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山东大学学报(医学版) ›› 2012, Vol. 50 ›› Issue (4): 33-37.

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下调SnoN基因表达对HepG2细胞增殖及凋亡的影响

王坤红1,王文奇2,相玉芬1,王义国2,刘长虹2,李双玲2,曹莉莉3   

  1. 山东大学 1.医学院, 济南 250012; 2.附属千佛山医院消化内科, 济南 250014;
    3.附属千佛山医院中心实验室, 济南 250014
  • 收稿日期:2011-09-26 出版日期:2012-04-10 发布日期:2012-04-10
  • 通讯作者: 王文奇(1962- ),男,教授,主要从事肝癌发病机制的研究。 E-mail:wangwq62@sina.com
  • 作者简介:王坤红(1985- ),女,硕士研究生,主要从事肝癌发病机制的研究。
  • 基金资助:

    山东省科技发展计划基金资助项目(2008GG10002047)

Effect of down-regulating SnoN gene expression on proliferation
and apoptosis of HepG2 cells

WANG Kun-hong1, WANG Wen-qi2, XIANG Yu-fen1, WANG Yi-guo2,
LIU Chang-hong2, LI Shuang-ling2, CAO Li-li3   

  1. 1. School of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, China;
    2. Department of Gastroenterology, Qianfoshan Hospital Affiliated to Shandong University, Jinan 250014, China;
    3. Central Laboratory, Qianfoshan Hospital Affiliated to Shandong University, Jinan 250014, China
  • Received:2011-09-26 Online:2012-04-10 Published:2012-04-10

摘要:

目的   通过小干扰RNA(siRNA)下调人肝癌HepG2细胞中SnoN基因的表达,探讨SnoN对HepG2细胞增殖、凋亡等生物学功能的影响及其意义。方法   设计并化学合成3条靶向SnoN的siRNA序列,采用阳离子脂质体瞬时转染的方法将干扰序列转染至HepG2细胞内,采用RT-PCR和Western blot方法,检测转染后的抑制效果并筛选出一条抑制效果最好的干扰序列,然后采用CCK-8法和流式细胞术检测SnoN基因表达下调后HepG2细胞增殖、凋亡的变化。结果   3条siRNA均对SnoN的表达有抑制作用,以siRNA-C抑制效果最好。下调SnoN基因表达后,HepG2细胞的增殖受到抑制(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05)。结论   靶向SnoN的siRNA可有效抑制SnoN基因的表达,进而使HepG2细胞的生长受到抑制、细胞凋亡增加,表明SnoN基因可能与肝癌细胞的增殖与凋亡有关。

关键词: 小干扰RNA;基因,SnoN;肝肿瘤;细胞凋亡

Abstract:

Objective   To explore the biological influence of small interfering RNA(siRNA) down-regulating SnoN gene expression on biological function of human HepG2 cells, such as proliferation and apoptosis. Methods   Three siRNAs targeting SnoN were designed and synthesized. The siRNAs were transiently transfected into HepG2 cells by cationic liposomes, and then the inhibition effect was detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot. The SnoN-siRNA with the most powerful inhibition was selected. The proliferation of HepG2 cells was examined by CCK-8, and the apoptosis was examined by flow cytometry. Results   All three siRNAs efficiently inhibited expression of the SnoN gene, and the siRNA-C had the highest inhibition ratio. The proliferation of HepG2 cells was significantly inhibited(P<0.05) and the apoptosis increased(P<0.05) after SnoN was down-regulated. Conclusion   SnoN specific siRNA can effectively inhibit expression of SnoN in human HepG2 cells, and induce growth inhibition and apoptosis.

Key words: Small interfering RNA; Genes, SnoN; Liver neoplasms; Apoptosis

中图分类号: 

  • R735.7
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