重组人红细胞生成素对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖和TGF-βmRNA的影响

山东大学学报(医学版) ›› 2012, Vol. 50 ›› Issue (5): 65-69.

重组人红细胞生成素对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖和TGF-βmRNA的影响

王蕾，关广聚

山东大学第二医院肾内科，济南 250033

收稿日期:2012-02-15 出版日期:2012-05-10 发布日期:2012-05-10
通讯作者: 关广聚，男，教授，博士生导师，主要从事糖尿病肾病发病机制研究。 E-mail:guangj @sdu.edu.cn
作者简介:王蕾(1978- )，女，博士研究生，主要从事肾小球疾病发病机制及治疗的研究

Effect of rHuEPO on the proliferation and TGF-β mRNA expressions of
rat mesangial cells induced by high glucose

WANG Lei, GUAN Guang-ju

Department of Nephrology, The Second Hospital of Shandong University, Jinan 250033, China

Received:2012-02-15 Online:2012-05-10 Published:2012-05-10

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨重组人红细胞生成素(rHuEPO)对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖和表达TGF-βmRNA的影响。方法以大鼠MCs为研究对象，分为正常对照组(NC组，葡萄糖浓度为5mmol/L)，高糖组(HG组，葡萄糖浓度为10、20、30、40、50mmol/L)，其中30mmol/L的高糖组分别以不同浓度rHuEPO(1、10、50、100、1000U/mL)分别干预24、48、72h，Cell Counting Kit-8(CCK-8)比色法检测细胞增殖情况。用Realtime PCR法测定干预24、48、72h时细胞TGF-βmRNA表达水平。结果在30mmol/L以下时，葡萄糖能明显刺激MCs的增殖，以30mmol/L培养72h反应最佳，rHuEPO在低于100U/mL时能促进高糖诱导的MCs增殖。rHuEPO在1000U/mL时，细胞毒性明显，大部分细胞死亡。结论高糖在一定时间和浓度内有刺激大鼠MCs增殖的效应，rHuEPO在一定浓度和时间内能刺激高糖培养的MCs增殖，抑制高糖培养的MCs表达TGF-βmRNA。

关键词: 重组人红细胞生成素;系膜细胞；增殖；TGF-βmRNA

Abstract:

Objective To investigate the effect of recombinant human erythropoietin( rHuEPO )on high glucose-induced proliferation and TGF-βmRNA expressions in rat renal mesangial cell (MCs). Methods Cultured RMCs were stimulated by different concentrations of high glucose (10, 20, 30, 40 and 50mmol/L). 30mmol/L was the fit stimulation concentration, and then different concentrations of rHuEPO(1, 10, 50, 100 and 1000U/mL)were added into MCs of glucose induced rats. The MCs proliferative rates within 24h, 48h and 72h were detected by the Cell Counting Kit-8 (CCK-8) colorimetric assay. The TGF-βmRNA level in cells was detected by real-time PCR. Results Within the range of 30mmol/L, glucose could stimulate the MCs proliferation. The best concentration and the best culture time were 30mmol/L and 72 hours respectively. Within the range of 100IU/ml, different concentrations of rHuEPO could inhibit the high glucose induced MCs proliferation and inhibit TGF-βmRNA expressions. Conclusions High concentrations within 30mmol/L can stimulate MCs proliferation. Different concentrations of rHuEPO within 100IU/ml can stimulate the high glucose induced proliferation of MCs and inhibit TGF-βmRNA expressions.

Key words: Recombinant human erythropoietin; Mesangial cell; Proliferation; TGF-βmRNA

中图分类号:

R587.1

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