肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的测定

山东大学学报(医学版)

肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的测定

孟祥姣，王亚伟，王秀问

（山东大学齐鲁医院肿瘤中心化疗科，济南 250012）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 发布日期:2009-04-16
通讯作者: 王秀问

Cancer initiating cells of lung cancer cell line A549

MENG Xiangjiao, WANG Yawei, WANG Xiu wen

（Departmengt of Chemotherapy, Cancer Center, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, China）

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Published:2009-04-16
Contact: WANG Xiu wen

摘要/Abstract

摘要： 目的通过克隆形成及致瘤能力研究肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的比例。方法采用有限稀释法，检测细胞单克隆形成的数量及大小；收集来自于1个细胞形成的克隆细胞，种于BALB/C裸鼠皮下，观察其致瘤能力；采用CD133磁珠分选A549细胞，测定CD133+、CD133-细胞的克隆形成能力，测定Hoechst33342染色对非SP细胞的增殖能力和单克隆形成能力的影响。结果45%以上的A549细胞能够形成大于100个细胞的大克隆，其传代后又能形成新的克隆，来源于1个大克隆的细胞种植到BALB/C裸鼠身上，10?d左右能形成肉眼可见的肿瘤；CD133+、CD133-细胞克隆形成能力相同；Hoechst33342染色能够明显干预细胞的克隆形成及增殖能力。结论45%以上的A549细胞是肿瘤始发细胞。

关键词: 肿瘤干细胞测定, 致瘤性试验, 肺肿瘤, 克隆细胞, 小鼠,近交BALB C

Abstract: To investigate the fraction of cancer initiating cells in lung cancer cell line A549 by cloning and tumorigenic analyses. MethodsA clone formation assay was carried out to determine the clonogenicity and regeneration ability of cells. Cells from a clone were injected into BALB/Cnude mice to test tumorigenicity. To determine whether CD133- cells of A549 possess the characteristics of cancer stem cells, we isolated the cells by magnetic separation and tested whether Hoechst 33342 staining could affect clonogenicity of the A549 cells by clone formation assay. ResultsMore than 45% of the A549 cells formed large clones that were able to generate subclones and subsequently give rise to xenograft tumors in the BALB/Cnude mice. Both CD133+ cells and CD133- cells of A549 possessed stem cell characteristics, and Hoechst 33342 affected the clonogenicity and proliferation of a single A549 cell. ConclusionMore than 45% of A549 cells are cancerinitiating cells.

Key words: Tumor stem cell assay, Carcinogenicity tests, Lung neoplasms, Clone cells, Mice,inbred BALB C

中图分类号:

R734.2

孟祥姣，王亚伟，王秀问
. 肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的测定[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(04): 13-17.

MENG Xiangjiao, WANG Yawei, WANG Xiu wen.

Cancer initiating cells of lung cancer cell line A549

[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (HEALTH SCIENCES), 2009, 47(04): 13-17.

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