腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统对PVNS滑膜细胞的杀伤作用

山东大学学报(医学版)

腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统对PVNS滑膜细胞的杀伤作用

杨东，张伟，李伟，任强，刘青春

山东大学附属省立医院关节外科，济南 250021

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-07-16 发布日期:2008-07-16
通讯作者: 李伟

Killing action of the adenovirus vector carrying HSV-TK on synovial cells of pigmented villonodular synovitis

YANG Dong, ZHANG Wei, LI Wei, REN Qiang, LIU Qing-chun

Department of Orthopaedics, Provincial Hospital Affiliated to Shandong University, Jinan 250021, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-07-16 Published:2008-07-16
Contact: LI Wei

摘要/Abstract

摘要：

目的〓〖HTK〗探讨腺病毒介导HSV-TK/GCV系统对色素沉着绒毛结节滑膜炎(PVNS)滑膜细胞的体外杀伤作用。〖HTW〗方法〓〖HTK〗将含LacZ基因的重组腺病毒载体Ad-LacZ转染PVNS滑膜细胞, X-gal染色法确定腺病毒对该细胞的转染效率，PCR检测转染细胞中HSV-TK基因的表达，MTT法检测TK阳性细胞对GCV的体外敏感性及旁观者效应，流式细胞仪检测HSV-TK/GCV系统作用后细胞的凋亡及坏死。〖HTW〗结果〓〖HTK〗感染复数为120时，近100％的细胞可被转染。HSV-TK/GCV系统对PVNS滑膜细胞的杀伤作用十分明显，且存在明显的旁观者效应。HSV-TK/GCV系统作用后细胞出现明显的凋亡及坏死。〖HTW〗结论〓〖HTK〗HSV-TK/GCV系统可明显杀伤PVNS中过度增殖滑膜细胞，可望用于PVNS的治疗。

关键词: 旁观者效应, 滑膜炎, 胸苷激酶, 基因疗法, 单纯疱疹病毒, 色素绒毛结节性, 腺病毒载体

Abstract:

Objective〓〖WTBZ〗To explore the killing effects of the adenovirus vector carrying HSV-TK on synovial cells of pigmented villonodular synovitis(PVNS) in vitro. 〖WTHZ〗Methods〓〖WTBZ〗Byadenovirus vector carrying the LacZ gene was used in the synovial cells of the PVNS transfection, and the transfection efficiency was measured by X-gal staining. The expression of HSV-TK was assayed by PCR. The cytotoxicity and bystander effect were determined by MTT. The apoptosis and necrosis cells were determined by FCM. 〖WTHZ〗Results〓〖WTBZ〗When the MOI was 120, approximate 100% cells were infected. The HSV-TK/GCV system could kill proliferative synovial cells and the bystander effect definitely existed in this killing action. Also apoptosis and necrosis cells were found by FCM. 〖WTHZ〗Conclusion〓〖WTBZ〗The HSV-TK/GCV system can kill proliferative synovial cells of PVNS and can be used to treat PVNS.

Key words: Adenovirus vector, Herpes simplex virus, Thymidine kinase, Gene therapy: Bystander effect, Synovitis, pigmented villonodular

中图分类号:

R684.3

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