转染VMAT2基因的CHO细胞抵抗多巴胺毒性作用的研究

山东大学学报(医学版)

转染VMAT2基因的CHO细胞抵抗多巴胺毒性作用的研究

王铭维¹^,²，顾　平¹^,²，刘　力²，王彦永¹^,²，崔冬生²

1．河北医科大学第一医院神经内科，河北石家庄 050031；2．河北省脑老化与认知神经科学实验室，河北石家庄 050031

收稿日期:2005-08-31 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-02-24 发布日期:2007-02-24

The VMAT₂transgenic CHO cells resist dopamine toxicity

WANG Ming-wei¹^,²，GU Ping¹^,²，LIU Li²，WANG Yan-yong¹^,²，CUI Dong-sheng²

1.Department of Neurology, First Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050031；2.Hebei Laboratory of Brain Aging and Cognitive Neuroscience, Shijiazhuang050031

Received:2005-08-31 Revised:1900-01-01 Online:2007-02-24 Published:2007-02-24

摘要/Abstract

摘要： 目的：探讨囊泡单胺转运体（vesicular monamine transporter-2,VMAT2）对多巴胺（dopamine,DA）毒性的抵抗作用。方法：采用细胞免疫荧光染色法测定VMAT2基因在转染的CHO细胞（VMAT2-CHO）中的表达；MTT比色法检测不同浓度DA作用下的野生型CHO（WT－CHO）和VMAT2-CHO细胞存活率；应用ELISA法DA检测试剂盒测定细胞内DA的水平；采用活性氧检测试剂盒测定细胞内活性氧的水平。结果：VMAT2-CHO细胞内有较强的特异性荧光表达，主要定位在核周区域，胞浆中也有散在的荧光； 0.25～0.4mmol/L DA作用72h, VMAT2-CHO细胞存活率显著高于WT-CHO细胞（P<0.05）；0.4mmol/L DA作用于WT-CHO和VMAT2-CHO细胞24?h，VMAT2-CHO细胞内DA为（199.33±15.155）ng/ml，显著高于WT-CHO细胞（141.4±8.784）ng/ml（P<0.01）；而细胞内活性氧（ROS）水平则由（144.490±5.295 ）U/106cells增加至WTCHO细胞的（217.895±15.885）U/106cells（P<0.01）。结论：转染VMAT2的CHO细胞对DA引起的毒性有显著的抵抗作用。

Abstract: Objective: To study the resistance of VMAT2 transgenic CHO cells to the toxicity of dopamine. Methods: Immunofluorescence was used to detect the expression of VMAT2; MTT assay was used to detect the viability of wild type china hamster ovary cells (WT-CHOs) and the VMAT2 transgeneic CHO cells (VMAT2-CHOs) with different concentrations of dopamine; meanwhile ELISA assay and ROS kit were respectively used to measure the dopamine level and reactive oxygen species of the cytoplasm. Result: The result indicated that there was an apparent green fluorescence at the circumference of the nucleus in VMAT2-CHO, but there was no fluorescence in WT-CHO. Being acted upon by dopamine for 72h with the scope of 0.25-0.4mmol/L, the viability of VMAT2-CHO was higher than that of WT-CHO (P<0.05); the dopamine level of VMAT2-CHO(199.33±15.155?ng/ml) was higher than that of WT-CHO(141.4±8.784ng/ml)(P<0.01) at 24 hours after being affected by dopamine, while the ROS decreased from 217.895±15.885 U/106cells in WT-CHO to 144.490±5.295 U/106 cells in VMAT2-CHO (P<0.01). Conclusion: VMAT2 transgenic CHO cells can resist the toxicity of dopamine.

Key words: Vesicular monamine transporter-2, Dopamine, Reactive oxygen species, Chinese hamster ovary cell

中图分类号:

R742.5

王铭维,顾　平,刘　力,王彦永,崔冬生 . 转染VMAT2基因的CHO细胞抵抗多巴胺毒性作用的研究[J]. 山东大学学报(医学版), 2007, 45(2): 149-151.

WANG Ming-wei,GU Ping,LIU Li,WANG Yan-yong,CUI Dong-sheng. The VMAT₂transgenic CHO cells resist dopamine toxicity[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (HEALTH SCIENCES), 2007, 45(2): 149-151.

参考文献

相关文章 11

[1]	陈思, 王牧川, 任楠楠, 许巍, 王玲玲, 栾海辉, 马俊, 刘艺鸣. Parkin基因多态性与山东省汉族帕金森病发病风险的关系[J]. 山东大学学报（医学版）, 2015, 53(4): 71-74.
[2]	张静1,暴丽华1,2,吴金涛1,李贵宝1,刘海莉1,岳庆伟1,朱德晓1,孙东1，宋守阳1，丁兆习1,孙晋浩1. 帕金森病肠功能分析及CXCR4在肠神经系统中的表达[J]. 山东大学学报（医学版）, 2014, 52(5): 25-29.
[3]	孟祥继，庞琦，丁锋，辛涛，杨洪安. 纹状体立体定向注射Taclo建立帕金森病大鼠模型[J]. 山东大学学报（医学版）, 2014, 52(3): 16-18.
[4]	曹伟，刘威，辛涛，庞琦. 纹状体定向注射TaClo介导的大鼠行为学改变及其黑质中cox-2的表达[J]. 山东大学学报(医学版), 2013, 51(11): 6-9.
[5]	陈思1，刘艺鸣1，任楠楠1，陈良1，李佳珍3，宁翔2，王京1. 散发性早发帕金森病PARK2基因突变及其临床特征[J]. 山东大学学报(医学版), 2012, 50(7): 55-59.
[6]	李恒1，李晓红2，毕建芬3，陈亚娜4. 全反式维甲酸促人脐血多能干细胞向多巴胺能神经元分化[J]. 山东大学学报(医学版), 2012, 50(6): 92-96.
[7]	李佳珍1，刘艺鸣1，吴林2，相媛媛3，张杨4，陈思1，任楠楠1. 美多芭与安坦对PD大鼠抑郁症状的影响[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(11): 30-33.
[8]	杜鑫瑞1，辛涛1，滕良珠1，邴国英2，庞琦1. 1-三氯甲基-l,2,3,4-四氢化-β-咔啉(TaClo)介导的体外培养多巴胺能神经元凋亡及其机制[J]. 山东大学学报(医学版), 2011, 49(8): 41-.
[9]	常铮1，2，许继平1. 多巴药物对帕金森病患者神经细胞的毒性作用及相关保护因素的研究[J]. 山东大学学报(医学版), 2010, 48(10): 69-72.
[10]	刘力崔冬生崔慧先顾平耿媛王铭维. 鱼藤酮致PC12细胞凋亡中Par-4蛋白的表达[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(5): 34-37.
[11]	. 利血平对转染VMAT2基因的CHO细胞抵抗鱼藤酮及多巴胺毒性作用的研究[J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(7): 1-3.

多维度评价

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed