山东大学学报(医学版) ›› 2010, Vol. 48 ›› Issue (10): 9-13.
张书敏1,2,王永梅1,杜贻萌1,魏峰涛1,蒋卫东1,王欣1,董兆强1,徐冬玲1,姜红2,鹿庆华1
ZHANG Shu-min1,2, WANG Yong-mei1, DU Yi-meng1, WEI Feng-tao1, JIANG Wei-dong1,WANG Xin1, DONG Zhao-qiang1, XU Dong-ling1, JIANG Hong2, LU Qing-hua1
摘要:
目的 探讨胱抑素C(CysC)高表达对大鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖能力的影响。方法 取出生1~3d的Sperague-Dawley(SD)清洁级大鼠10只,体质量10~15g,差速贴壁法培养乳鼠心肌成纤维细胞;采用Gateway技术构建重组CysC腺病毒高效表达载体(Ad-CysC)并体外转染大鼠CFs;将对数生长期的大鼠CFs随机分成正常细胞组(PBS组),携有绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒组(Ad-GFP组)及CysC腺病毒高表达组(Ad-CysC组)。采用蛋白免疫印迹技术(WB)检测CysC蛋白在CFs中的表达情况,通过5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测CysC高表达对CFs增殖能力的影响。结果 经DNA测序及WB结果分析,CysC腺病毒高效表达载体构建成功,转染CFs 24h后(MOI=200),AdCysC的转染效率高达90%以上;用重组CysC腺病毒转染CFs后, CysC蛋白在24h即有明显的表达上调(P<0.05);与PBS组及Ad-GFP组相比,转染Ad-CysC的CFs在72h的 BrdU摄取率显著提高(P<0.05)。结论 大鼠CysC腺病毒高效表达能够促进CFs增殖,可能加速心肌纤维化进程。
中图分类号:
[1] | . 维甲酸诱导胚胎神经管畸形与βcatenin基因表达的关系[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(8): 45-49. |
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