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山东大学学报（医学版）

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玻璃化冷冻对人体外成熟卵母细胞微丝分布及发育潜能的影响

慈倩倩，李梅，吴克良，马水英，王苗苗，刘辉，高芹，石玉华，陈子江   

  1. 山东大学附属省立医院生殖中心  国家辅助生殖与优生工程技术研究中心 
    生殖内分泌教育部重点实验室  山东省生殖医学重点实验室， 山东 济南 250021
  • 收稿日期:2013-10-18 出版日期:2014-04-10 发布日期:2014-04-10
  • 通讯作者: 陈子江 E-mail：chenzijiang@hotmail.com
  • 基金资助:
    国家重点基础研究发展计划(973计划，2011CB944502)；国家科技支撑计划 (2012BAI32B04)；生殖与生育重大疾病诊治的规范化与推广卫生公益性行业科研专项(201002013)；山东大学自主创新基金(2012TS131)；山东省自然科学基金(ZR2013HQ053)

Effects of vitrification on microfilaments′ distribution and development potentiality of human in vitro matured oocytes

CI Qianqian, LI Mei, WU Keliang, MA Shuiying, WANG Miaomiao, LIU Hui, GAO Qin, SHI Yuhua, CHEN Zijiang   

  1. Center for Reproductive Medicine, Shandong Provincial Hospital Affiliated to Shandong University;
    National Research Center for Assisted Reproductive Technology and Reproductive Genetics;
    The Key Laboratory for Reproductive Endocrinology of Ministry of Education;  
    Shandong Provincial Key Laboratory of Reproductive Medicine, Jinan 250021, Shandong, China
  • Received:2013-10-18 Online:2014-04-10 Published:2014-04-10

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摘要： 目的  通过对比分析人体外成熟卵母细胞玻璃化冷冻前后的微丝分布和发育潜能，探讨冷冻对卵母细胞发育潜能的影响及相关的细胞学机制。方法  收集人未成熟卵母细胞，体外培养为成熟卵母细胞。获得的成熟卵母细胞随机分为新鲜组和玻璃化冷冻组，分别行受精和免疫荧光染色分析。受精后观察2PN数、囊胚数及优质囊胚数等指标，染色后用激光共聚焦显微镜观察微丝分布形态。结果  玻璃化冷冻复苏后卵母细胞成活率为83.74%。新鲜组2PN数、囊胚数及优质囊胚数均高于玻璃化冷冻组(P<0.05)。新鲜组微丝正常率为71.67%，玻璃化冷冻组为67.50%，两组间差异无统计学意义(P=0.71)。结论  适当的玻璃化冷冻复苏方案未改变人体外成熟卵母细胞的微丝分布。但是，冷冻后卵母细胞的发育潜能降低，因此单纯观察微丝分布不能作为冷冻对卵母细胞发育潜能的评价指标。

关键词: 玻璃化冷冻, 卵母细胞, 受精, 体外成熟, 微丝, 人

Abstract: Objective  To find the changes of development potential and microfilament structure which were affected by vitrification for human in vitro matured oocytes. Methods  Human in vitro matured oocytes were gathered and randomly divided into two groups: fresh group and vitrified group. The oocytes were fertilized and immunofluorescencently stained. The numbers of 2PN, blastocyst and high quality blastocyst were calculated and the microfilaments structures were observed by laser confocal microscopy (LSCM). Results  The survival rate of oocytes was 83.74% after vitrification-warming. The 2PN, blastocyst and high quality blastocyst of the fresh group were significantly higher than those of vitrified group (P<0.05). There was no statistical difference in normal microfilaments rate between fresh group and vitrified group (71.67% vs 67.50%, P=0.71). Conclusion  The proper vitrification-warm process doesn’t change the microfilaments structures of human in vitro matured oocytes, but it reduces their development potential. Thus, morphology of the microfilaments alone can’t be taken as the indicator of the developmental potential.

Key words: In vitro maturation, Vitrification, Human, Microfilament, Fertilization, Oocyte

中图分类号: 

  • R574
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