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山东大学学报(医学版) ›› 2013, Vol. 51 ›› Issue (5): 20-23.

• 基础医学 • 上一篇    下一篇

EGFR和HER-3在人肺腺癌细胞及培美曲塞二钠耐药细胞中的表达差异

刘冰1,于壮1,侯宪鹏1,姚如永2   

  1. 青岛大学医学院附属医院 1.肿瘤中心; 2.中心实验室,  山东 青岛 266003
  • 收稿日期:2012-11-27 出版日期:2013-05-10 发布日期:2013-05-10
  • 通讯作者: 于壮, E-mail:yuzhuang2002@163.com
  • 基金资助:

    吴阶平医学基金会资助课题(320.6753.1219)

Different expressions of EGFR and HER-3 genes in human lung adenocarcinoma cells and pemetrexed-resistant cells

LIU Bing1, YU Zhuang1, HOU Xian-peng1, YAO Ru-yong2   

  1. 1. Cancer Center; 2. Central Laboratory, the Affiliated Hospital of Medical College,
    Qingdao University, Qingdao 266003, Shandong, China
  • Received:2012-11-27 Online:2013-05-10 Published:2013-05-10

摘要:

目的   探讨EGFR和HER-3基因在人肺腺癌细胞株A549和培美曲塞二钠(PEM)诱导的耐药细胞株A549/PEM中的表达变化。方法   用大剂量PEM诱导、建立耐药细胞株A549/PEM,CCK-8法检测A549和A549/PEM细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞的周期分布,RT-PCR检测EGFR与HER-3 mRNA在A549和A549/PEM细胞中的表达量。结果   CCK-8法测得PEM对A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为3.43×10-6mol/L,用PEM反复处理细胞4个月,成功诱导出耐药指数(RI)为5.15倍的耐药细胞株A549/PEM。流式细胞术检测结果显示,A549和A549/PEM 细胞处于G1/G0期的比例分别为(56.25±0.10)%和(65.12±0.40)%(P<0.05),处于S期的细胞比例分别为(40.87±0.30)%和(31.74±0.40)%(P<0.05)。EGFR mRNA 在A549和A549/PEM细胞中的相对表达量分别为0.55±0.08和0.64±0.07,HER-3 mRNA在A549和A549/PEM细胞中的相对表达量分别为1.29±0.03和1.56±0.12,其差异均有统计学意义(P<0.05)。结论   与A549细胞相比,A549/PEM中EGFR和HER-3的表达量均增高,提示这两种基因表达量的变化可能与PEM耐药相关。

关键词: 培美曲塞二钠;肺肿瘤;A549细胞;EGFR基因;HER-3基因

Abstract:

Objective   To investigate different gene expressions of EGFR and HER-3 in human lung adenocarcinoma cells A549 and pemetrexed disodium(PEM)-resistant cells A549/PEM. Methods   A549/PEM cell line was established with large dose of PEM. Growth inhibitions of A549 and A549/PEM cells were determined by CCK8 assay. Cell cycle analysis was performed by flow cytometry (FCM). RT-PCR was used to analyse mRNA expressions of EGFR and HER-3 in A549 and A549/PEM cells. Results   CCK-8 assay showed that the IC50 of PEM for A549 cells was 3.43×10-6mol/L. PEM-resistant cell line A549/PEM was established after being exposed to PEM repeatedly for 4 months, and the resistance index (RI) was 5.15. Flow cytometry analysis showed that proportions in G1/G0 phase of A549 and A549/PEM cells were (56.25±0.10)% and (65.12±0.40)% (P<0.05). The proportions in S phase were (40.87±0.30) % and (31.74±0.40)% (P<0.05). The mRNA expressions of EGFR in A549 and A549/PEM were 0.55±0.08 and 0.64±0.07, and mRNA expressions of HER3 in A549 and A549/PEM were 1.29±0.03 and 1.56±0.12. The differences were statistically significant(P<0.05). Conclusion   Gene expressions of EGFR and HER-3 increase in A549/PEM cells, compared with that in A549 cells. It suggestes that changes of the two genes expressions appear to be associated with resistance to PEM.

Key words: Pemetrexed disodium; Lung neoplasms; A549 cells; EGFR gene; HER-3 gene

中图分类号: 

  • R734.2
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