张丽1,2,李亮2,李克忠3,姚尚龙1
ZHANG Li1,2,LI Liang2,LI Ke-zhong3,YAO Shang-long1
摘要: 目的观察谷氨酰胺诱导A549细胞表达HSP70及在抗过氧化氢(H2O2)诱导的细胞凋亡中的作用。方法体外培养A549细胞,随机分为4组:①空白对照组(C组)即生理盐水组;②谷氨酰胺组(Gln组):以含谷氨酰胺8mmol/L的培养液预处理细胞;③过氧化氢组(H2O2组):以浓度为400μmol/L过氧化氢处理细胞;④谷氨酰胺预处理后过氧化氢刺激组(Gln+H2O2组):以含谷氨酰胺8mmol/L预处理细胞后,再加入400μmol/L过氧化氢处理细胞. 用免疫印记(Western blotting)法检测HSP70蛋白的表达,记录平均灰度值;用流式细胞仪Annexin-V法检测细胞凋亡,计算细胞总凋亡率。结果① 与C组HSP70表达(1.87±0.55) 相比,Gln组(8.42±1.38)、H2O2组(9.35±1.57)和Gln+H2O2组(13.12±1.85)的HSP70表达分别增高约4.5倍、5倍和7倍(P<0.01);与H2O2组HSP70表达相比,Gln+H2O2组进一步增高(P<0.01);②与C组相比,Gln组细胞总凋亡率无明显变化;H2O2组和Gln+H2O2组细胞总凋亡率分别为7.48%和6.06%,均明显高于C组(P<0.01);与H2O2组相比,Gln+H2O2组细胞总凋亡率明显降低(P<0.01)。结论谷氨酰胺诱导A549细胞表达HSP70并可明显地抑制H2O2所致的细胞凋亡作用。
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