山东大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 47 ›› Issue (12): 61-65.
徐洁1,崔彬2,焦玉莲2,游力2,张捷2,刘晓雯2,曲芸芸2,朱敏2,孙新平2,赵跃然1,2
XU Jie 1, CUI Bin 2, JIAO Yulian 2, YOU Li 2, ZHANG Jie 2, LIU Xiaowen 2,QU Yunyun 2, ZHU Min 2, SUN Xinping 2, ZHAO Yueran 1,2
摘要:
目的构建人高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达载体,并探讨其免疫调节作用。方法从HMGB1克隆载体酶切分离HMGB1基因片段,插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITEEGFP,菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体。重组表达质粒转染人单核细胞系(U937),梯度G418筛选,荧光和Western blot检测HMGB1的表达。结果菌落PCR和酶谱分析显示目的基因被正确插入真核表达载体,获得重组质粒pCITEEGFPHMGB1,转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强,转染细胞中目的蛋白HMGB1表达量明显升高。结论成功构建重组载体pCITEEGFPHMGB1,并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系,为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础。
中图分类号:
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