躯干神经嵴干细胞体外分离培养及其增殖、分化的实验研究

山东大学学报(医学版)

躯干神经嵴干细胞体外分离培养及
其增殖、分化的实验研究

卢静¹，孙晋浩¹，张静¹，丛丽¹，綦晓霞¹，庄园²，杨洁¹，李振华¹

（山东大学医学院 1. 解剖学教研室； 2. 组织与胚胎教研室, 济南 250012）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 发布日期:2009-04-16
通讯作者: 李振华

Culture, proliferation, and differentiation of trunk neural crest
stem cells in early embryos of rats: an in vitro experiment

LU Jing¹, SUN Jinhao¹, ZHANG Jing¹, CONG Li¹, QI Xiaoxia¹,
ZHUANG Yuan², YANG Jie¹, LI Zhenhua¹

（1. Department of Anatomy; 2. Department of Histology and Embryology, School of Medicine,
Shandong University, Jinan 250012, China）

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Published:2009-04-16
Contact: LI Zhenhua

摘要/Abstract

摘要： 目的体外分离培养鉴定躯干神经嵴干细胞，探讨其生物学特性，为研究周围神经再生修复提供新的细胞来源。方法取大鼠胚胎躯干部神经管，组织块法培养获取躯干神经嵴干细胞，通过形态学及免疫细胞化学观察其细胞生长、增殖、分化等特性。结果原代培养的躯干神经嵴干细胞呈梭形，其特异性标记物nestin和p75表达阳性，并有较高的增殖活性。传代培养后，在含血清培养基中，其分化细胞呈GFAP、MAP2、αSMA阳性。结论成功地培养了躯干神经嵴干细胞，细胞表现出多潜能干细胞特性，为研究周围神经组织工程种子细胞来源提供实验依据。

关键词: 神经嵴, 干细胞, 细胞培养, 细胞分化

Abstract: To establish a method for in vitro culture of trunk neural crest stem cells and to explore their biological properties, so as to find a new treatment for peripheral nervous system diseases. MethodsA neural tube towards the caudalmost 10 somites obtained from fetal rats at E10.5 was isolated and explanted in a plate coated with fibronectin for 2 days. Truncal neural crest stem cells were collected after being trypsinased. Their growth proliferation and differentiation were observed by an inverted phase contrast microscope and immunocytochemical technique. ResultsPrimary culture of truncal neural crest stem cells with fibroblastlike appearance demonstrated characteristics of neural stem cells, such as clonality and pluripotency. Immunocytochemical staining showed that the cells expressed nestin and p75. Truncal neural crest stem cells could differentiate into neurons, Schwann cells and smooth musclelike cells in the serumcontaining medium. ConclusionTrunk neural crest stem cells were successfully cultured in vitro, which provides an experimental basis for further research of tissue engineering of candidate cells.

Key words: Neural crest, Stem cell, Cell culture, Cell differentiation

中图分类号:

R322.8

卢静1 ，孙晋浩1 ，张静1 ，丛丽1 ，綦晓霞1 ，庄园2 ，杨洁1 ，李振华1
. 躯干神经嵴干细胞体外分离培养及
其增殖、分化的实验研究 [J]. 山东大学学报(医学版), 2009, 47(04): 46-49.

LU Jing¹, SUN Jinhao¹, ZHANG Jing¹, CONG Li¹, QI Xiaoxia¹,
ZHUANG Yuan², YANG Jie¹, LI Zhenhua¹. Culture, proliferation, and differentiation of trunk neural crest
stem cells in early embryos of rats: an in vitro experiment[J]. JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY (HEALTH SCIENCES), 2009, 47(04): 46-49.

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