细胞凋亡的影响,探讨微RNA-200c(miR-200c)在此过程中的作用。方法   实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞(MKN-45、BGC-803)miR-200c表达,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡。构建包含miR-200c作用位点的psiCHECK2-FAP-1 3’-UTR,转染胃癌细胞,双荧光素酶报告基因试剂盒检测胃癌细胞Fas相关磷酸酯酶-1(FAP-1)荧光素酶活性。结果   CIK细胞促进MKN-45细胞miR-200c表达[(2.10±0.25)倍,P<0.05]及凋亡(P<0.01),而miR-200c inhibitor能够拮抗此过程(P<0.05)。另外,miR-200c mimics诱导胃癌细胞凋亡(P<0.05),BGC-803细胞也发现相似趋势。miR-200c直接作用于FAP-1基因3’-UTR区,且CIK细胞降低胃癌细胞荧光素酶活性[MKN-45细胞:(49.67±2.36)%,P<0.01;BGC-803细胞:(43.86±4.41)%,P<0.01]。结论   CIK细胞通过上调miR-200c促进胃癌细胞凋亡,为CIK细胞治疗胃癌提供新的数据。

关键词: 胃肿瘤;CIK细胞;细胞凋亡;微RNA-200c;Fas相关磷酸酯酶-1

Abstract:

Objective   To observe the effect of cytokine-induced killer cells (CIK cells) on the apoptosis of gastric cancer (GC) cells, and explore the role of microRNA-200c (miR-200c) in this process. Methods   MiR-200c was determined by real time quantitative PCR, and the apoptosis was detected by flow cytometry in GC cells (MKN-45 and BGC803). psiCHECK2-FAP-1 3’-UTR containing the binding site of miR-200c was constructed, and then transfected into GC cells. Luciferase activity of FAP-1 (Fas-associated phosphatase-1) was determined with the assistance of dual luciferase report system. Results   CIK cells promoted GC cell apoptosis (P<0.01) and the expression of miR-200c [(2.10±0.25) fold, P<0.05], and miR-200c inhibitor might block this process (P<0.05). Moreover, miR-200c mimics induced GC cell apoptosis (P<0.05). The similar trend was also observed in BGC-803 cells. MiR-200c targeted at the site of FAP-1 3’-UTR, and CIK cells decreased the luciferase activity of GC cells [MKN45: (49.67±2.36)%, P<0.01; BGC803: (43.86±4.41)%, P<0.01]. Conclusion   CIK cells could enhance GC cell apoptosis by upregulating miR-200c, which may provide a new database to elucidate GC therapy using CIK cells.

Key words: Stomach neoplasms; CIK cell; Apoptosis; MiR-200c; Fas-associated phosphatase-1

中图分类号: 

  • R735.2
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