您的位置：山东大学 -> 科技期刊社 -> 《山东大学学报（医学版）》

山东大学学报(医学版)

• 论文 •    下一篇

人同源盒基因NKX3.1cDNA真核表达载体的构建及表达

刘闻闻，于春晓，崔福爱，张鹏举，胡晓燕，陈蔚文，张建业， 姜安丽   

  1. 山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所， 山东 济南 250012
  • 收稿日期:2005-09-14 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-10-24 发布日期:2006-10-24
  • 通讯作者: 刘闻闻

LIU Wen-wen, YU Chun-xiao, CUI Fu-ai, ZHANG Peng-ju, HU Xiao-yan,CHEN Wei-wen， ZHANG Jian-ye, JIANG An-li   

  1. Institute of Biochemistry and Molecular Biology, School of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China
  • Received:2005-09-14 Revised:1900-01-01 Online:2006-10-24 Published:2006-10-24
  • Contact: LIU Wen-wen

摘要： 目的：构建人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体，研究其在前列腺癌细胞PC3、LNCaP中的表达情况。方法：以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RTPCR扩增NKX3.1基因全长编码片段，T/A克隆至pCR2.1载体中。经酶切、测序鉴定后,将NKX3.1cDNA重组到真核表达载体pcDNA3.1（+）中。将pcDNA3.1NKX3.1表达载体瞬时转染前列腺癌细胞PC3和LNCaP 细胞,RTPCR和Western blot法检测NKX3.1cDNA在转录水平和蛋白水平的表达。结果：人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体pcDNA3.1NKX3.1经酶切及测序鉴定正确。 pcDNA3.1NKX3.1转染PC3和LNCaP细胞后，经RTPCR和Western blot证明在mRNA和蛋白水平均能有效表达NKX3.1。结论：成功构建了真核表达载体pcDNA3.1NKX3.1, 转染前列腺癌细胞PC3和LNCaP后能有效表达。

关键词: 基因表达, 转染 , 同源盒, 真核表达载体, 基因

Abstract: To construct recombinant eukaryotic expression vector, pcDNA3.1NKX3.1 and express it in prostate cancer PC3 and LNCaP cells. Methods： The NKX3.1 complete decoding sequence was amplified by RTPCR by using RNA from LNCaP cell and was cloned into pCR2.1 vector by T/A ligation, and then into pcDNA3.1(+) vector to generate pcDNA3.1NKX3.1 which was instantaneously transfected into prostate cancer PC3 and LNCaP cells. The expression of NKX3.1 mRNA and protein was verified by RTPCR and Western blot. Results： The sequence of cloned NKX3.1 cDNA was identical to that documented in GeneBank. RTPCR and Western blot results indicated that NKX3.1 cDNA was effectually expressed in the transfected PC3 and LNCaP cells. Conclusion： The eukaryotic expression vector pcDNA3.1NKX3.1 is successfully constructed and effectually expressed in PC3 and LNCaP cells.

Key words: Genes, homeobox, Eukaryotic expression vector, Gene expression, TransfectionNKX3.1

[1] 张士宝 刘庆勇 阮喜云 陈杰 张建军 李宗武 杨广笑 王全颖. NT4-SAC-HA2-TAT融合基因表达载体的构建及鉴定[J]. 山东大学学报(医学版), 2209, 47(6): 15-19.
[2] 葛丽娟 金瑞峰 王纪文 许新升 李癊. 多药耐药基因1 C1236T多态性与癫痫患者对药物反应性的相关性[J]. 山东大学学报(医学版), 2209, 47(6): 99-102.
[3] 郝跃伟 刘雪平 赵婷婷 郑敏 王一兵. 环氧化酶2基因多态性与动脉粥样硬化缺血性脑卒中的相关性[J]. 山东大学学报(医学版), 2209, 47(6): 95-98.
[4] 杨宇凡,李悦,谢灏,林春华. 胆固醇水平与神经源性膀胱风险的因果关系[J]. 山东大学学报 (医学版), 2026, 64(5): 67-73.
[5] 杨静,张磊. 儿童早期多生态位病毒组解析:未分类噬菌体多样性及其宿主特征[J]. 山东大学学报 (医学版), 2026, 64(5): 116-124.
[6] 段盈竹,董波,于睿. 内在情感与类风湿关节炎患者冠状动脉粥样硬化风险关系的孟德尔随机化分析[J]. 山东大学学报 (医学版), 2026, 64(4): 63-71.
[7] 齐硕,刘可宇,徐展望,谭国庆,张强. 改良活检优化宏基因组二代测序腰椎间盘感染早期诊断策略[J]. 山东大学学报 (医学版), 2026, 64(2): 96-103.
[8] 张秋萍,朱慧志,吕川,夏咏琪,张秀. 基于生物信息学分析鉴定哮喘潜在的关键自噬和铁死亡相关基因[J]. 山东大学学报 (医学版), 2026, 64(1): 74-87.
[9] 王皓正,张文雄. Q热伴胸腹主动脉瘤支架植入术后感染1例并文献复习[J]. 山东大学学报 (医学版), 2026, 64(1): 126-130.
[10] 李晶,鞠苇杭,刘珂. 泛癌细胞类型特异性基因共表达模式[J]. 山东大学学报 (医学版), 2025, 63(9): 31-39.
[11] 王珊,刘伟,冯强,范莹莹,刘海霞,段延华,温红玲,焦伯延. 2021年济宁市柯萨奇病毒A组6型分离株全基因组特征分析[J]. 山东大学学报 (医学版), 2025, 63(9): 92-101.
[12] 李千,杨帆,薛付忠. 基于多模态数据融合的多癌种风险预测模型[J]. 山东大学学报 (医学版), 2025, 63(8): 79-85.
[13] 葛雪,赵红艳. 疱疹病毒感染对重症肺炎患者临床预后及呼吸道微生态的影响[J]. 山东大学学报 (医学版), 2025, 63(6): 27-37.
[14] 黄馨,王梦雪,付书璠,张琦悦,徐力. 代谢综合征及其组分与消化系统恶性肿瘤的因果关联:两样本孟德尔随机化研究[J]. 山东大学学报 (医学版), 2025, 63(5): 86-94.
[15] 徐晶晶,王新起,张洋,许旺旺,高进. P2X7受体抑制剂对青春期创伤后应激障碍大鼠行为及肠道菌群的影响[J]. 山东大学学报 (医学版), 2025, 63(4): 1-9.
Viewed
Full text


Abstract

Cited
  Shared   
  Discussed   
No Suggested Reading articles found!
版权所有 © 2018 《山东大学学报(医学版)》编辑部　
地址:山东大学科技期刊社（济南市历城区山大南路27号山东大学中心校区明德楼B座721室） 电话: 0531-88366918 E-mail: xbyxb@sdu.edu.cn
本系统由北京玛格泰克科技发展有限公司设计开发