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山东大学学报(医学版)

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地西他滨对同步化的G0/G1期MDS-L细胞系线粒体功能的影响

邱宗建,杨娟,宋强   

  1. 山东大学齐鲁医院血液科, 山东 济南 250012
  • 收稿日期:2013-11-08 出版日期:2014-05-10 发布日期:2014-05-10
  • 通讯作者: 宋强 E-mail:qiangs303@sina.com
  • 基金资助:
    山东省自然科学基金 (Y2006C63)

Role of decitabine in the mitochondria biogenesis of synchronized G0/G1 phase MDS-L cell line

QIU Zongjian, YANG Juan, SONG Qiang   

  1. Department Of Hematology, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China
  • Received:2013-11-08 Online:2014-05-10 Published:2014-05-10

摘要: 目的  初步探讨地西他滨(DAC)在不整合入基因组DNA的情况下对线粒体生物学功能的影响。方法  采用阿非迪霉素(APC)将MDS-L细胞同步化在G0/G1期。DCFH-DA检测不同浓度DAC(0、5、10、15μmol/L)处理后的同步化G0/G1期细胞系活性氧(ROS)的产生水平。采用qRT-PCR法检测线粒体DNA拷贝数和线粒体编码基因NADH脱氢酶1、6(ND1、ND6)mRNA改变。结果  与对照组相比,DAC在低浓度5μmol/L条件下可以通过不依赖DNA损伤的途径增加细胞ROS的产生(P<0.05),同时细胞内线粒体DNA(MtDNA)的拷贝数较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。但随着DAC浓度增加,DAC在高浓度(15μmol/L)可降低ROS的产生(P<0.05)。此外,在高浓度DAC作用下,ND1和ND6基因表达较对照组明显升高(P<0.05)。结论  DAC通过影响细胞ROS产生,改变线粒体DNA的拷贝数以及调控线粒体基因的表达,产生对线粒体功能的影响,并呈浓度依赖性。

关键词: 地西他滨, 活性氧离子, G0/G1期, 线粒体

Abstract: Objective  To investigate the effect of decitabin (DAC) on the mitochondrial biogenesis of synchronized G0/G1 cells. Methods  MDS-L cells were treated with aphidicolin (APC) to synchronize cell cycle at G0/G1 stage. After treatment of decitabine at different concentrations (0, 5, 10, 15μmol/L), reactive oxygen species (ROS) productions were detected by DCFH-DA. Changes of mitochondrial DNA copy number and expressions of coded genes,NADH dehydrogenase 1 (ND1) and NADH dehydrogenase 6(ND6), were detected with qRT-PCR.  Results  In comparison with the control group, decitabine at low concentration (5μmol/L) could promote the production of ROS (P<0.05) and increase the copy number of mtDNA (P<0.05); however, as the concentration increased to 15μmol/L, ROS production started to decline to even lower than that of the control (P<0.05). Besides, DAC could significantly change the expressions of ND1 and ND6 at high concentration. Conclusion  Decitabine can affect mitochondrial biogenesis by altering the mtDNA copy number and gene expressions in a concentration-dependent manner.

Key words: G0/G1 stage, Mitochondria, Reactive oxygen species, Decitabine

中图分类号: 

  • R551.3
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