小鼠孤雌胚胎干细胞直接向神经细胞诱导分化的实验研究

山东大学学报(医学版)

小鼠孤雌胚胎干细胞直接向神经细胞诱导分化的实验研究

韦多，王彦，高选，沈芸，徐凯，赵跃然，赵力新，陈子江

山东大学附属省立医院生殖医学中心，济南 250021

收稿日期:2007-11-19 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-05-16 发布日期:2008-05-16
通讯作者: 韦多

Direct differentiation of mouse parthenogenetic stem cells into neural cells without embryonic body culture in vitro

WEI Duo, WANG Yan, GAO Xuan, SHEN Yun, XU Kai, ZHAO Yue-ran, ZHAO Li-xin, CHEN Zi-jiang

Center for Reproductive Medicine， Provincial Hospital Affiliated to Shandong University, Jinan 250021, China

Received:2007-11-19 Revised:1900-01-01 Online:2008-05-16 Published:2008-05-16
Contact: WEI Duo

摘要/Abstract

摘要： 目的探讨小鼠孤雌胚胎干细胞在体外不经过拟胚体(EB）阶段，直接诱导分化为神经细胞的可行性。方法采用阶段诱导的方法，首先由孤雌胚胎干细胞向神经前体细胞定向分化，通过巢蛋白(nestin)免疫荧光细胞化学染色对神经前体细胞进行鉴定。在此基础上，撤除丝裂原，加入5%胎牛血清，观察已分化的神经前体细胞能否进一步分化为神经细胞，并对分化出的细胞进行免疫荧光细胞化学鉴定。结果经选择培养基培养3?d后的孤雌干细胞绝大多数可诱导为神经前体细胞，nestin呈阳性。加入血清进一步诱导，可分化出β-Ⅲ-tubline阳性的神经细胞。结论小鼠孤雌胚胎干细胞在体外不经EB培养阶段，可直接诱导分化为神经细胞，并且前期可得到大量的神经前体细胞。

关键词: 神经元, 诱导分化, 神经前体细胞, 胚胎干细胞, 孤雌生殖

Abstract: To investigate the feasibility of direct differentiation of mouse parthenogenetic stem cells into neural cells without embryonic body culture in vitro. MethodsThe method of phase induction was used to induce direct differentiation from parthenogenetic stem cells to neural precursors which were identified by nestin immunofluorescence staining. Sequential culture was applied for the further differentiation into neural cells with the removal of mitogen and addition of 5% fetal bovine serum. The characteristics of the further induced cells were identified by immunofluorescence staining. ResultsLarge amounts of parthenogenetic stem cells were differentiated into neural precursors, which were nestin-positive in the selected medium on the 3rd day. Also β-Ⅲ-tubline-positive neural cells could be induced from the neural precursors by further culture. ConclusionMouse parthenogenetic stem cells could be directly differentiated into neural cells without embryonic body culture in vitro and induce large amounts of neural precursors.

Key words: Parthenogenesis, Embryonic stem cells, Inducing differentiation, Neural precursor, Neurons

中图分类号:

R329.21

韦多,王彦,高选,沈芸,徐凯,赵跃然,赵力新,陈子江. 小鼠孤雌胚胎干细胞直接向神经细胞诱导分化的实验研究[J]. 山东大学学报(医学版), 2008, 46(5): 445-448.

WEI Duo,WANG Yan,GAO Xuan,SHEN Yun,XU Kai,ZHAO Yue-ran,ZHAO Li-xin,CHEN Zi-jiang. Direct differentiation of mouse parthenogenetic stem cells into neural cells without embryonic body culture in vitro[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (HEALTH SCIENCES), 2008, 46(5): 445-448.

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